CTAB提取DNA方法
一、CTAB配制: 500ml 500ml ddH2O 325ml 100mM 1mTris-Hcl 50ml 700mM 5mNacl 70ml 50mM 0.5mEDTA 50ml CTAB 5g 步骤：1.清洗量筒等实验用具 2.分别加入Tris.Nacl.EDTA 3.用称量纸称取CTAB5g 4.加入水并涮洗用具 5.搅拌至融化 6.使用前加入140mMβ-巯基乙醇5ml 注：涉及到的溶液配制见本章末尾 二、DNA提取
1.用打孔器打10片左右的叶片装入标记好的离心管内 2.加入3-4mm钢珠冷冻，加液氮粉粹30s
3.CTAB预热后（+β-巯基乙醇100:1）加600ul至粉碎的叶片中（注：若有坏管要及时更换）
4.65℃中水浴1h，每10min上下晃动一下离心管（注：盖子一定要盖紧以免渗漏）
5.在水浴快结束的前10min配制氯仿（氯仿：异戊醇=24:1），氯仿对光敏感.易挥发要现配现用
6.水浴结束后加入600ul氯仿并在振荡器上摇10min 7.12000r离心10min后取上清液至离心管 8.加入420ul的异丙醇（-20℃冷冻过的） 9.上下轻晃后-20℃冷冻20min 10.12000r离心20min后弃上清液
11.加入800ul20%的乙醇涡旋清洗，如若DNA杂质过多可加长乙醇清洗时间（离心5min中后再清洗一次） 12.12000r离心5min后倒掉乙醇
12.充分晾干后加入200ulddH2O，涡旋。溶解
13.室温放置数小时使其充分溶解后放入冰箱冷冻。（也可37℃水浴1h）
三、测DNA浓度 使用软件：NanoDrop
操作流程：开机→打开NaNoDrop→Nucleic Acid(核酸）→点1ul对照→Blank→measure→点1ul样→measure(计算出数据后要修改编号）→reports→Export--桌面
备注：对照很重要，对照的水最好为之前稀释DNA的水，浓度和各比值近零；数据分析：1、浓度 2、260/280其值大约为1.8高于1.8则有可能有RNA的污染不过RNA易降解，低于1.8纯度不太好 3、260/230其值大约在2左右，低于1.5DNA含量低 1m Tris:
溶解121gTris-Base(C4H11NO3)于750mlddH20中加浓盐酸（Hcl）直到ph值达到7.5（75ml Hcl：ph7.5 49mlHcl：ph8.0）用ddH2O将溶液定容至1000ml
5m EDTA:
292.5gNacl(MW=58.44)+ddH2O（总体积1000ml)高压灭菌
0.5m EDTA:
溶解186.21gEDTA-Na2. 2H2O（MW=312.24）于750mlddH2O中，加NaoH片剂直到ph值达到8.0，用ddH2O将溶液定容至1000ml