1、吸附 2、 侵入 3、脱壳 4、病毒大分子的合成 5、 装配与释放
25、质粒(plasmid);质粒的检测方法(211)
质粒是一种独立于染色体外,能进行自主复制的细胞质的遗传因子,主要存在于各种微生物细胞中。
检测方法:超离心或琼脂糖凝胶电泳。
致育因子(Fertility factor,F因子,附加体)(212)
F因子能以游离状态和与染色体相结合的状态(Hfr)存在于细胞中。F质粒在大肠杆菌的接合作用中起作用,当Hfr菌株上的F因子通过重组回复成自主状态时有时可将其相邻的染色体基因一起切割下来,成为携带某一染色体基因的F因子。
抗性质粒(抗性因子、R质粒)(212)
带有R质粒的细菌对集中抗生素或其他药物(氯霉素、链霉素、磺胺、氨苄青霉素、卡那霉素)呈抗性。许多R质粒能使宿主细胞对许多金属离子呈现抗性(砷、银、钴、汞等)
代谢质粒(Metabolic plasmid)(213)
代谢质粒上携带能降解某些基质的酶的基因,含有这类质粒的细菌(假单胞菌)能将复杂的有机化合物(尤其是有毒化合物)降解成能被其作为碳源和能源利
用的简单形式,也成为降解质粒。
26、基因突变
一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变,包括一对或少数几对碱基的缺失、插入或置换,而导致的遗传变化。(215)
27、营养缺陷型是微生物遗传学研究中重要的选择标记和育种的重要手段,在选择培养基(一般为基本培养基)上不生长,是一种负选择标记
营养缺陷型实验步骤(219)
①将待分离突变株的原始菌株以合适的稀释度涂布到野生型菌株和突变株均能生长的主平板上,经培养后形成单菌落
② 经过一消毒的“印章”讲平板的菌落分别原位转移到与院平板相同营养成分的平板a以及不含缺陷型所需要的营养因子的平板b
③ 经培养后对照观察两平板上形成的菌落,如果在a上生长在b上不长,则为所需分离的突变型
④在a上挑取b上不长的相应位置的单菌落,并进一步在完全培养基上划线分离纯化。
营养缺陷型的表示方法(218)
它的基因型常用所需要营养物的前三个英文小写斜体字母表示,例如
hisC、lacZ其中的C、Z表示同一表型中不同基因的突变。形影的表型则用HisC
和LacZ表示。
28、细菌素和抗生素的区别(213)
细菌素 抗生素 1抑制或杀死近缘甚至同种不同株的细菌 较广的抗菌谱 2通过核糖体合成多肽 一般是次级代谢物 3结构基因或相关基因一般位于质粒或转座子上 一般无直接结构基因相
关酶的基因多在染色体上
29、抗药性突变型特点、表示方法(219)
抗药性突变是由于基因突变使菌株对某种或某几种药物,特别是抗生素,产生抗性的一种突变型。
这类突变类型常用所抗药物的前三个小写斜体英文字母加上“r”表示,如strr和strs分别表示对链霉素的抗性和敏感性。再加有相应抗生素的平板上,只有抗性突变才能生长。所以很容易分离的到。
30、试述用Ames法检验致癌剂的理论依据、方法概要和优点(222)
许多化学诱变剂能够引起动物和人的癌症,利用细菌突变能检测环境镇南关存在的致癌物质是一种简便、快速、灵敏的方法。利用书伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株的回复突变性能来进行实验,它在不含组氨酸的培养基中不能(或极少)生长,如果回复突变率因某种化学诱变剂的作用而增加,则这种化学药物具有致癌性。Ames试验的准确率达80%~90%
31、回复突变
突变体失去的野生型性状,可以通过第二次突变得到恢复(222) 32、细菌的三种水平基因转移形式(224)
细菌的接合作用:通过细胞的直接接触而产生的遗传信息的转移和重组过
程(225)
细菌的转导:由病毒介导的细胞间进行遗传交换的一种方式(227) 遗传转化:同源或异源的游离DNA分子(质粒和染色体DNA)被自然或人工感受态细胞摄取,并得到表达的水平方向的基因转移过程。
33、局限性转导与普遍性转导的主要区别(229)
①被转导的基因共价地与噬菌体DNA连接,与噬菌体DNA一起进行复制、包装以及被导入受体细胞中。②局限性转导颗粒携带特殊的染色体片段并将固定的个别基因导入受体,故称为局限性转导。
34、自然转化必要条件(229):受体细胞处于感受态、外源DNA
人工转化手段(231):CaCl2 、电穿孔法
转导模型(228)35、感受态细胞(283)
理化方法诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。 36、基因组测序(234)
测定待测生物基因的所有碱基排列顺序,并对遗传信息进行研究分析
37、PCR的原理、方法、用途(270)
PCR是一种体外快速扩增特定DNA序列的技术
原理: 需要一对寡聚核苷酸作为引物,把各自所要扩增靶DNA片段两条链的末端互补。一个循环后,新合成的DNA又可作为下一个循环的模板进行复制,重复下三个动作,DNA片段呈指数增长。
方法:1、变性 ,高温变性,双链被解成单链
2、退火,反应系统降温使引物与模板DNA两端的碱基配对