(1)制备菌丝悬浮液 将待复壮菌种的菌丝体刮下,置入100ml有玻璃珠的无菌水三角瓶中,充分摇荡,使菌丝分散。吸取10ml菌丝液注入盛有90ml无菌水的小瓶中,摇匀备用。
(2)制混合平板 将融化的PDA培养基倒入无菌培养皿中,凝固后滴入2~3滴菌丝液,用无菌涂棒涂抹,使菌丝均匀分散于平板上。
(3)培养 适温下培养,使菌丝萌发生长。挑取健壮尖端菌丝转管。
(4)检测 通过菌丝形态特征的检查及出菇试验等项目测定,符合原菌种性状即可用于生产。
六、实验报告与实验汇报
及时对实验数据进行整理和分析,按江西农业大学学报格式要求写作小论文。每组同学做好1份实验论文PPT,在全班进行交流汇报,老师进行点评。
七、思考题
1.记录菌种在麦粒和麦麸基质上的生长情况,并对出现的问题进行分析。 2.麦粒与麦麸在处理方法上有哪些不同? 3.本实验采用的菌种复壮法的原理是什么? 4.试设计一个防治菌种衰退的菌种使用方案
实验三、平菇袋栽
一、实验教学目的
能制作优质发酵料,快速正确的进行袋栽。正确处理发菌过程中的异常现象。
二、实验基本原理
平菇目前广泛采用的是发酵料塑料袋栽培法。聚乙烯塑料袋具有保温湿、防虫菌、易成功、便管理、可移动、空间利用率高等优点。
三、所涉及的课程及知识点
在该实验中,涉及到了农学类和生物学类专业教学计划中设置的部分专业基础课、专业课,如微生物学(大型真菌的栽培等,…)、仪器分析(……), ……
四、仪器设备及实验材料
1. 器具:聚乙烯栽培袋、线绳、铁锨、水桶、大盆、脸盆、喷雾器、大镊子等。 2. 材料:棉籽壳、石灰粉、过磷酸钙、栽培种、高锰酸钾等。
五、实验内容与方法
(一)实验内容
(一)制作发酵料 (二)袋栽
(三)排袋发菌 利用课余时间进行观察和管理
(二)方法步骤
1、发酵料的制作
(1)培养料配方籽壳96%,石灰2%,过磷酸钙1%,石膏1%。
(2)拌料提前一天将棉籽壳摊薄、撒石灰粉、洒水预湿。然后拌入石灰及石膏粉,过磷酸钙溶解少量水后拌入。最后加清水将培养料拌到含水量(挤出1~2滴水),调pH8.0~9.0 。(3)发酵建长形堆,纵横打料孔,顶部盖草被,四周围薄膜。料温升至65℃时保持一天翻堆,共翻2~3次堆。气温高时可在最后一次翻堆时喷0.1%多菌灵。发好的料呈咖啡色、有香味、pH7.0~7.5、含水量以指缝泌水而不下滴为宜。
2.装袋
用宽25~28×50cm聚乙烯袋,事先扎3道微孔线(中间及距两端6~7cm处各一道线)一端扎活结,层播法装袋(微孔线处放菌种),上端再扎活结。
两端用种量各占总用种量的2/5,中层1/5,多撒于四周。菌袋要装得外紧内松,光滑、饱满、充实。
3.排袋发菌
根据气温决定菌袋放置的场所及袋层高度。
管理要点是:
防杂菌、害虫,料温20~25℃,光线暗,空气新(1周后逐渐加强通风),空气湿度60%~70%。7~10天倒换一次菌袋位置。直至白色菌丝长满菌袋,吃透培养料。
4.分化 加大温差(8~10℃)、提高空气湿度(80%~85%)、加强通气及光照条件。 5.育菇 现原基时解口或划口,保持光照及85%~90%空气湿度,随菇体的长大加强通气条件,直至菌盖边缘变薄时成丛扭收或割收。
喷水时,勿强水喷、硬风吹;勿喷珊瑚期以前的菇;勿喷后闷湿。通风时,勿通对流风与干热风,有风天气开背风窗。
六、实验报告与实验汇报
及时对实验数据进行整理和分析,按江西农业大学学报格式要求写作小论文。每组同学做好1份实验论文PPT,在全班进行交流汇报,老师进行点评。
七、思考题
1.将自己装的菌袋进行管理,记录各期的生长情况,并对异常现象进行原因分析。 2.培养料在发酵中出现变黑、发粘、发臭现象,是哪些原因导致的? 3.子实体生长期,若喷水过多及通风太强的易出现哪些问题?