中枢药物筛选与有效性研究设计性实验
二级学院 专业 班级 姓名 学号 药科学院 题目：作用于中枢神经系统兴奋药物LD50的测定。 姓名：何嘉健
（班别，实验组别, 学号全号） 药物制剂12（1）班 实验2组 1203502116 【摘要】 目的：作用于中枢神经系统药物通常可范围三类作用于中枢神经系统的药物主要影响递质和受体而发挥作用，而其药理效应主要表现是中枢神经系统的增强或抑制；通过观察动物的药物反应，可初步区分药物的特性。通过药物ED50或者LD50的测定，分析其有效性和安全性。中枢神经兴奋药是一类能选择性兴奋中枢神经药物，提高其功能活动的药物。按中枢兴奋药物的特点划分：1神经振奋药；2苏醒药；3改善脑代谢的药物。1中枢兴奋药物的作用部位可随剂量的增加而扩大，大剂量可引起中枢神经系统的广泛兴奋导致惊厥。我们采用平均分配法测量药物的ld0、ld100的大致区间，再在正式试验中测量小鼠的死亡率，从而得到药物具体的ld50。小鼠的注射方式都为腹腔注射。从结果我们可以判断出来，预实验中可判断ld0为20%稀释母液，ld100为60%稀释母液，该兴奋药的半数致死量为…
从而我们得出结论：该兴奋药的半数致死量为…。
【关键词】 中枢神经兴奋药 平均分配法 腹腔注射 半数致死量 量效关系
前 言
现今社会人们对健康的要求有了更高的要求，作为治疗、预防和诊断疾病的药物，人们对它的安全性的研究技术也不断发展。对制药行业来说，作用于中枢神经系统（CNS）药物或许是最具挑战性，同时又是回报最丰厚的市场之一。快速增的CNS药物市场中，仍有许多尚未得到满足的临床需求以及新的治疗方法，近年来,研究人员针对中枢神经系统疾病的特点开发了多种疗效高、使用方便的药物新制剂，对人类治疗中枢系统疾病有重要的作用。
作用于中枢神经系统的药物主要是影响递质和受体，中枢神经系统内不但神经递质种类较多,而且神经激素及神经调质等亦起重要作用。目前作用于中枢神经系统的药物种类很多，如抗焦虑药、抗抑郁药、催眠药、抗震颤麻痹药和抗精神失常药等。这类药物用药时间长，副作用出现频率高，有可能出现不可逆的后遗症；有的药物过量服用，还能引起致死性中毒。对此必须高度重视。
一. 实验目的
学习如何筛选有效的药物，通过设计性实验锻炼和提高科学研究的思维方式、
1
库宝善主编，神经精神药理学，北京大学医学出版社，2006,1
药理学实验设计原则和方案。最终达到提高学生发现问题、提出问题、分析问题和解决问题能力，提高学生的自学能力、实践能力和团队协作能力，培养学生的科学思维和创新能力。
二. 实验原理
作用于中枢神经系统的药物主要影响递质和受体而发挥作用，而其药理效应主要表现是中枢神经系统功能的增强或抑制，通过观察动物的药物反应，可初步区分药物的特性。通过药物ED50或LD50的测定，分析其有效性和安全性。药物给药药剂量与动物死亡率间呈正态分布。以对数剂量为横坐标、累加死亡率为纵坐标作图，即可得到一对称S型曲线，其两端较平坦，中间较陡，说明两端处剂量稍有变化时死亡率的改变不易表现出来，在50%死亡率处斜率最大，该处剂量稍有变化时，其死亡率的变动最明显，即最灵敏，在技术上也很容易准确测得，故常选用LD50值作为反映药物毒性的指标。若将死亡率换算成几率单位，则对数剂量与几率单位呈直线关系，用数学方法可拟合其回归方程式，可精确地计算LD50及引起人和死亡率的剂量及相关数据。
三. 实验步骤
1 预实验
（1） 目的
【2】
初步筛选出具有某种特定作用的药物。初步探索0％和100％动物有效的剂量范围，以便正式实验时确定各组剂量。 （2） 动物
小鼠21只，体重18～30g，雌雄各半，实验前禁食12小时。 （3） 器材和药品
器材：分析天平、注射器、针头、烧杯、鼠笼
药品：4-6号药品（中枢兴奋药、中枢抑制药、安慰剂） （4） 实验步骤
将所有小鼠进行标号称重，分成6组，每组三只。
随机选出一组小鼠用于药品筛选,按0.2ml/10g对小鼠进行腹腔注射给药。观察记录小鼠反应现象。根据小鼠的反应现象，选取兴奋药作为本次实验药物。
测定LD0~LD100的剂量范围。
将剩余的5组小鼠按0.2ml/10g分别（1）腹腔注射100%的母液（2）腹腔注射80%的母液（3）腹腔注射60%的母液（4）腹腔注射40%的母液（5）腹腔注射20%的母液。观察3-5分钟，记录小鼠的反应现象。 记录小鼠的死亡数。
通过实验现象观察，得出结果，找出我们组兴奋药能引起小鼠的0%和100％半数致死量及其所在的范围。
（5） 实验结果 （1）预实验筛选药物情况 组别 1 2 3 编号 4 5 6 小鼠反应 药物 通过预实验测定，可推测该兴奋药物的ED0~ED100的范围为
（2）LD0~LD100的测定 小组(每组3只) 注射剂量（mg/kg) 1 2 3 4 5
通过预实验测定，可推测该兴奋药物的LD0~LD100的范围为
小鼠反应 死亡率 % 0% 0% 0%
2 正式实验
（1） 实验目的
测定所选中枢兴奋药的LD50和绘制量一效曲线
（2） 实验动物
小鼠50只，体重18～30g，雌雄各半，实验前禁食12小时 （3） 实验器材与药品
器材：分析天平、注射器、针头、烧杯、鼠笼 药品：预实验中的中枢兴奋药（mg/ml） （4） 实验步骤
将所有小鼠进行标号称重。将50只小鼠按重量随机分为6组。
根据预实验的结果找出Dmax和Dmin，正式实验剂量组数n=6，求出剂量公比r
r?n?1Dmax Dmin各组剂量为Dmax·r k-1 ，k为第几组k=1,2,3...5
采用各组每10g体重小鼠的用药容量相等，注射体积=0.2ml/10g，对各组药品进行不同倍数的稀释。将六组小鼠分别（1）腹腔注射mg/kg（2）腹腔注射mg/kg （3）腹腔注射mg/kg（4）腹腔注射mg/kg（5）腹腔注射mg/kg观察，记录小鼠反应现象及各组小鼠死亡数数 计算机(Bliss法)算出LD50。 （5） 实验结果 分组 注射剂量（mg/kg) 1 2 3 4 5
小鼠反应 死亡率 0% % % % %