激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定
刘峡汛
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1. 武汉科技大学医学院临床1105班 湖北 武汉 430065 [摘要]
目的:观察家兔注射肾上腺素或胰岛素前后血糖水平的变化 方法:采用邻甲苯胺法测血糖浓度。
结果:注射胰岛素的家兔空腹血糖含量为182mg/dL,药后血糖含量 为129mg/dL;注射肾上腺素的家兔空腹血糖含量为81mg/dL,药后血糖含量为119mg/dL。
结论:胰岛素会使血糖浓度降低,肾上腺素会使血糖浓度升高。 [关键词] 血糖浓度 胰岛素 肾上腺素
引言:正常情况下,血糖浓度在各种因素调解下,维持相对恒定,但现如今糖尿病可谓是医学界的一大顽症,目前并无良药可医,对于此种病当以预防为主。因此身为医学生,掌握激素对血糖浓度的影响及如何测量血糖浓度显得有为重要。
原理:1.血糖浓度即指血液中的葡萄糖浓度。血糖水平相当恒定,维持在80—120mg/dL之间。空腹血糖水平的相对恒定是在神经激素调节下血糖的来路和去路达到动态平衡的结果,其中激素调节站主导地位。调节血糖的激素有:胰岛素,肾上腺素,胰高血糖素,肾上腺皮质激素,生长素和甲状腺激素。胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素,其他激素均使血糖升高。2.葡萄糖在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛,后者与邻甲苯胺缩合,生成蓝绿色的西夫
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氏碱,其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。 1.材料与方法 1.1材料
仪器:722型分光光度计 试剂:
1.正常家兔(实验前预先使其饥饿14—16小时)两只。称体重,一只为2.55kg,另一只为1.8kg。
2.肾上腺素(1mg/1ml) 3.胰岛素(5单位/ml) 4.碘酒,消毒酒精
5.饱和硼酸溶液:取硼酸6g,溶于100ml蒸馏水中,摇匀,放置过夜后过滤,即可应用。
6.邻甲苯胺试剂 :取冰醋酸(AR)940ml,加入硫脲(AR)1.5g,溶解后加入邻甲苯胺60 ml混匀,置棕色瓶中,室温保存。新配试剂应放置24小时后(待老化)使用。此试剂腐蚀性极强,应避免与皮肤接触而造成灼伤。
7.12mmol/L苯甲酸溶液
称取苯甲酸1.4g,加入蒸馏水900ml,加热助溶,冷却后加蒸馏水至1000ml。
8.葡萄糖标准贮存液(100mmol/L)
准确称取无水葡萄糖(预先置80℃烤箱中干燥至恒重,移置干燥器中保存)1.802g,用12mmol/L苯甲酸溶液溶解,移至100ml容
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量瓶中,再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,摇匀,移入棕色瓶中,冰箱内保存。
9.葡萄糖标准应用液(5mmol/L)
准确吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml,置于100ml容量瓶中,再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度。 1.2方法
取血
1.动物准备:取正常家兔(实验前预先使其饥饿14—16小时)两只。称体重,一只为2.55kg,另一只为1.8kg。
2.注射激素前取血:从耳缘静脉采血。用酒精棉球擦拭耳缘,血管充血后用双面刀片割破,使血液滴入盛有草酸钠(每毫升血2mg)抗凝剂的小烧杯中。
3.注射激素:给2.55kg的家兔注射胰岛素(剂量为5单位/kg),给1.8kg的家兔注射肾上腺素(剂量为0.5mg)。半小时后再次采血。
4.测定血糖:分别测定各血样的糖含量,比较讨论之。 1.3测定
1.三氯醋酸无蛋白血滤液的制备。取抗凝血0.4ml,放入一洁净小试管中,加入5%三氯醋酸3.6ml,边加边摇使其充分混匀。3000rpm离心5分钟,取上清夜。
2.取试管8支,编号两套1234,按下表操作,分两次进行。
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试剂ml\\编号 空白管标准管药前(3) 药后(4) (1) (2) _ 1.0 _ _ _ _ 蒸馏水 标准葡萄糖应用液 1.0 _ 无蛋白血滤液 _ (药前) 无蛋白血滤液 _ (药后) 邻甲苯胺试剂 2.5 _ 1.0 _ _ _ 1.0 2.5 2.5 2.5 各管分别混匀,同时置于沸水中加热8分钟,取出用自来水冲洗管壁冷却。于722型分光光度计630nm进行比色,以空白管校正零点,读取各管光密度值。 2.结果
2.1数据
胰岛素注射: 2.6kg家兔标准管0.D=0.6264 胰前管0.D=0.6743 胰后管0.D=0.2091
肾上腺素注射:2.3kg家兔标准管0.D=0.5614 肾前管0.D=0.4991 肾后管0.D=0.8795 2.2公式 血糖(mg%)=
O.D测定O.D标准*0.1*10.1*100?O.D测定O.D标准*100
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2.3代入 胰前血糖(mg%)=胰后血糖(mg%)=肾前血糖(mg%)=肾后血糖(mg%)=3.讨论
胰岛素是唯一降低血糖的激素,其降低血糖是多方面作用的
结果:1.促进肌,脂肪组织等的细胞膜GLUT将葡萄糖转运入细胞;
2.通过增强磷酸二酯酶活性,降低cAMP水平,从而使糖原
合酶活性增强,磷酸化酶活性降低,加速糖原合成,抑制糖原分解;
3.通过激活丙酮酸脱氢酶磷酸酶而使丙酮酸脱氢酶激活,
加速丙酮酸氧化为已酰CoA,从而加快糖的有氧氧化;
4.降低磷酸烯醇式丙酮酸激酶mRNA水平,抑制肝内糖异生; 5.抑制脂肪组织内的激素敏感性脂肪酶,减缓脂肪动员。肾
上腺素主要作用于肝,肌细胞膜受体,激活腺苷酸环化酶,将ATP变为cAMP,cAMP可激活依赖cAMP的蛋白激酶(PKA),一方面PKA使磷酸化酶b激酶磷酸化激活,激活的磷酸化酶b激酶可使磷酸化酶激活,糖原分解加快。另一方面PKA使糖原合酶磷酸化失活,抑制糖原合成。葡萄糖作为机体最主要的供能物质,它能维持机体正常的新陈代谢,它的含量稳定与否关系着整个生命,所以其
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0.67430.62640.20910.62640.49910.56140.87950.5614*100?107.6468mg%*100?33.3812mg%*100?88.9027mg%
*100?156.6619mg%
调节机制至关重要。本实验主要验证了胰岛素和肾上腺素的作用。 参考文献
1.李萍 《妊娠糖代谢异常的研究》 《实用医学杂志》2006年22卷03期 2.江明礼《食物血糖生成指数与糖尿病饮食治疗》 《实用医院临床杂志》2006年3卷06期
3. 査锡良《生物化学(第七版)》 人民卫生出版社 116-117
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