26、巢式PCR之所以要用两对引物分别进行扩增，原因是（ 0 ①提高扩增效率 ②节约试剂用量
③保证反应的高特异性 ④简化常规PCR操作 A、①③ B、②④ C、①②③ D、④
27、有关巢式一步PCR的说法中正确的是：（ ） ①第一轮PCR引物较第二轮PCR引物短
②第一轮PCR引物比第二轮PCR引物退火温度高 ③第一轮PCR引物比第二轮PCR引物退火温度低 ④第一轮PCR引物较第二轮PCR引物长 A、①③ B、②④ C、①②③ D、④
28、固着PCR是：（ ）
A、 将模板与固相的琼脂糖珠相连 B、 将引物与薄膜固定 C、 将DNA聚合酶用耦联剂固定到琼脂糖珠上 D、 将引物用耦联剂固定到琼脂糖珠上
29、固着PCR的主要优点在于（ ） A、 扩增产物处于溶液中易于分离纯化 B、 便于聚合酶在高忠实性条件下进行扩增 C、 扩增产物与固定化的琼脂糖珠相连，便于分离
D、 因为引物与琼脂糖珠相连，所以可以容易把扩增产物同引物分开
30、与膜结合PCR相比，固着PCR的不同点在于（ 0 ①膜结合PCR将膜板结合到膜上，而固着PCR使引物固相化 ②膜结合PCR便于纯化样品，而固着PCR便于纯化分离扩增产物
③膜结合PCR所用引物无特殊要求，而固着PCR所用引物应能与固相底质发生耦联④两种PCR对聚合酶有不同要求 A、①③ B、②④ C、①②③ D、④
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31、单一特异引物PCR的通用引物可与（ ）配对结合。 A、 载体中的特定序列 B、 插入片段的特异序列 C、 载体中的非特异序列 D、 插入片段的非特异序列
32、单一特异引物PCR的特异引物可与（ ）配对结合。 A、载体中的特定序列 B、插入片段的特异序列 C、载体中的非特异序列 D、插入片段的非特异序列
33、单一特异引物PCR的特异性扩增体现在（ ） A、通用引物可与载体中的特定序列特异结合 B、通用引物可与插入片段的特异序列特异结合 C、特异引物可与载体中的特异序列特异结合 D、特异引物可与插入片段的特异序列特异结合
34、重复DNA序列引物扩增法对重复序列的要求是（ ）A、 序列为低度重复 B、 序列为串边重复 C、 序列为散布重复 D、 序列为高度重复
35、重复DNA序列引物扩增法得到的产物是（ ） A、 均一的 B、 不均一的 C、 不特异的 D、 难以判断
36、下列关于逆转录PCR的说法中不正确的是（ ） A、 样品中混有少量DNA对扩增结果无影响 B、 需要将RNA逆转录成cDNA才能进行PCR C、 逆转录PCR方法比其它许多RNA研究方法的灵敏度高 D、 逆转录PCR要求RNA比较完善
37、逆转录PCR对RNA样品的要求是（ ）
①RNA分子完整 ②不含DNA ③不含蛋白质和其它杂质A、①③ B、②④ C、①②③ D、④
④RNA的来源有限制7
38、逆转录PCR反应中合成cDNA需要的引物种类有（ ） ①随机六聚体 ②下游引物 ③寡聚（dT） ④寡聚（dA） A、①③ B、②④ C、①②③ D、④
39、有关引物设计中哪一个不正确（ ） A、 引物的跨度以180-500KB为宜 B、 5’和3’无回文结构 C、 引物最好跨越一个内含子
D、 上下引物的Tm值应有较大差异
40、一步逆转录扩增法所依据的是（ ）
A、 新一代Taq聚合酶既具有聚合酶活性也有逆转录酶活性 B、 适当控制反应条件 C、 特殊的离子浓度 D、 特殊的扩增对象
41、常规PCR存在的问题是（ ） A、 加热太慢，反应不能恰开始 B、 PCR反应前升温过程中聚合酶产生非特异性扩增 C、 缓慢的升温过程使聚合本科活力不能有效出现
D、 加热过程破坏了引物和靶序列的结合影响聚合反应
42、热启动PCR克服常规PCR问题的办法是（ ） ①高温时加入必须的反应成份 ②加快加热过程
③加入无活性的酶然后高温激活 ④改变扩增对象 A、①③ B、②④ C、①②③ D、④
43、在提取核酸过程中，除去大量蛋白质的操作是（ ）
A、 煮沸 B、蛋白酶K C、酚/氯仿抽提 D、乙醇沉淀
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44、RNA应保存于：（ ） A、 水中 B、 TE缓冲液 C、 DEPC处理的离子水中 D、 冻干保存
45、如何监制PCR实验的污染情况？（ ） ①设立阴性和阳性对照 ②重复实验 ③合成新引物 ④消毒试剂 A、①③ B、②④ C、①②③ D、④
46、下列说法不正确的是：（ ）
A、 放射线不会造成核酸分子结构的破坏 B、 多数放射性核素半衰期较短，必须随标随用 C、 放射性核素与相应的元素具有完全相同的化学性质 D、 放射性核素的检测具有极高的特异性
47、PCR进行DNA的生物素标记错误的是（ ） A、 反应中生物素化dUTP浓度不能太高 B、 以重组质粒为模板，模板DNA量不能太多 C、 一般标记生物素化探针长度小于500bp
D、 琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物，标记的DNA较未标记的产物泳动快
48、欲减少成套寡核苷酸筛选cDNA文库的杂交阳性克隆总数应（ ） A、 采用杂交溶剂如氯化四甲铵 B、 设计较短的寡核苷酸 C、 改变探针G+C含量 D、 增加简并性
49、体外转录生成的RNA探针与单链DNA探针相比（ ） A、 与靶序列杂交的效率低 B、 放射性标记RNA的合成效率较低 C、 合成高比活度全长探针的成本相对较低 D、 必须用凝胶电泳进行纯化
50、用M13噬菌体载体合成单链DNA探针时（ ）
A、 反应中4种dNTP的浓度均大于各自的Km值时，DNA合成速率最慢
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B、 反应液中多种前体浓度处于低限时，增加模板量可延长产物 C、 为使模板分子的使用效率达到最高，引物的摩尔数必须减少 D、 引物延伸反应总是使用过量的酶
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