⑤根据操作方式不同：洗脱展开、迎头分析、置换展开（洗脱色谱） 置换展开适合大量处理稀溶液，是最常见的色谱分析法。
60、F=（1-εc）/εc可得色谱柱内不同浓度的溶质从柱内流出所需的洗脱时间。 61、tR=τ（1+mF） VR=V0（1+mF） VR=V0+m（Vt-V0） 线性分配平衡情况下洗脱峰的洗脱时间或体积计算公式
对于优惠吸附，因为f`(cm)随cm增大而减小，则溶质浓度越高，洗脱时间越短，所以洗脱峰前部出现激波层，而后部明显拖尾。
62、理论板模型HETP=L/N 理论版当量高度HETP
63、N=16（θR/W）2 θR 平均洗脱时间 W 底线处切线宽度
64、HETP=A/u+B+Cu ABC是与u无关的常数 u流速
65、分离度（分辨率）resolution 表达两个洗脱位置相邻的溶质相互分离的程度 Rs=2（θR2-θR1）/（W1+W2） 假定洗脱曲线为Gauss分布，分配平衡关系为线性，并且利用两种溶质测得的理论板数相等， Rs=F（m2-m1）N1/2/2(2+m1F+m2F)
66、凝胶过滤色谱GFC是利用凝胶粒子为固定相，根据料液中溶质相对分子质量的差别进行分离的液相色谱法。
67、VR,B - VR,A = (Vt - V0)(mB - mA) VR,B VR,A 分别为溶质AB的洗脱体积
68、凝胶特性参数：①排阻极限②分级范围③凝胶粒径④空隙体积⑤溶胀率⑥床体积 69、影响分离的因素：①线速度②料液体积③料液浓度④相对分子质量与分配系数的关系⑤凝胶粒径
70、凝胶过滤色谱的应用：
①分离纯化：GFC可用于相对分子质量从几百到106数量级的物质的分离纯化
②脱盐：GFC在生物分离领域的另一主要用途是生物大分子溶液的脱盐，以及除去其中的低相对分子质量物质。
③相对分子质量的测定：用于未知物质的相对分子质量测定。
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71、离子交换色谱IEC是利用离子交换剂为固定相，根据荷店溶质于离子交换剂之间经典相互作用力的差别进行溶质分离的洗脱色谱法。 72、线性梯度洗脱法：
优点：流动相离子强度连续增大，不出现干扰峰，操作范围广。 缺点：需要特殊的调配浓度梯度的设备。 73、逐次洗脱法：
优点：利用切换不同盐浓度的流动相溶液进行洗脱，不需要特殊梯度设备，操作简便。 缺点：因为流动相浓度不连续变化，容易出现干扰峰，此外容易出现多组分洗脱峰重叠现象，因此洗脱操作参数的设计比较困难。
74、实际色谱操作中，若料液组成为止，一般首选线性梯度洗脱法，确定各种组分的分配特色以及色谱操作的条件。
75、疏水相互作用色谱HIC原理：利用表面偶联弱疏水性基团的疏水性吸附剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行蛋白质类生物大分子分离纯化的洗脱色谱法。
76、反相色谱RPLC：利用表面非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性（疏水性）的差别进行分离纯化的洗脱色谱法。 77、亲和作用：指生物分子间的特异性结合作用。
78、亲和作用包括静电作用、氢键、疏水性相互作用、配位键、弱共价键。 79、亲和色谱的固定相是键合亲和配给的亲和吸附介质。由于目标产物基于生物亲和作用吸附在固定相上，具有高度的选择性。
80、亲和色谱的操作分进料，杂质清洗，目标产物洗脱，色谱柱再生。
81、包含体 inclusion body 重组蛋白质的高表达常常导致其在胞内发生错误折叠和聚集，形成被称为包含体的聚集体。 82、复性 renaturation 83、结晶 cystallization
84、结晶与沉淀的区别：结晶（形状一定的固体粒子，有规则排列的晶体）沉淀（无规则排列的、不定型的固体颗粒，夹杂共存的杂质盐和溶剂，纯度低于结晶） 85、包和浓度 saturated concentration 86、过饱和与超溶解度曲线
A稳定区，不饱和区。即使有晶体存在也会自动溶解。
B第一介稳区，第一过饱和区。不会自发成核，当加入结晶颗粒时，结晶会生长，但不会产生新晶核。加入的结晶颗粒称为晶种。
C第二介稳区，第二过饱和区。不会自发成核，但加入晶种后，在结晶生长的同时会有新晶核产生。
D不稳定区，自发成核区域。瞬间出现大量微小晶核，发生晶核泛滥。
87、工业结晶操作均在介稳区内进行，主要是第一介稳区。 88、结晶的推动力是浓度差。
89、干燥drying 是利用热能除去目标产物的浓缩悬浮液或结晶（沉淀）产品中湿分的单元操作，通常是生物产物成品化前的最后下游加工过程。
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90、湿空气中的水汽含量称为湿度humidity
91、物料中的水分：表面吸附水分，非结合水，结合水
（书116页题）溶剂萃取分离A和B两种抗生素，初始水相中A和B的质量浓度相等，A和B的分配系数与其浓度无关，分别为10和0.1.利用混合、澄清式萃取操作，设每级萃取均达到分配平衡，并且萃取前后各相体积保持不变。（1）若采用一级萃取，萃取水相中90%的A，所需相比（有机相与水相的体积比）为多少？此时有机相中A的纯度（即A占抗生素总质量的百分比）是多少？（2）若采用多级错流接触萃取，每级萃取用新鲜的有机相，相比均为0.5，计算使A在有机相中的收率达到99%以上所需的最小萃取级数，并计算有机相中A的实际最大收率和平均纯度？
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（书181页习题）某凝胶过滤介质的排阻极限为200kDa，填充柱体积为100mL，用其测得A和B两种蛋白质的洗脱体积分别为58mL和64mL，相对分子质量2000kDa的蓝色葡聚糖的洗脱体积为40mL。
（1） 试计算A和B的分配系数；
（2） 若在某流速下用A和B两种蛋白质溶液测得该凝胶过滤色谱柱的理论板当量高度 均为0.3mm，且洗脱曲线呈Gauss分布，在此流速下要使微量的AB混合溶液的分离度达到1.3，此GFC柱的最小填充高度为多少？
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