2、熟悉:
(1) 生长因子的概念, 种类, 作用机制 (2)癌基因表达产物的类型
3、了解:生长因子与疾病的关系;癌基因家族的分类
学时安排:理论课:5学时 教学内容:
一、基本概念:.癌基因、原癌基因、病毒癌基因与细胞癌基因、抑癌基因、P53基因。 二、主要教学内容: 1、癌基因分类
(1)病毒癌基因:概念、作用
(2)细胞癌基因:概念、作用、癌基因家族
(3)癌基因活化的机制:获得启动子与增强子、基因易位、原癌基因扩增、点突变 (4)原癌基因表达产物与功能 2、抑癌基因 (1)抑癌基因的概念
(2)常见的抑癌基因:Rb基因、P53基因 3、生长因子
(1)概述:生长因子的概念;作用途径 (2)生长因子作用机制 (3)生长因子与疾病
第二十一章 基因诊断与基因治疗
目的要求:
1、掌握:
(1)基因诊断的概念、特点;
(2)基因诊断的技术方法:RFLP、PCR-ASO、PCR-SSCP分析的概念; (3)基因治疗的概念、方法或策略。 2、熟悉:基因诊断的应用; 3、 了解:
(1)基因测序、基因芯片; (2)基因治疗的程序:; (3)基因治疗的回顾与展望;
学时安排:理论课:4学时 教学内容:?
一、基本概念:基因诊断、RFLP、SSCP、基因治疗、基因增补、基因失活 二、主要教学内容: 1、基因诊断
(1)基因诊断的概念及特点
(2)基因诊断的常用技术方法:①核酸分子杂交技术:②限制性酶谱分析法;限制性酶切片段长度多态性(RFLP);
(3)PCR分析法:扩增片的长度的变异;PCR-PFLP分析;PCR-ASO分析方法;引物特异PCR分析方法;PCR-SSCP分析方法。
(4)基因测序 (5)基因芯片 2、基因治疗
(1)基因治疗的概念、
(2)基因治疗的方法:①基因矫正、②基因置换、③基因增补、④基因失活:反义RNA技术、核酶技术、三链技术、干扰RNA技术
(3)基因治疗的程序 (4)基因治疗的目标
(5)基因治疗的应用与展望:①基因治疗的回顾;②基因治疗的应用和展望;③意义:免疫调节、遗传缺陷的纠正、分泌治疗性蛋白质、封闭有害基因的表达;
第二十二章 常用分子生物学技术
的原理及其应用
目的要求:? 1、掌握:
(1)核酸分子杂交、探针的概念; (2)印迹技术的类型及原理;
(3)Southern Blotting、Western Blotting的概念
(4) PCR的概念、基本原理, PCR技术的特点、系统的组成
(5)基因组DNA文库及cDNA文库的概念、基因芯片及蛋白质芯片的概念 2、熟悉:
(1) 核酸分子的杂交技术种方法、应用; (2) Southern杂交的基本过程; (3)PCR的衍生技术; 3、了解:
(1)杂交体系的检测; (2)PCR技术在医学上的应用;
学时安排:理论课:9学时
一、 基本概念:核酸分子杂交、印迹技术、核酸探针 、Southern印迹、Western Blotting、PCR及RT—PCR、基因组文库(gDNA library)和cDNA文库、基因芯片、蛋白质芯片
二、主要教学内容: 1、分子杂交与印迹技术
(1) 核酸分子杂交和印迹技术的基本原理:①印迹技术:载体膜的种类、作用、印迹方法;②探针技术:探针的概念、探针的来源、探针标记:放射性同位素标记物及检测、非放射性同位素标记物及检测
(2)印迹技术的类型及应用:①Southern Blotting:概念、基本过程、应用;②Northern Blotting:概念、基本过程、应用;③Western Blotting:概念、基本过程、应用;
2 、PCR技术原理与应用 (1)PCR的概念、历史背景。
(2)PCR技术的特点:高度的敏感性;高度特异性;操作简便、快速;适用样品的广泛性。
(3)PCR技术的工作原理:①PCR的基本步骤:DNA模板变性、单链DNA模板与引物退火、引物延伸;②PCR系统的组成:耐热DNA聚合酶:作用、特点;寡核苷酸引物:引物作用、引物设计原则;三磷酸脱氧核苷酸(dNTP);模板DNA:模板DNA的纯度、模板DNA的量;PCR反应缓冲液及Mg2+:作用。
(4)PCR技术的主要用途:目的基因的克隆;基因的体外突变;DNA和RNA的微量分析;DNA序列测定;基因突变分析。
(5)的PCR衍生技术:①逆转录PCR(RT-PCR):原理、应用;②原位PCR:原理、应用;③适时PCR:原理、应用;
3、DNA序列分析:化学裂解法(Maxam-Gilbert法);DNA链末端合成终止法;DNA自动测序
4、文库:基因组DNA文库及cDNA文库的概念、方法
5、遗传修饰动物模型的建立及应用:转基因技术、核转移技术、基因剔除技术的原理 6、生 物 芯 片 技 术:基因芯片、蛋白质芯片的概念、应用
7、质相互作用研究技术:蛋白质之间相互作用研究的重要性;常用蛋白质相互作用的研究技术;酵母双杂交;各种亲和分析(亲和色谱、免疫共沉淀等);荧光共振能量转换效
应分析;噬菌体显示系统筛选等等。
实验教学大纲
(供临床医学、法医学、麻醉学、口腔医学、医学影像学、眼视光学专业用)
实验一 质粒DNA的提取、纯化、限制酶切鉴定
教学目的:学习质粒提取的方法、限制性核酸内切酶的作用 教学要求:
1、 掌握提取质粒的基本原理;
2、 熟悉提取过程和方法;限制性核酸内切酶在基因工程中的应用。 3、 了解利用限制性核酸内切酶切割质粒的方法。
学时安排: 5学时
教学内容:
(一) 讲授
(1) 质粒载体的结构、作用
(2) 限制性核酸内切酶的作用特点 (3) 限制酶鉴定DNA的意义 (二) 实验操作 (1) 细菌培养
(2) 细菌的收集和裂解 (3) 质粒的分离和纯化。
(4) 选用一种或两种限制性核酸内切酶切割质粒; (5) AGE电泳分析
实验二 PCR技术及应用
教学目的:学习PCR技术的方法、特点及应用
教学要求:
(一)掌握PCR基本原理和方法。 (二)掌握PCR技术的应用。 (三)熟悉核酸的鉴定方法
学时安排:5学时 教学内容:?
(一)讲授:
1、PCR技术的原理及应用 2、PCR系统组成
3、核酸分离技术及鉴定方法 (二)实验操作: 1、PCR体系的配制 2、PCR仪的使用
3、PCR产物的琼脂糖凝胶电泳鉴定;
分子生物学教学学时数表
教学内容 第一章 绪论 第十三章 基因表达的调控 第十四章 基因重组与基因工程 第二十章 癌基因、抑癌基因与生长因子 第二十二 常用的分子生物学技术 第二十一章 基因诊断与基因治疗 实验一 细菌培养、质粒DNA的提取、纯化与限制酶切 实验二 PCR技术应用、酶切DNA产物的电泳分析
讲课学时数 1 8 8 5 9 4 实验学时数 5 5 备注