b、将上述混合液过滤,溶液中加硫酸铵粉末,至不再溶解,析出的即为清蛋白,再加水稀释,沉淀溶解 (6)乙醇沉淀蛋白质
取蛋白质溶液1ml,加晶体氯化钠少许,待溶解后再加入95%
乙醇2ml混匀,观察到有沉淀析出(7)重金属盐沉淀蛋白质
取试管2支各加蛋白质溶液2ml,一管内滴加1%醋酸铅溶液
另一管内滴加1%硫酸铜溶液,至有沉淀生成
(8)生物碱试剂沉淀蛋白质
取试管两支各加2ml蛋白质溶液及1%醋酸铅溶液5滴,向一管中加5%鞣酸溶液数滴,观察到结果如图
,另一管中加饱和苦味酸溶液数滴,观察结
果如图
六、实验结果分析
在本次实验中蛋白质盐析现象不明显,究其原因是饱和的硫酸铵溶液一加到蛋白质溶液中去后,它的浓度就变小,导致盐析能力减弱。我觉得要使这个实验取得较好的效果,应在蛋白质溶液中加硫酸铵晶体,边加边振荡直至不再溶解,这时会有大量的蛋白质析出。所以,做蛋白质盐析实验首先应注意浓度。
另外的一些思考:
1、我认为做蛋白质的盐析实验时,可以先把蛋白质溶液的PH调到等电点,再加入饱和中性盐,这样会更利于沉淀的析出
2、通过这次蛋白质的沉淀实验,我明白了为什么鸡蛋清可以用作铅或汞中毒的解毒剂,也明白了为什么氯化汞可以作为杀菌剂,都是因为:重金属盐类易于蛋白质结合成稳定的沉淀而析出,该沉淀不溶于水,且这个沉淀过程不可逆。