不同因素对家兔离体肠肌收缩的影响
摘要：目的 研究0.01%乙酰胆碱（Ach）、0.01%肾上腺素(NE)、1当量NaOH、1当量HCl、
20℃台氏液及缺氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法 向浸有离体家兔肠肌的37℃的台氏液依次滴加0.01?h、0.01%NE、1当量NaOH、1当量HCl、停止供氧及迅速换成17℃的台氏液，并用生物信号采集处理系统记录肠肌的收缩情况。结果滴加0.01?h、1当量NaOH后，肠肌运动张力和频率都增大；滴加0.01%NE、1当量HCl 肠肌运动张力与频率迅速降低；将37℃的台氏液迅速换成20℃的台氏液后，肠肌运动肠肌运动张力与频率先迅速降低后逐渐增大。停止通氧后，肠肌运动张力和频率逐渐降低；恢复通氧后，肠肌运动张力和频率逐渐升高。结论一定浓度Ach、NaOH 可促进肠肌的运动；一定浓度的NE、HCl可以抑制肠肌的运动；低温能使肠肌运动暂时减弱；短时缺氧使肠肌运动在一开始有增强的现象，而后减弱。 关键词 不同因素；离体肠肌；运动 1.材料和方法[1] 1.1实验材料：家兔。 1.2实验仪器：麦氏浴槽、超级恒温箱、空气泵、恒温离体小肠灌流装置、微调固定器、 张
力换能器、生物信号采集处理系统、木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、钢碗。
1.3实验药品和试剂：台氏液、0.01%乙酰胆碱（Ach）、0.01%肾上腺素(NE)、NaOH、HCl。 1.4离体家兔肠肌制备：取家兔一只，将其倒提，用木锤猛击后脑勺，使之昏迷，将其仰
卧位固定，用手术剪从剑突下沿腹部白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长，打开腹壁，暴露腹腔，顺着胃找到与胃相连的十二指肠，沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约30cm，放入一小手术盘中，用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物，直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中，用手术刀刮去肠管外的血管和系膜，将小肠段切割成小段，每小段肠约2cm长，并在小段肠的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线。
1.5标本固定
1.5.1取出固定架，将肠段的下端的线头尽量靠近并牢固地绑紧在固定架的小钩，将固
定架放回内槽，使小钩尽量靠近槽底（尽量减少台式液的使用），重新用张力微调器固定固定架，将空气泵重新连接至固定架，并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。
1.5.2将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢升降拉线，
保持线有一定紧张度，肠段、线应与地平面垂直，同时，肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。
1.5.3换液：打开灌流槽的内槽排水阀门，排去原来的台氏液，用20ml注射器从恒温
水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中，其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流量调节旋钮，使气泡即细小、均匀，又不影响肠段的运动。
1.6实验观察
1.6.1待肠活动恢复后，向台氏液中加入0.01%乙酰胆碱（Ach）1滴，观察小肠收缩活
动的改变, 待反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37℃的台氏液。
1.6.2待肠活动恢复后，向台氏液中加入0.01%肾上腺素(NE)1滴，观察小肠活动的改
变，待反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37℃的台氏液。
1.6.3待肠活动恢复后，向台氏液中加入1N NaOH1滴，观察小肠收缩活动的改变，待.
反应稳定后冲洗1遍。 1.6.4待肠活动恢复后，向台氏液中加入1N HCl1滴，观察小肠收缩活动的改变反应稳
定后冲洗1遍。 1.6.5记录一段37℃的台氏液环境中小肠平滑肌收缩活动曲线，观察其收缩活动的特
点。关闭恒温水泵，将原37℃台氏液换成等量的20℃台氏液，观察肠活动的改变, 待其活动改变明显时，冲洗1遍，再加入等量的37℃的台氏液。
1.6.6待肠活动恢复后，停止空气泵的工作，观察肠活动的改变，待其收缩活动改变明
显时反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37℃的台氏液，空气泵描记一段肠段收缩活动恢复曲线后终止实验。
2.实验结果 见附图。
滴加0.01?h、1当量NaOH后，肠肌运动张力和频率都增大； 滴加0.01%NE、1当量HCl肠肌运动张力与频率迅速降低；
将37℃的台氏液迅速换成20℃的台氏液后，肠肌运动肠肌运动张力与频率先迅速降低后逐渐增大；
停止通氧后，缺氧后肠肌开始一段有增强的现象，而后肠肌运动张力和频率逐渐恢复正常；恢复通氧后，肠肌运动张力和频率先降低而后恢复正常。 3.分析与讨论
3.1Ach可明显兴奋胃肠道平滑肌，故：①收缩频率增高：Ach与肌膜上的M受体结合，使生电性钠泵活动减弱，从而使静息电位升高，平滑肌兴奋性提高。②收缩幅度增加：平滑肌钙离子专用通道开放，钙离子内流，一方面使收缩频率增加，另一方面可以增加肌浆钙离子浓度。
3.2肾上腺素作用于肌膜，一方面使生电性钠泵活动增强，另一方面结合膜受体。其中Cl受体使钾离子外流增加，β受体使钾、钙离子外流增加，同时增强钙泵活动。其中生电性钠泵活动增强、钾、钙离子外流增加导致细胞膜超级化，平滑肌兴奋性降低，收缩频率降低。钙离子外流、钙泵活动增强导致肌浆钙离子浓度下降，收缩幅度下降。 3.3消化道平滑肌对化学刺激敏感，小肠的PH约为7.0～8.0，过高或过低的PH都会影响肠肌的收缩。滴加1当量NaOH后，台氏液的PH值处于7.0～8.0之间，处于肠肌收缩的最适PH，肠肌运动加强。由于[H+]降低：①使钙离子通道活性受抑制减弱，钙离子内流，平滑肌兴奋性增高，故收缩频率增高，收缩幅度增强；②肌浆网钙离子释放增加，平滑肌收缩幅度增强。张力曲线而后下降，说明肠肌对PH值变化有一定的适应力[2]。
3.4消化道平滑肌对化学刺激敏感，滴加1当量HCl后，台氏液的PH低于最适范围（7.0～8.0），胞外[H+]升高：①抑制钙通道的活性，钙离子内流减少，肌肉收缩减弱。②干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程，氢离子与钙离子竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低，使肌原纤维对钙离子的敏感性和钙离子从肌质网的释放量减少。收缩减弱。
3.5消化道平滑肌对温度刺激敏感。37℃的台氏液迅速换成20℃的台氏液后，肠肌内的酶活性降低，小肠代谢水平降低，故平滑肌兴奋性降低导致收缩频率降低，同时收缩幅度也减弱。由于肠肌对低温有适应能力，故随后肠肌运动逐渐恢复正常。 3.6停止通氧后，肠肌运动得不到能量供给，故肠肌运动在缺氧开始一段时间代偿性增强；由于ATP有限，故随后运动张力和收缩幅度减弱。恢复通氧后，肠肌得到能量供给，
肠肌代偿运动消失，故造成运动张力和频率短暂降低，由于ATP充足，故随后运动张力和频率逐渐升高。 4.结论
一定浓度Ach、NaOH通过增强钙离子通道活性而促进肠肌的运动；一定浓度的NE、HCl通过减弱钙离子通道活性而抑制肠肌的运动；低温通过抑制酶活性而使肠肌运动暂时减弱；短时缺氧能使肠肌运动暂时代偿性增强，随后减弱。 5.参考文献
[1]陆源 林国华 杨午鸣 主编。机能学实验教程，第二版，北京科教出版社，2010。176。 [2]朱大年 主编。生理学，第七版。人民卫生出版社，2009。164。