镇江华大检测有限公司
新项目投入使用审批表
项目名称 食品中沙门氏菌的检测 实验目的 方法确认 监测方法 方法出处 GB/T 4789.4-2010 规格型号 仪器名称 恒温培养箱 上海精宏 DNP-9272 实验起止时间 上交报告日期 项目负责人 参加人 报告起草人 日期 室主任审核 日期 技术负责人 批准 日期
编号： BZD/JL-CX16-02
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一．实验记录(实验中现象、情况、技术关键、注意事项)
1、 增菌培养：25g样品+225mlBPW，36℃培养24h后，取1ml转钟于10mlTTB、10mlSC、10mlRV内，TTB和RV于42℃培养24h，SC于36℃培养24h。观察生长情况：在氯化镁-孔雀绿增菌液、TTB增菌液和SC增菌液中，海蜇的颜色与阴性对照基本一致。
2、分离培养：分别挑取增菌液接种在BS、HE、XLD和沙门显色培养基上，36℃培养24h（BS培养48h）,观察各平板上菌落生长情况。
1）、BS：如右图所示典型菌落为黑色金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈黑色
或棕色；有些菌株形成灰绿色的菌落，周围培养基不变。左图为海蜇样品，在BS培养基上未长出菌落。
2）HE：如右图所示典型菌落为蓝绿色或蓝色，多数菌落中心黑色或几乎全黑色；有些菌株为
黄色，中心黑色或几乎全黑色。左图为海蜇样品，在HE培养基上未长出菌落。
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3）XLD：如右图菌落所示典型菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽
的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心。左图为海蜇样品，在XLD培养基上未长出菌落。
4）沙门显色培养基：如右图菌落所示典型菌落呈品红色或紫红色。左图为海蜇样品，在沙门
显色培养基上未长出菌落。
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5）酚红煌绿培养基：如右图菌落所示典型菌落为是粉红培养基颜色由酚红变红。左图为
海蜇样品，培养24h后，酚红煌绿培养基未变色，未长出菌落。
2、 鉴定实验： 1）生化鉴定
标准菌株：TSI琼脂上培养24h后，斜面红色产碱，琼脂变黑，产生硫化氢；
尿素琼脂上培养24h后，琼脂不变色，表现为阴性； 赖氨酸脱羧酶实验培养后实验管为蓝绿色，表现为阳性； 靛基质实验加入靛基质后颜色未变色，变现为阴性； ONPG实验培养后试剂为变色，表现为阴性；
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KCN实验培养后，对照管和生长管均为生长，表现为阴性； V-P实验加入V-P试剂后颜色未变色，表现为阴性。
2）血清学鉴定：标准菌株在生理盐水中无法自凝，在血清中出现自凝现象，表现为阳性。
二．技术说明
本实验采用GB/T 4789.4-2010食品安全国家标准中的微生物生物学检验中的沙门氏菌检验，通过增菌、前增菌、分离培养以及生化试验和血清学鉴定，最后综合生化试验和血清学鉴定的结果，报告25g样品中检出或未检出沙门氏菌。 三．结论
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标准菌株生化鉴定结果 TSI 尿素琼脂 赖氨酸脱羧酶 靛基质 ONPG实验 KCN实验 + - - - V-P实验 - 斜面红 色，培养- 基变黑 海蜇数据分析与结果 指标 HE 分离培养 BS XLD 沙门显色培养基 生化鉴定 血清学实验 结果报告 沙门未长出 未长出 未长出 未长出 氏菌 未长出 未长出 未长出 未长出 -- -- 未检出
编号： BZD/JL-CX16-02
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