《植物生物技术基础》模拟试卷答案
一、 名词解释（20%，每小题4分）
1、平板培养与看护培养：平板培养是将单细胞与培养基在35℃下混合，在培养皿内铺成一个薄层进行培养。为保证通气隆，一般薄层厚度不超过3mm。多用于单、小孢子等培养。看护培养：一般是用一块愈伤组织诱导其细胞产生愈伤组织，即用愈伤组织看护细胞培养。 2、脱分化与再分化：脱分化是指一个成熟或化的细胞转变为分生状态的细胞的过程；再分化是由一个成熟或已分化的细胞转变为分生状态的细胞后，再生成各种形态的细胞，产生根芽等器官的过程。 3、花粉培养与花药培养：花粉培养是由单细胞培养，即是用花粉进行组织培养，以单核靠边期时的花粉培养效果最好；花药培养是器官培养，用花药进行组织培养，不仅其中的花粉会产生愈伤组织（n）。花丝、花药壁也可能产生愈伤组织（2n），此时要提高渗透压来抑制；花药培养是器管培养，花粉培养是细胞培养，二者目的均是用于产生单倍体。 4、农杆菌介导和基因枪法：外源基因转化的两种方法，前者用农杆菌感染的方法实现外源基因的导入，后者则是外源基因直接导入。 5、胚状体和人工种子：在组织培养中由体细胞不经过雌雄配子结合产生的，但其发育过程类似合子胚的培养产物；人工种子是体细胞胚经过处理和包埋后开成的类似种子的结构，可萌发成幼苗。 二、填空（20%，每空1分）
1、固体培养的具有（1）操作简便 、（2）利于愈伤组织的诱导、（3）利于进行愈伤组织的分化等优点，但具有（4）生长不均匀、（5）易积累有毒物质等缺点；而液体培养则具有（6）不易积累有毒物质 、（7）细胞生长快、（8）细胞质地均一等优点，（9）二者交潜使用可达到理想的效果。一般的固体培养支撑剂是（10）琼脂。
2、离体花药培养过程中小孢子发育途径有（11）营养核途径、（12）生殖细胞发育途径、（13）营养细胞和生殖细胞并进发途径和（14）均等分裂途径等四种途径。
3、人工种子的应用价值（潜在）有（15） 固定杂种优势 、（16）名贵植物快速繁殖 、 （17）繁殖速度快、（18）不受气候条件影响 、（19）基因工程应用于生产实践的桥梁 和（20） 理论研究和商业应用 等。 三、是非题（10%，每小题1分）
1、 植物离体根系无地上部分合成能源等有机物质，因此根系离体培养一般宜采用营养丰富的MS培养基。( × ) 2、 花药培养应取花粉粒处于单核靠边期的花药为材料，预处理可用冷冻（冷冻箱内7~14天）或热击（42℃下1~2天）。（ × ） 3、 植物组织培养的培养基中常加硝酸银，因为硝酸银抑制乙烯的产生。（ √ ） 4、 用叶片获取的原生质体含有叶绿体和叶绿素，因此必须在直射光下进行培养才能确保其原生质体的正常生长。（ × ） 5、 活性碳可以吸附有毒物质，因此在培养基中加一定的活性碳可以减少培养过程中产生的毒素物质对培养物本身的影响。（ √ ） 6、 农杆菌侵害双子叶植物而不能侵害单子叶植物，因此，水稻基因工程中只能基因枪法（微弹轰击法）。（ × ） 7、 为了操作方便，在配制培养基时应预先配制母液，因铁元素应以络合物形式单独配制。（ √ ） 8、 花药培养是产生单倍体的主要途径，因此目前棉花单倍体的产生也是采用花药培养技术或小孢子培养技术。（ × ） 9、 基因工程可实现基因在微生物、植物、动物各大体系间的自由交流。因此，目前，基因工程中改良动植物品种的最有效途径。（ × ） 10、 植物细胞壁的主要成份是纤维素、半纤维素和果胶质，用酶解法获得原生质体需用含有纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的复合酶。（ √ ）
五、选择题（10%）（每小题1分）
1、植物组织培养实验室非必须具备的实验设备和仪器有（ 3 ）。
（1）消毒锅 （2）酒精灯 （3）PCR仪 （4）电炉
2、植物胚胎培养的最主要目的是（ 2 ）
（1） 繁殖稀有种子； （2）克服远缘杂交的不亲和性； （3）克服种子休眠；（4）获得愈伤组织并再生成植株。
3、单细胞培养的接种密度是细胞分裂的关键因素，其初次浓度应在：( 3 )
（1） 10个/ml左右（2）100个/ml左右 （3）100000个/ml （4）5000000
个/ml 4、大麦单倍体主要是通过以下哪种途径获得：（ 4 ）
（1） 无性繁殖 （2）子房培养 （3）半配合生殖 （4）远缘杂交 5、接种室在使用前需用紫外线杀菌，一般消毒时间为：（ 2 ）
（1） 10分钟 （2）20分钟 （3）1小时 （4）2 小时
6、基因工程中常用的载体有许多，以下哪一种载体更适合于双子叶植物外源基因转化？（ 3 ）
（1） 噬菌体DNA （2）人造染色体 （3）Ti质粒 （4）植物病毒
RNA 7、水稻胚乳培养产生的再生植株，较多的是（ 3 ）
（1） 单倍体 （2）二倍体 （3）三倍体 （4）四倍体
8、培养基灭菌的最适温度为（ 2 ）
（1）100℃ （2）120℃ （3）140℃ （4）160℃
9、水稻等禾本科植物花药培养再生的植物往往是二倍体，其原因可能是（ 1 ）
（1）自然加倍 （2）花药壁细胞再生 （3）花丝细胞再生 （4）其它
细胞再生 10、
影响植物组织培养效果的最主要因素是（ 1 ）
（1） 培养基成份 （2）培养室相对湿度 （3）CO2浓度（4）培养器皿
类型 四、问答题（每小题8分，共40分）
1、什么是体细胞杂种？如何选择和鉴定体细胞杂种？举例说明体细胞杂种的意义。 参考答案：
体细胞杂种是由原生质体融合等方法产生的拥有不同物种基因的杂合体细胞。体细胞杂种在形态上拥有双亲性状，有染色体数目或结构上的变异，在同工酶上拥有双亲酶谱或特有酶谱，在生理生化上拥有生化物特性，分子杂交时能与双亲染色体杂交。可以通过以上几方面进行杂种体细胞的鉴定。筛选体细胞杂种的方法有：1. 互补选择法（1）互补产生激素自养型选择（2）营养缺隙型互补选择（3）抗性互补选择（4）叶绿素和光抗型互补选择；2. 颜色标记选择；3. 机械分离法选择，杂种细胞在形态上与其他细胞不同。体细胞杂种可克服远缘杂交的不育性，有利于染色体结构和数目变异，可克服性细胞的保守性，进行细胞质基因的改育和选育。
2、按操作程序先后写出植物体细胞培养再生植株的操作步骤及注意事项。 参考答案：
操作程序及注意如下：
（1） 取材：要注意选择部位、季节气候、营养条件、基因型、大小等方
面总是。双子叶植物一般用胚轴，单子叶植物要选正季材料。种子、叶片、茎也可用外植体。组培中常用种子消毒的无菌苗为外植体。 （2） 培养基配制：大量元素、微量元素配成母液，钙盐要单独溶解再与
大量元素母液混合，铁盐要单独配制。激素是单 个配，生长素溶于稀碱或酒精，细胞分裂素溶于稀酸或酒精。维生素有机物要适量。配好培养基后要调节pH值，灭菌
（3） 材料消毒，注意选择合适的消毒剂种类、浓度及时间
（4） 接种，注意保持无菌环境，接种前紫外灯先开半小时，并用酒精擦
拭台面及器械。在靠近酒精灯火焰处操作。操作规范，不能说话。 （5） 培养时注意控制温度、湿度、光昭等条件，防止污染。愈伤组织诱
导后要及时继代或进行分化。注意分化与诱导愈伤组织的激素比例是不同的。 3、简述植物组织培养在植物育种中的价值。 参考答案： （1）
利用茎尖培养等保存种质资源
（2） 用于克服远缘杂交的不育性，如胚胎培养可使缺乏种子生活力的
植物获得后代，可使胚发育不完全的植物获得后代，如体细胞杂交即原生质体融合，克服性细胞的保守性，利于染色体结构及数目变异的传递。 （3） 克服珠心胚的影响，如柑桔会产生许多腺心胚，对合子胚的发育
产生影响，不利于育种，可用胚胎培养来解决。 （4） （5） （6）
打破种子休眠，如胚胎培养可缩短育种年限，进行种子活力测定。 保持优良性状，如茎尖培养，繁殖掊毒苗可用茎尖培养技术。 可用于筛选变异细胞产生新品种，如体细胞培养。
（7） 单倍体育种，如花药、花粉培养可用于快速纯合后代，缩短育种年限，产生纯合的异交系，获得高优质性状，提高选择效率。 （8） 多倍体和非整倍体的创造及育种应用，胚乳培养可产生三倍体，
加倍后为六倍体可用于杂交育种，三倍体也是产生三体的重要来源。 （9）
培育转基因作物，植物组织培养是转基因技术的基础。
4、植物组织培养的实验室的主要设备和技术条件有哪些？ 参考答案：
植物组织培养实验室包括：准备室、接种室、细胞室。准备室中有大水槽、灭菌锅、风箱、工作台、药品柜、冰箱、微波炉等设备，主要进行洗涤和培养基的制备。接种室有风扇、空调、紫外灯、接种台等设备，要尽可能保持无菌
状态，以进行接种。接着室包括空调、控温仪、紫外灯、培养架等设备，进行培养。细胞室是进行研究之处，有体视显微镜等，没有也可以。 5、简述植物组织培养的意义。 参考答案：
（1）植物组织培养可用于珍稀植物的快速繁殖，进行工厂化生产，可获得大量的植物次生代谢物，用于工业与制药；（2）可用于生产人工种子；（3）可在基因工程的辅助下将外源基因导入植物细胞进行组织培养，工厂化生产有用物质；（4）生物转化，可给植株细胞提供一般不存在的底物，合成天然产物或给植物提供天然产物的中间体，如前体以提高产量；（5）生产脱毒苗；（6）作物育种上提高育种效率、缩短育种时间。