④ 岩石笼（附图5）：直径18cm、高20cm的圆柱形铁丝笼，笼网孔径为5±1cm2，底部铺500μm孔径尼龙筛绢，内装规格尽量一致的卵石。
⑤ 多片采样器（附图6）：由环状和方形片（纤维板或瓷片）组成，在片与片之间放置间隔装置并用螺丝固定形状。
（2）分样筛：500μm孔径。 （3）直流水泵及电瓶（如有必要） （4）采样船（如有必要） 5.2.2 实验室分析
（1）解剖镜 （2）白色搪瓷盘
（3）标准网格托盘：规格为30cm×36cm，约30个网格（6cm×6cm）。 （4）电子天平
5.3 试剂
5.3.1 样品固定
75%乙醇或5%甲醛溶液 5.3.2 实验室分析
加拿大树胶或其他折射率高的介质
5.4 野外采样程序
5.4.1 样品采集
可以根据监测点位的实际情况以及投入的人力物力来选择适宜的大型底栖动物采集工具和相应的采集方法。底质以淤泥为主的平原湖库，可采用彼得逊采泥器进行采集；底质以砂砾（甚至碎石）为主的湖道型湖库（或其他类型湖库），用彼得逊采泥器效果不佳，可采用手抄网进行采集。此处优先推荐天然基质采样，如果环境条件不适于天然基质采样，可以选择人工基质；另外，如果监测的目的仅是为了评价化学水质而非物理生境，也可以采用人工基质。
5.4.1.1 天然基质法——彼得逊采泥器
（1）使用彼得逊采泥器采集底泥，每个监测点位至少取2个重复位点，每个重复位点采集2斗，如遇硬质底泥，则在相同断面内更换软质底泥点进行采样。
（2）将采集的样本用500μm孔径分样筛去除泥砂，当泥砂量大时，可采用大型分样筛和直流水泵进行淘洗，挑出其中的大型底栖动物样品。具有典型生态意义的样品，应拍照、
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观察并记录。
（3）采样结束后，可将样品按个体大小、软硬分别装瓶（避免损坏），贴上标签。检查筛网上的残余物，用清水冲洗干净。 5.4.1.2 天然基质法——手抄网
（1）沿着湖岸选择100米范围（水深不超过1m），并在其中等距设置10个重复采样位点。每次采样，固定抄网位置，网口面朝水流方向，用足尖、足跟搅乱抄网向上0.5m范围内的底质。如遇较大的石块，可用手捡起，剥离其上附着的生物。每采集2～3次，在流水中冲洗网中采集到的样品。如果出现网眼堵塞的情况，将网内采集到的样品丢弃，重新在该重复位点附近其他位置采集样品。
如果水流较缓或水深较深，可以采用拖曳方式按“弓”字形采集湖底底质，采集厚度为10cm，每个重复位点的采集距离为0.5m。另外，如果采样位点有大型水生植物，也可以用拖曳方式在植物根茎上采集。
（2）将采集的样本用500μm孔径分样筛去除泥砂，当泥砂量大时，可采用大型分样筛和直流水泵进行淘洗，挑出其中的大型底栖动物样品。具有典型生态意义的样品，应拍照、观察并记录。
（3）采样结束后，可将样品按个体大小、软硬分别装瓶（避免损坏），贴上标签。检查抄网上的残余物，用清水冲洗干净。 5.4.1.3 人工基质法——岩石笼或多片采样器
（1）将人工基质笼放入监测点位的水底，每个点位至少2个放置点，每个点至少放置2个人工基质。
（2）2周后，将人工基质笼从水底取出，用500μm孔径分样筛去除泥砂，挑出其中的大型底栖动物样品。具有典型生态意义的样品，应拍照、观察并记录。
（3）将样品按个体大小、软硬分别装瓶（避免损坏），贴上标签。检查筛网上的残余物，用清水冲洗干净。 5.4.2 样品的固定与保存
（1）固定：样品中加入75%乙醇或5%甲醛溶液进行固定。
（2）保存：将样品带回实验室，常温保存。确认样品按正确方法装载，使样品不致泄漏。保存时，每隔几周检查固定液，必要时进行添加，直至样品分析。 5.4.3 标识与记录
（1）标识：将永久性标签放于样品瓶内，附以下信息：采样地点、点位编号、日期、
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采集人姓名、固定液类型。同时，在样品瓶外侧标注采样地点、点位编号、日期与样品类型。
（2）记录：在野外记录本或大型底栖动物现场采样记录表（附表9）中记录下湖库名称、采样位置、点位编码、采样日期、采集人姓名、采样方法及相关的生态信息。采样完成后，在大型底栖动物样品登记表（附表10）中记录下样品信息，方便核对。
5.5 实验室分析程序
5.5.1 种类鉴定及栖息密度测定
（1）标本整理：对样品进行重新分类、装瓶，并更换固定液。摇蚊的幼虫和蛹以及寡毛类个体，应当用合适的介质（如，加拿大树胶）封在玻片内，再进行观察和鉴定。
（2）种类鉴定：在解剖镜下，对采集到的样品进行种类鉴定，分类完毕尽可能按种分别装瓶。
种类鉴定参考书目（建议）
国家环保局. 水生生物监测手册[M]. 东南大学出版社, 1993. 中国科学院. 中国经济昆虫志[M]. 科学出版社, 1997.
Morse J.C.等. Aquatic insects of China Useful for Monitoring Water Quality[M]. 河海大学
出版社, 1994.
周长发. 中国大陆蜉蝣目分类研究[D]. 南开大学, 2002. 齐钟彦等. 中国动物图谱[M]. 科学出版社, 1985.
刘月英, 张文珍等. 中国经济动物志[M]. 科学出版社, 1979.
周凤霞, 陈剑虹. 淡水微型生物与底栖动物图谱[M]. 化学工业出版社, 2011.
（3）计数：以种为单位，对样品进行计数。易断的环节动物等按头部计数；软体动物的死壳不计数；数量较多、无法全部计数时，可使用标准网格托盘，随机抽取其中一部分计数，换算。
（4）栖息密度换算：实测个体总数量除以采样总面积，即可得该种类的栖息密度（ind/m2）。
（5）记录：在大型底栖动物计数记录表（附表11）上方部分填写样品相关信息，记录下各个种类的种名、相应的个体数量及栖息密度。 5.5.2 生物量测定
（1）称重：鉴定、计数结束后，将标本从瓶中取出，放在吸水纸上，吸去体表水分，进行称重。
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（2）生物量换算：实测总重量除以采样总面积，即可得该种类的生物量（g/m2）。 （3）记录：在大型底栖动物计数记录表（附表11）中记录下各个种类的实测重量以及换算的生物量。
6 质量保证与质量控制
6.1 野外质量控制程序
6.1.1 样品的采集
（1）制定合理的采样操作程序，在确定的采样时间、采样点、采样层次，用符合质量要求的统一设备采样，采水量或采泥量尽量保持一致，以保证采集的样品具有代表性和可比性。
（2）保证所有野外设备处于良好的运行状态，须制定一项常规检查、维护及/或校准的计划，以确保野外数据的异质性和质量。
（3）合理安排各类生物样品采集顺序，尽量避免生物类群在采集前受到较大扰动。 （4）正确填写样品标签，包括样品编号、日期、水体名称、采样位置以及采集人姓名。 （5）及时清洗所有接触过样品的采样设备，并仔细检查，防止采样污染。
（6）及时在现场处理样品。受生物活动影响，随时间变化明显的项目应在规定时间内测定。
6.1.2 样品的运输
（1）必须根据采样记录或登记表核对清点样品，以免有误或丢失。 （2）样品运输中贮存温度不超过采样时的温度，必要时需准备冷藏设备。
（3）运输中应仔细保管样品，以确保样品无破损、无污染。应避免强光照射及强烈震动。
（4）样品的运输尽量迅速。 6.1.3 样品的保存
按照要求分别保存各类样品，保存时，每隔几周检查固定液，必要时进行添加。 6.1.4 采样记录
除了样品相关信息，采样时间、地点、水温、气温、水文、植被等也应有详细记录，确保样品数据的完整性。
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6.2 实验室质量控制程序
6.2.1 样品的交接与记录
（1）样品交接时，应办理正式交接手续，由接收样品的工作人员记录其状态，检查是否异常或是否与相应检验方法中描述的标准状态有所偏离。
（2）实验室应建立送检样品的唯一识别系统，以保证任何时候的样品识别不会发生混淆。
6.2.2 种类鉴定、计数
（1）新种、新记录种必须留出典型、完好的样品制作标本，永久保存。
（2）样品鉴定完毕后，随机抽取10%样品，由专业分类学专家检查，确保分类的准确性。
（3）实验室应当保存并更新相关的分类学文献。 （4）样品需由2名工作人员重复计数。 6.2.3 数据记录
记录实验室分析过程中所取得的相应数据，分析测试项目还应记录下测试条件、测试方法、QC报告（空白、重复、标样、校正），并描述如何从原始数据到最终结果报告的过程、数据转换步骤。数据记录表须有记录人、校对人签字。 6.2.5 剩余样品的处置
现场分析剩余样品不保存；实验室分析剩余的生物样品至少保留4个月以上，有条件的实验室可长期保存。 6.2.6 资料保存
基础分类学参考文献文库是藻类、大型底栖动物鉴定中必不可少的辅助工具，应按实验室需求购买、收集和保存。
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