中药制剂分析
中药制剂分析是以中医药理论为指导，应用现代分析理论和方法，研究中药制剂质量的一门应用学科，是中药科学领域中一个重要的组成部分。意义：保证临床用药的安全有效，对新药研究质量研究与标准的制定。任务：掌握现代分析方法，对制剂工艺、鉴别、检查、定量等各方面做出评价。新药研究和质控方法的研究。中药制剂分析的发展趋势：全面化、自动化
中药制剂分析的特点：1、中药制剂化学成分的多样性与复杂性2、中药制剂原料药材质量的差别3、以中医药理论为指导原则，评价中药制剂质量4、中药制剂工艺及辅料的特殊性5、中药制剂杂质来源的多途径性6、中药制剂有效成分的非单一性7、中药质量控制方法的多元性。
中药制剂分析工作的基本程序：取样、制备供试品、鉴别、检查、含量测定、书写检测报告。中药制剂分析必须要有完整的原始记录，检验报告要真是完整。 中药不但要鉴别真伪，还要鉴别优劣。
取样所取样品要具有代表性 “四角加中央” 液体药品：上中下
提取方法：溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、超临界流体萃取法和升华法。
“四分法”用适当的器皿将样品堆积成正圆锥形状后，以锥体定点为中心，十字状垂直向下切开，将其分成均等的四分。
检查：制剂通则检查、一般杂质检查、特殊杂质检查、微生物限度检查。 中药制剂鉴别的目的：判断该制剂的真伪。
显微鉴别局限性：只能鉴别真伪不能鉴别优劣；只能鉴别保持原药材粉末制剂，不能鉴别提取物
观察后含物常用装片试剂：1，水溶性细胞后含物（菊糖）—乙醇或水合氯醛，粘液质—墨水2淀粉粒：甘油醋酸（1：1）3糊粉粒—稀甘油4菌类—水或稀甘油
片剂的取样：从正中切开，于切开面由外至内刮取少量样品。
杂质：指能危害人体健康或影响药物质量的物质。杂质的分类：一般杂质，特殊杂质。杂质来源：中药材原料中带入，生产制备过程中引入，贮存过程中引起的中药制剂自身理化性质的改变 杂质的限量检查：确保临床用药的安全性，反映生产管理过程中存在的问题 杂质限量计算方法：限量%=规定限量/样品量*100%
重金属检查法：中国药典四种方法：直接法，灼烧后检查，碱性，用Na2S显色，BP法 重金属：在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。（纳氏管中目视比色）
砷盐检查基本原理：五价砷比三价砷反应慢，为消除五价砷对结果准确性的影响，必须将其还原成三价。碘化钾和酸性氯化亚锡，将五价砷还原成三价砷。碘离子与锌离子形成配合物，使生成砷化氢的反应不断进行。氯化亚锡可与锌反应形成锌锡合金，其去极化作用，使锌粒和盐酸作用缓和，增加反应的灵敏度和准确性。 干燥失重：常压恒温干燥，干燥剂干燥，减压干燥，热分析法，甲苯法，气相色谱法（水分检查） 炽灼残渣检查法：500—600°C检查无机杂质。非挥发性无机杂质 液体中药制剂包括：合剂，酒剂，酊剂、注射剂、口服液 一般质量要求：形状（无异味，无沉淀），相对密度和总固体含量，PH值，装量差异，乙醇含量，甲醇含量，防腐剂限量，微生物限量。
合剂1稳定性（加速试验，留样观察）2总固体物3含量 酒剂与酊剂重金属，炽灼残渣，甲醇限量
半固体中药制剂包括流浸膏剂，浸膏剂，糖浆剂，煎膏剂 一般质量要求：形状（外观无焦臭，浓稠适度），乙醇量，含糖量，pH值，相对密度和总固体含量，不溶物，装量，微生物限度。
固体中药制剂包括：丸剂，片剂、散剂、颗粒剂、栓剂、滴丸剂
丸剂：一般质量要求：形状、水分（12%—15%）重量差异，装量差异和装量；溶散时限，微生物限度（螨若检出，则一定不合格）
片剂：形状；重量差异；崩解时限；硬度、微生物限量
颗粒剂：性状，粒度、水分、溶化性；装量差异或装量；微生物限度 散剂：性状（干燥，疏松），粒度，外观均匀度，水分（不得超过9.0%）装量差异，微生物限度
一般要求检查：安瓿瓶漏气检查，装量差异（不得少于10%）澄明度；明胶检查；酸碱度；渗透压（冰点下降法）；蛋白质除尽试验，鞣质，草酸检查，重金属，K+检查，炽灼残渣，安全性，热源试验，无菌。 安全性检查：急性毒理，刺激性，溶血实验
质量标准的分类：国家标准：临床研究用质量标准，用于审批的标准，暂行或试行的药品质量标准，正式的
药品质量标准。企业标准：一般高于法定标准要求 质量标准的特性：权威性，科学性，进展性
制定质量标准的前提：药物组成固定，原料稳定，制备工艺稳定
质量标准研究程序：依据法规制定方案，查阅有关资料，试验研究，制定质量标准草案。
制定标准的原则：必须保证药品的安全有效；必须符合药典和其它法定标准，必须结合实验和中试生产实际；把
检测方法的先进性与实用性相结合。
名称：1）根据剂型命名，剂型列于后2）单位药以药材名与剂型结合3）复方（采用主要药材缩合命名；主要药材加功效命名，几味药加注命名）注意：不得用代号或夸大疗效
1． 简述中药制剂的检查包括的主要内容。中药制剂的检查根据其目的意义主要包括制剂通则检查、一般杂
质检查、特殊杂质检查和微生物限度检查。
2． 简述中药制剂有效成分非单一性的含义。中药制剂的产生疗效不是单一成分作用的结果，也不是某些成
分简单作用的加和，而是各成分之间的协同作用，所以某单一成分的含量高低并不一定与其临床作用效果具有简单的线性关系。
3． 简述中药制剂杂质来源的多途径性。中药制剂的杂质来源很多，可由生产过程中带入，也可由原药材中
带入，如药材中非药用部位及未除净的泥沙；药材中所含的重金属及残留农药；包装、保管不当发生霉变、走油、泛糖、虫蛀等产生的杂质；洗涤原料的水质二次污染等途径均可引入杂质。
4． 简述中药制剂化学成分的多样性。中药制剂多由复方组成，每味中药都含有种类众多的化学成分，由几
味乃至几十味中药组成的复方中药制剂成分就更加复杂，如含有多种无机物质、有机物质，在所含有机物质中可以是不同类别的如生物碱类、黄酮类、有机酸类、苷类等成分，在这些相同类别的成分中又可能含有性质相近的多种同系物，如人参所含化学性质相似的人参皂苷类成分就有几十种之多，再者中药制剂中所含成分的含量高低也差别很大。含量高者可达百分之几十，低者可至千万分之几，所有这些因素就构成了中药制剂所含化学成分的多样性与复杂性，给质量分析带来较大的困难。
5． 常用的中药制剂鉴别方法有哪几种？常用的中药制剂分析的鉴别方法有性状鉴别、显微鉴别和理化鉴别
三种方法。性状鉴别是指中药制剂除去包装后的性状；显微鉴别是指用显微镜来观察制剂中原药材的组织碎片、细胞或内含物等特征。最常用的鉴别方法是理化鉴别，它可以利用各种物理的、化学的或物理化学的方法和手段对中药制剂中所含的化学成分进行定性鉴别，具有较高的专属性。
6．为什么说中药指纹图谱可以控制中药制剂的内在质量？
中药制剂的功能主治不像化学药品那样明确地直接地瞄准某个或某几个“靶点”发挥作用，往往是通过修复、调整，调动人体的某些机能而达到防病治病的目的，所以选定某一中药的“有效成分”、“活性成分”或“指标成分”建立相应的定性、定量标准，不能满足中药质量控制的要求。中药指纹图谱是综合的、宏观的质量控制体系，它不是针对某一成分所作的技术控制指标，而是可控制某一制剂中所含的成分种类和相对含量的高低的宏观控制体系，特别是色谱指纹图谱，是确认中药制剂产品的真伪、质量稳定与否的综合的可量化的质量评价模式，可起到控制中药制剂内在质量的目的。
8．中药制剂分析的检验程序包括哪些步骤？中药制剂分析的对象包括制剂中原料、半成品、成品及新药开发研究中的试验样品，其检验程序一般可分为取样、制备供试品、鉴别、检查、含量测定、书写检测报告等。 9．中药分析的原始记录应记载哪些内容？中药制剂的原始记录记载所试药品的名称、来源、批号、数量、规格、取样方法、外观性状、包装情况、检验目的、检验方法及依据、收到日期、报告日期、检验中观察到的现象、检验数据、检验结果、结论等内容。
2．中药制剂分析的主要特点包括哪些？中药制剂分析多由复方组成，其组成复杂，成分众多，其主要特点主要包括以下几点：化学成分的复杂性和多样性，由于同类成分的存在，成分之间的相互干扰，使分析测定更加困难；原药材的品种、规格、产地、药用部位、采收季节、加工炮制方法等存在着差异，也影响着中药制剂的质量；有效成分的非单一性表现在中药制剂产生的疗效不是某单一成分作用的结果，所以检测某单一物
质，并不能完全反映其内在质量；制剂工艺及辅料对质量也会产生影响。此外在进行中药制剂质量分析时要与中医药理论相结合，考虑到以上这些特点，制定切实可行的分析方案。
3．原药材的质量对中药制剂的质量会产生什么影响？中药制剂中由于历史的原因，所用原药材来源广泛，质量差异较大，如原药材的品种、规格、药用部位、采收季节、加工方法、饮片炮制工艺等的差别，都将对成品的质量产生较大的影响，只有将这些影响因素加以规范，如采用规范化种植的药材，有严格的质量控制标准的炮制饮片，才可保证中药制剂的产品的质量稳定、均衡、疗效可靠。
4．中药制剂中的化学成分复杂性包括哪几方面？中药制剂中所含成分众多，有些成分之间还会相互影响，含量发生较大变化；有些含有众多的同系物，给分离分析带来较大困难；有些成分在制剂工艺过程中会发生较大的变化，如生成沉淀、发生降解、分解等，使含量降低；有些成分之间会生成复杂的复合物，其理化性质发生较大变化。从中药制剂中所含成分的种类来看，也非常广泛而复杂，如生物碱类、黄酮类、苷类、有机酸类、蒽类、醌类等，在这些成分中有些属于有效成分，有些属无效物质，所有这些构成了一个复杂的整体。
8．中药制剂中的提取方法与净化方法各有哪几种，要点是什么?中药制剂分析中提取方法的要点是尽可能将被测成分提取出来，在提取的同时，可能会伴随一些杂质被提取，提取效果的好坏以提取率为衡量指标，应最大限度地将欲测成分提出。净化方法的要点是将欲测成分与“杂质”分离，或者说是从提取物中除去“杂质”，但不能使欲测成分的含量受到影响。检验两种方法的成功与否，都可用回收率试验。在提取方法中最常用的是溶剂提取法，而净化方法常用色谱法。
1． 简述中药制剂显微鉴别的含义。利用显微镜来观察中药制剂中原药材的组织碎片、细胞或内含物等特征，
从而鉴别制剂的处方组成。 2．
3．中药制剂性状鉴别的内容主要有哪些？颜色、形态、形状、气、味等。
3．试述中药制剂显微鉴别的特点。中药制剂的显微鉴别与单味中药材粉末的显微鉴别相比较要复杂的多。在选择制剂的显微鉴别指标时，要对处方中各药味逐一分析比较，考虑选用能相互区别、互不干扰，能表明该药味存在的显微特征作为鉴别依据。目前处方中每一味药多用一个最主要的特征作为鉴别指标。
何为一般杂质和特殊杂质？一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药材的采集、收购、加工以及制剂的生产或贮存过程中容易引入的杂质，如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等。特殊杂质是指在该制剂的生产和贮存过程中，根据其来源、生产工艺及药品的性质有可能引入的杂质。
中药制剂杂质来源的主要途径是什么？主要有三种途径：一是由中药材原料中带入；二是在生产制备过程中引入；三是贮存过程中受外界条件的影响而使中药制剂的理化性质改变而产生。
5. 何为干燥失重？其常用的测定方法有哪些 ？干燥失重指药品在规定的条件下，经干燥后所减失的重量，主要是指水分、结晶水，但也包括其他挥发性的物质如乙醇等。常用的测定方法有：常压恒温干燥法、干燥剂干燥法、减压干燥法、热分析法等。
6. 干燥失重测定和水分测定有何区别？常用水分测定方法有哪些 ？干燥失重测定法除测定水分外尚包括挥发性成分，而水分测定仅仅是测定供试品中的水分。水分测定方法主要有烘干法、甲苯法、减压干燥法、气相色谱法、费休氏水分测定法等。
7. 简述总灰分和酸不溶性灰分的概念。中药经粉碎后加热，高温炽灼至灰化，则其细胞组织及其内含物成为灰烬而残留，由此所得灰分为总灰分。总灰分加盐酸处理，得到不溶于盐酸的灰分，即为酸不溶性灰分。 10. 为什么中药制剂的杂质只进行限量检查，一般不测定其准确含量？在不影响疗效和不发生毒副作用的原则下，对于中药制剂中可能存在的杂质允许有一定限度，在此限度内，杂质的存在不致对人体有毒害，不会影响药物的稳定性和疗效，因此，对中药制剂中的杂质进行限度检查即可。
12. 应该从哪些方面评价中药制剂是否优良有效？中药制剂是否优良有效，主要从两方面来评价：首先是中药制剂本身的效力及其有无副作用；其次是所含杂质的程度及杂质对人体所产生的影响。
14. 检查重金属时，如供试液有颜色应如何处理？供试品在加硫代乙酰胺试液以前如带色，可用稀焦糖液调整标准溶液，使两者颜色一致，而后加入硫代乙酰胺试液。或者滴加其他对滴定无干扰的试液如加常用的指示剂调色。
15. 进行砷盐检查时，反应液中加入KI和氯化亚锡的目的是什么？①将五价砷还原为三价砷。②溶液中的碘离子，与反应中产生的锌离子能形成配合物，使生成砷化氢的反应不断进行。③抑制锑化氢生成。④氯化亚锡可在锌粒表面形成锌锡齐（锌锡的合金）起去极化作用，使锌粒与盐酸作用缓和，放出氢气均匀，使产生的砷化氢气体一致，有利于砷斑的形成，增加反应的灵敏度和准确度。
1. 试比较冷浸法、回流提取法和连续回流提取法的主要优缺点。（1）冷浸法：操作简单，适合于热不稳定的样品，且提取杂质少，但耗时长。（2）回流提取法：提取效率高于冷浸法，且可缩短提取时间，但提取杂质较多，对热不稳定或具有挥发性的成分不宜使用。（3）连续回流提取法又称索氏提取法，本法提取效率高，所需溶剂少，操作简便，但受热易分解的成分不宜使用。
2.简述超临界流体提取法（SFE）的主要特点。SFE具有萃取速度快、萃取效率高、选择性高、节省溶剂、易于自动化等特点，而且可避免使用易燃、有毒的有机溶剂，还能与色谱和光谱等分析仪器直接联用。SFE最适合于对热不稳定成分和挥发油等的萃取。另外，也可通过改变提取体系的压力或超临界流体的组成实现分步提取。
3.色谱法是样品净化的主要方法，按其分离原理和操作方式可分为哪些方法？在含量测定中进行样品净化时，常用的是哪种操作方式？其主要特点是什么？色谱法按分离原理分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶色谱法。色谱法的操作方式有柱色谱、薄层色谱和纸色谱法。样品净化时最常用的是经典微柱色谱，也称固相萃取或液-固萃取法（LSE）。其主要特点是设备简单，使用方便，快速，净化效率高。
4．简述化学分析法在中药制剂定量分析中适用于哪类成分的测定，有何特点，试举例说明。化学分析法包括重量分析和滴定分析，主要适用于制剂中含量较高的一些成分及含矿物药制剂中的无机成分，如总生物碱类、总有机酸类、总皂苷等。化学分析法所用仪器简单、结果准确，但灵敏度低，操作繁琐，专属性差，故不适用于制剂中单体成分、微量及痕量成分的测定。
5．试简述如何用萃取重量法测定中药制剂中总生物碱、有机酸的含量。萃取重量法是根据被测组分在互不相溶的两相中溶解度（或分配系数）的不同，采用溶剂萃取方法使之与其它组分分离，挥去萃取液中的溶剂，称量干燥萃取物的重量，求得被测组分含量的方法。对中药制剂中的生物碱、有机酸成分，根据其盐能溶于水，而游离酸、碱不溶于水但溶于有机溶剂的性质，可采取萃取重量法测定。调节溶液的pH值（一般酸性物质pH值应低于其pKa2～3个单位，碱性物质pH值应高于其pKa2～3个单位），使有机酸、生物碱以游离形式存在，再选用适宜的有机溶剂萃取，挥去溶剂，称重，即可计算总有机酸或生物碱的重量，如2000版药典收载的昆明山海棠片中总生物碱的含量测定，甘草浸膏中甘草酸的含量测定。
7．薄层扫描法方法学考察时作标准曲线的目的何在？对于用Kubelka-MunK曲线校直法进行定量的仪器作标准曲线的目的是（1）检查所选择的散射参数SX是否适宜。SX值适宜则工作曲线被校为直线，否则，需再调整；（2）考察工作曲线是否过原点，以确定采用外标一点法还是用外标二点法定量；（3）确定点样量的线性范围。对采用回归法进行定量计算的薄层扫描仪（如CAMAG系列），其工作曲线可直接用于定量。平行点多点对照品溶液，由计算机对所测得的数据进行线性或非线性回归，定义出回归方程，计算供试品的含量。 8．薄层扫描法定量测定中药制剂中有效成分含量时为何常用随行外标法？为了克服薄层板间差异，薄层扫描法定量时常采用随行标准法。内标法虽然克服了外标法必须准确点样的缺点，其定量准确度与点样量无关，但内标物难寻且操作繁琐。而实际工作中外标法采用同一根定量毛细管点样，或直接用半自动点样仪点样，其误差在允许范围内，因而实际工作中常采用随行外标法而不用内标法 。
12．简述GC、HPLC建立中药制剂有效成分含量测定方法时系统适用性试验的各项参数及具体指标。按《中国药典》2000年版附录要求，应用GC、HPLC法建立中药制剂有效成分含量测定方法时，需按各品种项下要求对仪器进行适用性试验，具体规定包括在分析状态下色谱柱的最小理论塔板数、分离度、重复性及拖尾因子。色谱柱的理论塔板数视各组分情况而定，一般n≥2000；分离度按药典标准R≥1.5；重复性要求对照品溶液连续进样5次，其峰面积RSD≤2.0%；除另有规定外，拖尾因子T应在0.95～1.05之间。
13．简述气相色谱法分析不同组分时柱温的选择。GC分析中一般根据样品的沸点来选择柱温。对于高沸点样品，采用低配比固定液，柱温较高；对于低沸点样品，采用高配比固定液，柱温选沸点左右（较低）；而对于宽沸程样品，则采用程序升温方法分析。
16．简述HPLC分析时，固定相（色谱柱）及流动相的选择。根据被分离物质的化学结构、极性和溶解度等因素来选择固定相及流动相，应用HPLC进行中药制剂有效成分含量测定时，一般都使用商品柱，大多数药物可用C18（ODS）反相柱进行分离测定，因此建立分析方法时，可先试用C18反相柱，不行再改用其它柱，可按以下原则进行：（1）弱极性、中等极性组分，选择C18或C8反相柱，流动相采用醇-水系列（即用甲醇-水、乙腈-水、四氢呋喃-水），通过调节醇-水比例控制保留值及分离选择性；（2）对具有酸碱性质或具有离解性的物质，仍用C18反相柱，可在流动相中加入缓冲液，抑制解离，或加入离子对试剂使之形成中性离子对化合物，采用离子抑制色谱或离子对色谱的方法测定；（3）对于极性较大物质，一般采用氨基、氰基等正相柱，以正已烷-异丙醚混合溶剂系统分离测定（也可以TLC为先导摸索合适流动相）。
19．HPLC应用于中药制剂定量分析最常用的定量方法是什么？为什么？19．答案要点：HPLC法应用于中药制剂定量分析最常用的定量方法是外标法。因为外标法无需知道校正因子，只要被测组分出峰，保留时间适宜，无干扰即可，操作简便，唯有要求进样量须准确，而目前HPLC仪一般都采用定量圈（10?l、20?l）进样，按定量圈体积3～5倍进样，可保证进样的准确性，故HPLC最常用的定量方法为外标法。 1、在定量分析中药制剂中某一成分含量时，常以待测成分的标准品作对照，一般有哪几种定量方法（外标法）？请简要说明之。以待测成分的纯品（标准品）作对照，一般有以下几种定量方法：① 标准曲线法：即将标准品配成不同浓度梯度的溶液（一般要求至少5个）。按规定的条件处理、测定；根据测定值与其对应浓度求出线性关系和回归方程。其目的有二：①确定待测成分在该条件下测定浓度与测定参数关系的线性范围，以便正确对供试品取量。②计算供试品中待测成分的含量。② 外标一点法：若已知标准曲线是通过原点，则只须一个量的标准品点，与原点的连线即为标准曲线；以此计算样品中待测成分的含量。③ 外标二点法：若已知标准曲线不通过原点，则至少需要二个不同量的标准品点，才能决定一条直线；即以二点所确定的标准曲线计算样品中待测成分的含量。④ 标准加入法：分别取数份等体积的试样溶液，加入不同浓度的对照品溶液，稀释到一定体积，这样就配成了含不同浓度对照品的一系列溶液；在规定条件下测定。以测定值为纵坐标，对应加入的对照品的量（浓度）为横坐标，可得一条直线，此直线的延长线与横轴的交点到原点的距离即为样品溶液中待测成分的量（浓度）。
4、试述薄层扫描法定量分析中药制剂某成分含量的方法及操作要点。（1）方法确定：根据被测组分的性质选择TLCS测定方法，若组分在可见、紫外区有吸收，则采用双波长薄层吸收扫描法测定；若组分具有荧光或转化为荧光衍生物，则采用薄层荧光扫描法测定；（2）根据样品组成及组分性质，制备成供试液及对照品溶液。选择合适薄层板，随行点样后，在合适溶剂系统中展开；（3）设置相应参数，进行薄层扫描定量（随行外标法）；（4）进行线性关系、精密度、准确度等方法学考察；（5）操作要点：随行外标法；注意溶剂蒸气饱和，防止边缘效应；注意实验条件控制一致。
5、试述HPLC法测定中药制剂有效成分含量时实验条件及参数的选择。HPLC法是中药制剂定量分析最常用的分析方法，一般情况下均采用RP-HPLC法，对糖类、氨基酸等极性大组分，可采用NP-HPLC法。现以RP-HPLC说明各实验条件及参数选择（1）色谱柱（固定相），首选C18反相柱，若效果不佳再改试C8或苯基柱。（2）流动相：先用甲醇-水、乙腈-水，若效果不佳再尝试四氢呋喃或三、四元溶剂系统；调节醇-水比例，使k值在适宜范围内（最好k=3～5），使保留时间及分离度均适宜；对性质、极性相差大的组分，可考虑采用梯度洗脱。（3）pH值：对弱酸、弱碱组分，采用离子抑制色谱或离子对色谱技术，调节流动相pH值，使组分分离改善。（4）测定波长：以对照品溶液扫描紫外吸收曲线，一般以λmax为测定波长。（5）流速：一般为1.0mL/min，可在0.8～1.2mL/min之间试验。（6）温度：一般在室温下测定，对无柱温箱的注意控制温度恒定。
3．当采用硅胶薄层色谱法鉴别生物碱成分时，为什么常有斑点Rf值较小或斑点明显拖尾的现象？可采用哪些方法克服？由于硅胶本身有弱酸性，对碱性物质吸附较强，故可使Rf较小或影响分离使斑点拖尾，克服的方法如展开剂中加入适量有机碱、在饱和氨蒸气下展开以及用碱液铺制薄层板等方法。
5. 用直接重量法进行中药制剂中生物碱成分测定的优缺点是什么？优点：计算简单、不用换算因数等。缺点：使用上有一定局限性如挥发性生物碱、对热不稳定生物碱、在碱性下加热可水解的生物碱均不能采用。此外