细胞工程 期末考试复习题目(2)

2018-12-27 19:31

接种培养生产抗体。

⑹分泌抗体的融合细胞的筛选:酶联免疫吸附法(ELISA):主要是基于抗原或抗体能够吸附至固定相载体的表面并保持其免疫活性和酶催化活性的基本原理。

⑺单克隆抗体的大来那个生产:实体瘤法、腹水制备法、生物反应器培养杂交瘤细胞大规模生产单抗。 2、HAT培养基的选择原理:

原理:HAT培养原理是根据细胞由次黄嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸合成DNA途径而设计的。正常细胞合成DNA途径有主

要途径和补救途径。主要途径中,叶酸及其衍生物是必不可少的媒介,参与嘌呤环的和嘧啶甲基的合成。氨基蝶呤抑制二氢叶酸还原酶活性,从而阻断正常细胞中DNA合成主要途径中二氢叶酸到四氢叶酸合成。因此,只有利用次黄嘌呤和胸腺嘧啶脱氧核苷酸等前提的野生型细胞才能从补救途径合成DNA而不会死亡。这些野生型细胞内具有次黄嘌呤---鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷酸激酶(TK),如果缺乏其中一种,补救途径就不能发挥作用。

主要途径:糖、氨基酸—--核苷酸---DNA 可以被氨基蝶呤阻断 补救途径:核苷酸前体----核苷酸---DNA

⑴氨基蝶呤可阻断细胞正常途径合成DNA,因此HAT培养基上的细胞不能采用此合成途径。

⑵融合所以的瘤细胞一般是鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷酸激酶(TK)缺陷型,因此也不能采用补救途径合成DNA。

⑶瘤细胞的命运(未融合的和多聚体)命运,因不能正常合成DNA而死亡。

⑷融合细胞:具有亲代双方的遗传性能,具有来自于淋巴细胞内的鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷酸激酶(TK)

因此可利用培养基中的嘌呤和嘧啶采用补救途径合成DNA,因此可在HAT培养基中存活和繁殖。

3、单克隆抗体:动物脾脏上有上百万个淋巴细胞,一个细胞就是一个克隆,它针对抗原上的一个抗原决定簇产生的抗

体是单克隆抗体。

4、多克隆抗体:一种抗原通常具有多个不同的抗原决定簇,因此能刺激多个淋巴细胞产生相应的单克隆抗体,因此血

清中的抗体是针对不同抗原决定簇的单克隆抗体混合物,称为单克隆抗体。

第九章 核移植技术与克隆动物

1、细胞核移植技术:是一种利用显微注射操作技术将一种动物的细胞核移植入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内,

或者将两个细胞的细胞核(或细胞质)进行交换,从而可能创造出无性杂交生物新品种的一项技术。 2、动物克隆:不经过有性生殖,而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术。 3、核移植技术的主要技术流程:(5步)

供体细胞的准备;受体细胞的去核;细胞核移植、激活;重组胚的培养与移植;核移植后代的鉴定。

第十章 干细胞

1、干细胞:一类具有自我更新和分化潜能的细胞。

2、干细胞的分类:干细胞可以分为单能干细胞、多能干细胞与全能干细胞。全能干细胞从理论上讲可以分化生所以组

织与器官。

单能干细胞:是只能分化为单一类型细胞的干细胞,例如表皮的基质细胞,只能分化产生角化表皮细胞。 多能干细胞:是能够形成来哪中或两种以上类型的干细胞。例如:骨髓造血干细胞 全能干细胞:是具有无限分化潜能的干细胞。如哦诶太干细胞。

第十一章 组织工程

1、组织工程:利用生命科学理论、医学、工程学原理与技术,单独或组合地利用细胞、生物材料、细胞因子实现组织

修复或再生的一门技术。20世纪80年代提出概念。 2、组织工程三要素:种子细胞、支架材料、生长因子。

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