抑制剂是否可结合游离的酶 Km Vmax
是 增大 不变 不变 减小 否 减小 减小 12. 如何设计实验检验抑制类型是否可逆？ 13. 列举基因工程中重要的工具酶及其作用。
限制性内切酶作用：与甲基化酶共同构成细菌的限制修饰 系统，限制外源
DNA，保护自身DNA。
DNA连接酶: 补粘性末端和平端DNA分子之间的连接
DNA连接酶的用途
（1） 两个双链DNA片段连接起来 （2） 修补带有缺口的双链DNA分子
逆转录酶或者反转录酶（reverse transcriptase）是以mRNA为模板合成互补
DNA即cDNA，用于组建cDNA基因文库
? T４多核苷酸激酶（T4 polynucleotide kinase)能催化ATP的γ-磷酸转移到DNA或RNA的5'端羟基上。 ? 用于：放射性磷标记DNA链的5'-末端, 使缺少5'-端磷酸的DNA磷酸化，用于连接反应
? 碱性磷酸酶简称AKP，此酶能特异的切除DNA或RNA 5'-端的磷酸产生5'-端羟基以防止载体的自身连接。
? 末端脱氧核苷酸转移酶（TDT）能催化单核苷酸转移到DNA的3 ' -端的羟基上。 工具酶 活性 限制性核酸内切酶 T4 DNA连接酶 DNA聚合酶 逆转录酶 碱性磷酸酶 T4多核苷酸激酶 末端脱氧核苷酸转移酶 识别特异序列，切割DNA 催化DNA5'-磷酸与3'-羟基 形成磷酸二酯键 以DNA为模板合成DNA 以RNA为模板合成DNA 切除末端磷酸 催化核酸5'-羟基磷酸化 催化3'-端合成同聚体尾