生理学实验报告中山大学生命科学学院
生理学实验报告
实验内容:课程名称:实验人 :院系专业:学 号 :
年12月日1
家兔动脉血压的神经体液调节生理学实验 邓晓娟,张优(本次由邓晓娟执笔) 生命科学学院生命科学 13941201 13941202
20136
生理学实验报告中山大学生命科学学院
实验目的
1. 学习家兔颈部手术与分离主动脉神经的方法。 2. 学习直接测定家兔动脉血压的急性实验的方法。 3. 观察神经、体液因素对心血管活动的影响。 实验原理
动脉血压的相对恒定对于保持各组织、器官正常的血液供应和物质代谢是极其重要的。正常情况下,人和高等动物的心血管活动在神经、体液因素的调节控制下,保持相对稳定,动脉血压相对恒定。改变神经、体液因素的影响,则可观察到动脉血压的相应变化。在动物实验中,可利用动脉插管直接测量动脉血压,通过液体导联系统和压力传感器,将动脉血压的变化在计算机采集系统中描记下来。 实验材料和方法 一、 实验材料
1. 实验对象
健康家兔1只 2. 实验试剂
25%氨基甲酸乙酯溶液,生理盐水,肝素(300U/mL),手术器械
兔箱,手术台,绳子,常用手术器械,止血钳,剪毛剪,眼科剪,支架,双凹夹,动脉插管,三通管,动脉夹,玻璃分针,手术灯,纱布,棉球,棉线,注射器(1mL,20 mL) 3. 记录仪器
RM6240多道生理参数记录仪,计算机采集系统,YP100血压换能器支架,三通管,保护电极
二、 实验步骤
1. 实验仪器的准备
打开计算机采集系统RM6240,接通血压换能器从RM6240系统的“实验”中找出“循环实验”的“家兔血压的调节”,使显示器显示压力读数。 2. 连接压力传感器和液体传递系统
在血压换能器的直管与侧管上分别加接三通管,先用装有石蜡油的注射器从直管与侧管排空压力传感器腔内的空气,关闭直管与侧管的三通管。再在直管上连接动脉插管,从直管的三通管向连接动脉插管的导管内推注含有肝素的生理盐水,使之充满液体。 3. 动物准备
1) 术前准备
A. 麻醉:取家兔一只,称重,耳缘静脉缓慢注射25%氨基甲酸乙酯(4mL/kg体重)进
行麻醉。注射时速度要慢,并注意观察动物情况。当动物四肢松软,呼吸变深变慢,角膜反射迟钝时,表明动物已被麻醉,即可停止注射。
B. 固定与剪毛:将动物背位固定于手术台上(如图-2),用剪毛剪将颈部手术区的
被毛剪去,即可进行手术。
2) 手术
A. 切开皮肢:在紧靠喉头下缘,沿颈部正中线作一长约5~7cm的皮肤切口,用止血
钳钝性分离皮下结缔组织后,夹住少许皮肤并向两侧分开创口。 B. 分离颈部迷走、交感、减压神经和颈总动脉。
迷走、交感、减压神经和颈总动脉都在气管两侧的颈动脉鞘内,因此分离前可先用手指按触气管旁的颈部组织,根据动脉搏动来确定颈总动脉的位置,沿此方向容易找到颈总动脉。在颈总动脉旁有束神经与其伴行,这束神经中包含有迷走、交感、减压神经。
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在气管外侧,颈总动脉与三根粗细不同的神经在结缔组织的包绕下形成血管神经束。其中最粗者呈白色为迷走神经;较细者呈灰白色,为颈部交感神经干,交感神经干有到心脏去的分支;最细者为减压神经,属于传入性神经。其神经末稍分布在主动脉弓血管壁内。减压神经一般界于迷走和交感神经之间,但其位置常有变异,且变异率很大。
用拇指和食指捏住一侧切口的皮肤和肌肉,其余三指从皮肤外面略向上顶颈部气管旁软组织外部,便可暴露出与气管平行的动脉鞘,鞘内包括有靠前的颈总动脉和紧贴在后的迷走神经、交感神经和减压神经。用玻璃分针轻轻地纵行分离开鞘膜,并将颈总动脉稍移向一旁,就可见到三条平行排列的神经:迷走神经最粗、明亮;交感神经较细,光泽较暗;减压神经最细,在颈中部水平移位于前二者之间并紧挨交感神经并行。用玻璃分针分离出减压神经的一段(约1-2cm)尽量清除掉神经外结缔组织、脂肪组织,但切勿损伤神经和伴行的小血管,以免影响神经的鉴别和实验观察。
先分离减压神经和交感神经,然后分离颈总动脉及迷走神经,每条神经分离出2~3cm,在各条神经下穿一条生理盐水浸泡过的不同颜色的丝线以便区别。颈总动脉下亦穿一条线备用。本实验可分离左侧颈总动脉供插动脉套管用,神经则以分离右侧为好。右侧颈总动脉亦要分离,准备提拉(或夹闭)时用。在上述手术过程中必须注意及时止血,小血管破裂出血时,则用止血钳夹住出血点并用丝线结扎止血。
3) 实施动脉插管
钝性分离左颈总动脉,靠动物头侧的部分尽可能多分离些,并在其远心端穿线结扎,用动脉夹夹住动脉的近端。在此段血管下穿一条线以备套管插入后结扎用。用眼科剪在尽可能靠远心端处作一斜形切口,约剪开管径的一半,然后把动脉套管经切口向心脏方向插入动脉,用已穿好的丝线扎紧插入动脉的套管前端部分,并以同一丝线在套管的上端(针头与塑料管交连处)缚紧固定,以防套管从插入处滑出。
三通管的方向一定要正确 ,做好插管后,要先调对三通的开启方向,然后松开动脉夹。松开动脉夹时,要先用力使夹张开,同时观察无漏血现象和其他意外情况,这才在尽力张开动脉夹的情况下,小心翼翼地将其退出血管。
4. 实验观察
1) 观察正常血压曲线。调节扫描速度与增益,可以明显地观察到心室射血与主动脉回缩
形成的压力变化与收缩压、舒张压的读数。有时可以观察到血压曲线随呼吸变化,心搏为一级波,呼吸波为二级波。然后将扫描速度调慢,观察正常血压曲线。
2) 刺激迷走神经。使刺激输出端连接保护电极,轻轻提起迷走神经上的备用线,小心地
将神经置于保护电极之上。记录对照血压曲线后,再用中等强度的连续电脉冲信号,通过保护电极,刺激神经。血压明显下降后即可停止刺激,并待血压恢复。如果血压并不下降,可调整刺激强度或刺激频率再行刺激。 3) 刺激减压神经,方法同上。 4) 刺激交感神经,方法同上。
5)分别刺激减压神经的中枢端和外周端。用线在颈部
分离出的减压神经全长的中部双结扎(相邻部位分别作两 次结扎,务必扎紧)。双结扎神经后,从两结扎点之间剪 断神经。记录一段血压曲线作为对照,再分别刺激神经的 中枢端(靠动物头部的一端)和外周端(靠动物心脏的一 端),观察并记录血压和心率的变化。
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6)分别刺激迷走神经的中枢端和外周端。方法同(5)。 5. 处死动物
做完实验,先结扎颈总动脉,然后注射空气针或关闭(结扎)气管,迅速处死动物。然后取下动物身上的所有器械,尤其是动脉夹!最后将死兔置于垃圾袋中。
结果与分析
一、 实验记录
1.兔的正常心搏跳动 方式 强度(V ) 波宽(ms) 延时(ms) 重复次数 连续单刺激 2 5 0 1 频率(Hz) 30 扫描速度 2.5/div 灵敏度 22.5mmHg 二级波 一级波
一级波(心搏波):乃由于心室舒缩所引起的血压波动,频率与心率一致,但由于记录系统有较大惯性,波动幅度不能真实反映收缩压与舒张压的高度。二级波(呼吸波):乃由于呼吸运动所引起的血压波动。三级波:常不出现,可能由于血管运动中枢紧张性的周期性变化所致
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2. .夹闭颈总动脉表现 方式 强度(V ) 波宽(ms) 延时(ms) 重复次数 连续单刺激 2 5 0 1 频率(Hz) 30 扫描速度 2.5/div 灵敏度 22.5mmHg
我们可以看到当夹住劲动脉时,血压上升明显。这是因为①当正常情况时:心脏射血经主动脉弓、颈总动脉而到达颈动脉窦。当血压升高时,该处动脉管壁受到机械牵张而扩张,从而使血管壁外膜上作为压力感受器的感觉神经末梢兴奋,引起降压反射,使血压下降。②当夹闭颈总动脉时:心室射出的血液不能流经该侧颈动脉窦,使窦内压力降低,压力感受器受到刺激减弱,经窦神经上传中枢的冲动减少,降压反射活动减弱,因而心率加快、心缩力加强、回心血量增加(因容量血管收缩)、心输出量增加;阻力血管收缩,外周阻力增加。导致动脉血压升高。
3.刺激迷走神经表现 方式 强度(V ) 波宽(ms) 延时(ms) 重复次数 频率(Hz) 扫描速度 灵敏度 连续单刺激 4 5 0 1 30 2.5/div 22.5mmHg 5