1．斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液） 2．苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液 3．双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液） 4．体积分数为50%的酒精溶液 5．碘液 6．蒸馏水 六、方法步骤： 一、可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 苹果或梨组织液必须临因苹果多酚氧化酶（去皮、切块、研磨、时制备。 过滤） 含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试 管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL应将组成斐林试剂的甲斐林试剂很不稳定，新制的斐林试剂，振液、乙液分别配制、储甲、乙液混合保存荡。 存，使用前才将甲、乙时，生成的Cu ( OH ) 液等量混匀成斐林试- 6 -
2 在70~ 900C下分解剂； 成黑色CuO和水； 甲、乙液分别加入时切勿将甲液、乙液分别可能会与组织样液加入苹果组织样液中进发生反应，无Cu OH行检测。 4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧生成。 最好用试管夹夹住试管防止试管内的溶液上部，使试管底部不触冲出试管，造成烫杯中，加热约2分钟，及烧杯底部，试管口不伤； 观察到溶液颜色：浅朝向实验者。 蓝色 → 棕色 → 砖也可用酒精灯对试管直 红色（沉淀） 二、脂肪的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 因为浸泡时间短，不易接加热。 缩短实验时间。 花生种子浸泡、去皮、切干种子要浸泡下一些子叶薄片，将薄片3~4小时，新花切片；浸泡时间过长，放在载玻片的水滴中，用生的浸泡时间吸水纸吸去装片中的水。 可缩短。 组织较软，切片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 在子叶薄片上滴2~3滴苏染色时间不宜丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色过长。 1分钟。 用吸水纸吸去薄片周围染 - 7 -
酒精用于洗去浮色，不液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒 精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄装片不宜久放。 时间一长，油滴会溶解片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。 三、蛋白质的鉴定 操 作 方 法 制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 注 意 问 题 解 释 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 鉴定。加样液约2ml于试管中，加入双缩A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提在乙醇中。 脲试剂A，摇匀；再加先加A液后加B液。 供一个碱性的环境。入双缩脲试剂B液 - 8 -
A、B液混装或同时加3~4滴，摇匀，溶液变CuSO4溶液不能多加。 入，会导致Cu2+变成紫色。 Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。 否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。 可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。 附：淀粉的检测和观察 用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。 七、考点提示： 1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 答：葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。
- 9 -
碘液不要滴太多 以免影响颜色观察 2、还原性糖植物组织取材条件？ 答：含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
3、研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 答：加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。
4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 答：混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。
5、还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为？ 答：浅蓝色 棕色 砖红色。
6、花生种子切片为何要薄？ 答：只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。
7、转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 答：切片的厚薄不均匀。 8、脂肪鉴定中乙醇作用？ 答：洗去浮色。
9、双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的怎样通过对比看颜色变化？ 答：不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。
实验三：观察DNA和RNA在细胞中的分布
一、实验原理：
1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中。
- 10 -