齐齐哈尔大学化学专业实验
Cr3+在510nm和575nm处，得到的标准曲线为：
由图可知在510nm处， Cr3+的标准曲线斜率为4.28271, 即ελ1，Cr=4.28271
由图可知在575nm处， Cr3+的标准曲线斜率为10.48832,即ελ2，Cr=10.48832
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因为 Aλ1M+N=0.527 Aλ2M+N=0.364 （λ1=510nm λ2=575nm M:Co2+ N:Cr3+） 因此由
Aλ1M+Nελ2,N—Aλ2M+Nελ1,N
CM = 式（3） ελ1，Mελ2,N—ελ2，Mελ1,N
Aλ1
M+N
— CM ελ1，M
CN = 式（4） ελ1,N 可得：
Aλ1M+Nελ2,N—Aλ2M+Nελ1,N 0.527×10.48832-0.364×4.28271
CM = = =0.11 mol/L ελ1，Mελ2,N—ελ2，Mελ1,N 4.6086×10.48832-3.01211×4.28271
Aλ1M+N— CM ελ1，M 0.527-0.11×4.6086
CN = = =0.0047 mol/L ελ1,N 4.28271
[思考题]
1.有关条件实验中，均以水为参比，为什么在测绘标准曲线和测定试剂时，要以试剂空白溶液为参比？
答:主要是消除试液中产生吸光的因素 2.本实验的显色剂是何试剂，其作用是什么？
答：显色剂是抗坏血酸。 作用：聚磷酸盐经酸性水解为正磷酸盐，正磷酸盐与钼酸氨在酸性溶液中反应生成黄色钼酸盐，生成的黄色化合物可被还原剂如抗坏血酸还原为钼蓝，使溶液呈现出特殊的蓝色。
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实验6 从槐花米中提取芦丁
[实验目的]
1．学习黄酮苷类化合物的提取方法。 2．学习用碱法提取芦丁。
[仪器与药品]
研钵；天平；电炉；500mL烧杯；250mL烧杯；小烧杯；移液管；抽滤装置；玻璃棒；滴管；pH试纸；紫外分光光度计；容量瓶；25mL比色管；100mL容量瓶；红外光谱仪。 槐花米；浓盐酸；乙醇；CaO；10%Al(NO3)3溶液；5%NaNO2溶液；4%NaOH溶液。
[实验原理]
芦丁（Rutin）又称芸香苷（Rutioside）有调节毛细血管壁的渗透性的作用，临床上用作毛细血管止血药，作为高血压症的辅助治疗药物。
芦丁存在于槐花米和荞麦叶中，槐花米是槐系豆科槐属植物的花蕾，含芦丁量高达12%~16%，荞麦叶中含8%，芦丁是黄酮类植物的一种成分，黄酮类植物成分是存在于植物界并具有以下基本结构的一类化合物：就黄色色素而言，它们的分子中都有一个酮式羰基又显黄色，所以称为黄酮。芦丁是黄酮苷，其结构如下：
[实验步骤]
1.配制饱和石灰水250—300mL,10%Al(NO3)3溶液10mL,5%NaNO2溶液10mL，4%NaOH溶液100mL。
2.芦丁的提取
称取16g槐花米于研钵中研成粉状，置于250mL烧杯中，加入100mL饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸12—15分钟后，趁热抽滤，滤渣再用100mL饱和石灰水溶液煮沸10min，合并滤液，在60—70°C用15%盐酸中和，调节pH=4—5，放置约2小时，使沉淀，抽滤，水洗2—3次，得芦丁粗产物，烘干、称量、计算产率。
3.芦丁标准曲线的制作
将制得的芦丁产品称取20mg，置于250ml烧杯中，加入100ml70%乙醇，100mL容量瓶中定容。分别吸取标准品溶液0.00mL,2.00mL,4.00mL,6.00mL,8.00mL,10.00mL置于
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25mL比色管中，分别加70%乙醇溶液至12mL,各加5%NaNO2溶液1mL，摇匀，放置6min,各加10%Al(NO3)3溶液1mL，摇匀，放置6min,各加4%NaOH溶液10mL，加70%乙醇溶液至刻度，摇匀，定容，放置15min,以70%乙醇空白溶液为参比，在509nm波长范围处测定吸光度，以芦丁标准品的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4.产品纯度测定
称取20mg芦丁产品，置于250ml烧杯中，加入100ml70%乙醇，100mL容量瓶中定容。精密吸取4.00mL产品溶液，置于25mL比色管中，加70%乙醇溶液至12mL,加5%NaNO2溶液1mL，摇匀，放置6min，加10%Al(NO3)3溶液1mL，摇匀，放置6min,加4%NaOH溶液10mL，加70%乙醇溶液至刻度，摇匀，定容，放置15min,以70%乙醇空白溶液为参比，在509nm波长范围处测定吸光度，由吸光度值从第2步的标准曲线上查出样品的浓度，由浓度计算出相应的样品质量，计算产品浓度。
[实验结果与讨论]
1. 记录实验条件及数据
表1 标准曲线表
浓度mg/ml 0 0.016 0.032 0.048 0.064 0.080 吸光度A 0.041 0.199 0.310 0.466 0.744 0.823
2.由图中公式可知在509nm处，当吸光度A=0.339 时，C=0.031 mg/mL 则： C×25×100 0.031×25×100
纯度= ×100%= ×100%=0.969 mg/mL 4×20 4×20
[思考题]
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1 为什么可用碱法从槐花米中提取芦丁？
答：因为芦丁在碱性水溶液中溶解度较高，在酸性条件下溶解度低较易析出结晶。 2 黄酮类化合物有哪些提取方法？芦丁的提取还可以用什么方法？
答：有微波提取法、有机溶剂提取法、超临界萃取法、酶辅助提取法、超声波辅助提取法等。
芦丁的提取还可以用热水提冷析出方法、热水提大孔吸附树脂纯化法、超声辐射法、连续回流提取法、乙醇浸提法、超临界CO2提取法、杀酶碱提法等。
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