2. 切片
切片刀的安置:刀的刃面与组织切面之间应有一定的角度,称为余隙角a。余隙角一般在2~5?
组织冷冻:冷冻适度,过冷可致切片横向断裂 、冷冻不足,切片容易厚薄不匀
切片:动作连贯 四、实验结果
了解了脑立体定位仪及切片制备基础知识,并在团队合作下完成了大鼠脑立体定位(纹状体),以染料定位,以组学鉴定(切片)观察定位结果。本次试验定位空间上深度稍微欠妥,染料着色正常,切片制备正常。
五、讨论分析
立体定位技术指利用颅骨的标志/参考点,确定皮层下某些神经结构的位置,对脑进行定向的刺激、破坏、药物注射、引导电位等研究。为此,掌握这门技术对于日后研究工作有非常大的帮助。
本次实验注意点有如下:
①大鼠固定:实验开始前,我们一直尝试用耳杆进行固定,但始终不能对齐。最后在老师的指导下,我们使用了耳杆适配器,很轻松的便完成了固定。
②游标卡尺在使用时一定注意记录读数,便于后期再次定位。
③注射染料时,速度一定要慢,给予组织充分的时间去吸收,不然极易导致染料冒出。
④微量注射针刺入大脑时,应注以针尖中后段为准,避免插入深度不足。 ⑤取大脑时,为了不伤及脑组织,应从脊髓处入手;并在基本暴露大脑后,用钳子一并取出脑组织。
⑥切片时,镊子等工具使用完后应放回操作箱中保温;且切片取出后,应迅速将切片放入指定位置,以免融化。
此外,本次试验也有一些小的疑惑需要进行讨论:
①介于大鼠露骨较脆,可否不进行钻孔直接通过微量注射针打入染料。此法可以避免因移动坐标尺导致的误差,同时也可以保证颅骨处于封闭状态避免染料冒出。
②本次实验采用的取大脑方法极易损坏小脑,不利于小脑相关实验的使用。
实验者:丁力
学号:14211220036
日期:2014-9-27