① 氢键 ② 离子键 ③ 共价键 ④ 疏水作用
8. 以下哪些实验在说明核酸是遗传物质方面起了决定性作用？ ① O.T.Avery等(1944年)，肺炎球菌转化实验 ② Chargaff(1950年)，DNA碱基组成研究 ③Hershey和Chase(1951年)，同位素示踪T2噬菌体感染大肠杆菌的试验 ④ Wilkins和Franklin(1953年)，DNA x-射线晶体衍射研究。 9. 下列哪个不是推导米氏方程的假设条件？ ① 测定速度为反应的初速度 ② [S0] >>[E] ③ ES水解生成E+S的速度显著快于ES形成P+E的速度，或称之为“快速平衡学说”④ 当反应达到稳定状态时，中间产物ES的形成速度不等于其分解速度。
10.氧化磷酸化和光合磷酸化的区别为：a. 在细胞中进行部位不同 b. ATP酶在膜上定位的方向不同 c. 磷酸化所需的能量来源不同 d. 电子供体和受体不同 e. 能量转化过程中H流动方向不同。以上正确的为：
① a、b、c ② a、c、e ③ b、c、d、e ④ a、b、c、d、e 二、是非题
1. 同工酶在电泳时迁移率相同。( ) 2. 结晶了的酶是纯酶。( )
3. 膜的独特功能由特定的蛋白质执行，功能越复杂的生物膜，膜蛋白含量越高。( ) 4. SDS—PAGE测定蛋白质分子量的方法是根据蛋白质分子所带的电荷不同。( ) 5. 反竞争性抑制剂是既能改变酶反应速度，又能改变酶Km的一种抑制剂。( ) 6. 蛋白质折叠的主要驱动力是氢键。( )
7. SOD专一性的清除超氧物负离子，是细胞防御系统的重要组成部分。( ) 8. 在生物圈中，能量从光氧生物流向化氧生物，而物质在二者之间循环。( ) 9. 核糖体不仅存在于细胞质中，也存在于线粒体和叶绿体中。( )
10.RNA病毒不含有DNA基因组，所以根据分子遗传中心法则，它必须先进行逆转录，才能复制和增殖。( )
11.丝氨酸是蛋白质磷酸化位点，因此蛋白质中含有的丝氨酸残基均能被磷酸化。( ) 12.蛋白质分子中的亚基也称为结构域。( ) 三、解释下列名词
1. 分子伴侣 2. PCR 3. Na+ .K+—ATPase 4. 生物传感器 5. ribozyme 6. 受体 7. cDNA文库 8. 原级同工酶 四、问答题
1. 有一种七肽具有神经传导抑制剂的作用，其氨基酸组成为Ala5、Phe1、Lys1，七肽与FDNB反应后经酸水解，释放出DNP—Ala。用胰蛋白酶处理产生组成为Ala3、Phe1的四肽和组成为Ala2、Lys1的三肽。与胰凝乳蛋白酶作用则生成游离的Ala和一个六肽。试推导出该七肽的氨基酸序列。
2. 画出肌红蛋白(Mb)和血红蛋白(Hb)的氧合曲线，并讨论各自氧合曲线与其功能相关性。 3. 简述人类基因组计划(HGP)的概况，并结合自己的专业，阐述它对生命科学发展的意义。
6
+
4. 什么是双信使信号转导系统，试述胞外信息通过该系统在胞内得以传递的机制。 5. 试述三种直接或间接的方法，以证明某种外源基因已在转基因生物中存在或表达。 6. 解释为什么测定酶活力时一定要测定初速度，且一般以测定产物增加最为宜。
高级生物化学试题2001级
一、单项选择
1. 蛋白质可与碱共热而水解，虽然这个过程会破坏一些氨基酸，但它却被常用来测定蛋白质中哪一种氨基酸的含量？ ① Ser ② Cys ③ Trp ④ Tyr
2. 如果测定一个小肽的氨基酸顺序，下列试剂中最合适的是 ① 茚三酮 ② CNBr ③ 胰蛋白酶 ④ PITC 3. 超过滤与凝胶过滤是 ① 两种性质不同，用处也不同的蛋白质制备方法 ②同一性质，表现方法不同的蛋白质制备方法 ③ 同一种方法的两个名词
4. TPCK(N-对甲苯磺酰苯内氨酰甲基酮)是下列哪个酶的亲和标记试剂？ ①胰蛋白酶 ② 胰凝乳蛋白酶 ③ 甘油醛—3-磷酸脱氢酶 ④ 溶菌酶
5. 利用基因工程手段，包括基因的定点突变改造蛋白质分子，使之具有更完善、更能符合人类需求的功能。这种技术和科学被称之为 。
① 遗传工程 ② 蛋白质工程 ③ 细胞工程 ④ 蛋白质分子结构的预测 6. 非竞争性抑制剂使
① Vmax不变，Km变大 ② Vmax变小，Km不变 ③Vmax变小，Km变小 ④ Vmax变大，Km变大
7. 细胞内外钠钾的运送是属于
① 主动运输 ② 促进扩散 ③ 被动运输 ④ 基因转位 8. 生物膜脂双层的流动性主要取决于 ① 磷脂 ② 胆固醇 ③ 鞘磷脂 ④ 脑磷脂
9. 甾体激素对机体的影响是激素与受体结合后通过什么方式而实现的？ ① cAMP第二信使作用②磷酸肌醇的级联反应③激活酪氨酸激酶④真核调节基因转录 10.寡聚脱氧胸苷酸(oligo dT)纤维素柱层析分离mRNA是属于 ① 分配层析 ② 离子交换层析 ③ 亲和层析 ④ 高压液相层析
11.某DNA片段按末端终止法测序得部分电泳图谱如下，因此该DNA的部分序列是 ① AGCTCAGG ② GGACTCGA ③ AGCCTCAGG ④ GGACCTCGA 12.DNA拓扑异构酶I型和II型的主要区别在于 ①I型使DNA的一条链发生断裂和再连接，II型使DNA的二条链同时发生断裂和再连接。②I型使DNA的两条链同时发生断裂和再连接，II型使DNA的一条链发生断裂和再连接。③I型、II型都使DNA的一条链发生断裂和再连接，但前者催化反应不需ATP，后者需ATP。
④I型、II型都使DNA的二条链同时发生断裂和再连接，但前者催化反应不需ATP，后者 需ATP。
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二、是非题
1. 含有四个二硫键的胰脏核糖核酸酶，若用巯基乙醇和尿素使其还原和变性，由于化学键遭到破坏和高级结构松散，已经无法恢复其原有功能。( )
2. 免疫球蛋白由两条轻链和两条重链所组成，抗体与抗原的结合只涉及轻链，因为它有可变区域，重链的序列基本上都是恒定的，因此，只起维持结构稳定的作用。( ) 3. 血红蛋白和肌红蛋白均为氧的载体，前者是一个典型的别构蛋白，因而与氧结合过程中呈现正协同效应，而后者却不是。( )
4. 一般讲，从DNA分子的三联体密码中可以推定氨基酸的顺序，相反，从氨基酸的顺序也可以毫无疑问的推出DNA顺序。( )
5. 膜蛋白的跨膜肽段的二级结构大多为α-螺旋。( ) 6. 具有正协同效应的酶，其Hill系数总是大于1。( ) 7. 所有别构酶都是寡聚蛋白。( )
8. 一个基质连有Poly(u)配基的亲和层析柱，可方便的从细胞匀浆中分离出真核的RNA。( ) 9. 突变是遗传物质的畸变，点突变时有一个碱基的改变，一定会导致氨基酸顺序的改变。( ) 10.反转录酶仅具有RNA指导的DNA聚合酶的活力。( ) 三、解释下列名词
1. 超螺旋DNA 2. 肽平面 3. PAGE 4. 信号肽 5. AFLP 6. 酶标免疫分析 7. 蛋白质的可逆磷酸化 8. Kat 型抑制剂 四、问答题
1. 某天然九肽，其组成为：Gly2、Phe2、Tyr1、Met1、Asp1、Arg1、Pro1，经胰凝乳蛋白酶水解后可分得一个五肽和一个四肽，四肽的组成为Phe1、Tyr1、 Gly1和Pro1。此九肽的CNBr处理产物再经阳离子交换树脂层析并洗脱得一个组成为Arg1、Phe1、Gly1的三肽，此九肽经胰蛋白酶水解可得Phe，如用FDNB反应后再水解得DNP-Tyr。请写出这九肽的全顺序，并阐述解析过程。 2. 什么是核酶和抗体酶？它们和酶有什么不同？
3. 某一均一的DNA样品，用EcoR I、Hpe II、Hind III3种限制性内切酶及它们的组合进行酶切，测出得到的DNA片段的大小如下： EcoR I——————1.3kb(x2) Hpe II——————2.6kb Hind III——————2.6kb
EcoR I+ Hpe II——————0.5kb 0.8kb 1.3kb Hpe II+ Hind III—————— 1.2kb 1.4kb
EcoR I+Hpe II+ Hind III—————— 0.5kb 0.6kb 0.7kb 0.8kb 指出这种分子是线性还是环形的，并绘出限制性图谱。
4. 试分析同源细胞色素C结构的种属差异和保守性，阐明其结构和功能的统一性。 5. 细胞表面受体主要有哪些类型？各具有什么特点，作用机理有何区别？
6. 怎样知道DNA复制是半保留复制而不是全保留复制？请解释Meselson和Stahl关于大肠
8
杆菌DNA复制实验的结果。
高级生物化学试题2002级
一、单项选择
1. 协同效应的结构基础是：
①蛋白质分子的缔合 ②蛋白质的别构作用 ③蛋白质分子被激活 ④蛋白质的变性作用 2. 有一个蛋白质样品，经SDS-PAGE及不连续PAGE检查均显一条带；N端分析及C端分析说明它只有一个端基；等电聚焦电泳中呈现一深一浅的两条带。一般情况下，这蛋白质样品最可能是
① 样品不纯 ② 样品呈微不均一性 ③ 样品由几种大小不同的亚基组成 3. 测定蛋白质在DNA上的结合部位常用 ① Western印迹法 ② PCR ③ 限制性内切酶谱分析法 ④ DNase1保护足迹分析法 4. 对具有正协同效应的酶，其反应速度为最大反应速度0.9时的底物浓度与反应速度为最大反应速度0.1时的底物浓度之比值应该是 ① >δ1 ② = 81 ③ <81
5. 基因有两条链，与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做 ① 有义链 ② 反义链 ③ 重链 ④ cDNA链 6. 在染色体中DNA的构象主要是 ① A 型 ② B型 ③ C型 ④ Z型
7. 证明DNA是遗传信息携带者的科学家是
① Meselson和Stahl ② Watsonn和Crick ③ Avery、Macleod和McCarty ④Berg和Cehen 8. 端粒酶是一种 ① 限制性内切酶 ② 反转录酶 ③ RNA聚合酶 ④ 肽酰转移酶
9. 钙调蛋白是一种重要的调控蛋白，参与多种酶作用的调控，它属于 ①跨膜信息转导的G蛋白家族②钙结合蛋白家族③免疫球蛋白家族④蛋白质激酶家族 10.甾醇类激素容易通过靶细胞膜，是由于它 ①与膜受体有高度亲和力 ②分子的亲水性强 ③分子上有羟基结合 ④自身是脂溶性的 11.通常使用哪一种试剂测定多肽链的氨基末端？ ① CNBr ② 苯异硫氰酸酯 ③ 6mol/L的HCl ④ 胰蛋白酶 12.蛋白质变性伴随有结构上的变化是
① 肽链的断裂 ②一些侧链基团的暴露 ③ 氨基酸残基的化学修饰 ④ 蛋白质亚基聚合 13.在接近中性ph的条件下，下列哪种基因既可作为H+的受体，又可作为H+的供体？ ① His-咪唑基 ② Lys-*-氨基 ③ Arg-胍基 ④ Cys-巯基 14.一个速度对底物浓度作图有S型曲线的酶 ① 肯定是别构酶 ② 不是别构酶 ③ 不一定是别构酶 15.酶促反应降低反应活化能的能量来源是 ① 底物化学键的断裂可释放的化学能 ② 酶与底物结合能 ③ 底物形变能 ④ 酶构象变化所释放的能量
9
16.基因工程技术的创建成为可能是由于发现下列哪些酶？ ① DNA聚合酶 ② DNA连接酶 ③ II型限制性内切酶 ④ 末端转移酶 17.寡聚脱氧胸苷酸(oligo dT)纤维素柱层析分离mRNA是属于 ① 分配层析 ② 离子交换层析 ③ 亲和层析 ④ 高压液相层析 18.用[
α-32
Ρ]dATP标记一个DNA片段，需要用 。
① 多核苷酸激酶 ② DNA连接酶 ③ DNA聚合酶 ④ 逆转录酶 19.以下哪一个是正确的？ ① 线粒体内膜对H+离子没有通透性 ② 线粒体内膜能通透H+离子由内向外 ③ 线粒体内膜能通透H+离子由外向内 ④ 线粒体内膜能自由通透H+离子 20.物质跨膜主动传送是指传送时 ① 在一定温度范围内传送速度与绝对温度的平方成正比 ② 消耗能量(不单指ATP) ③ 需要有负责传送的蛋白质 ④ 需要ATP
21.目前已经知道某种金属离子在细胞信号转导行使细胞功能时起十分重要作用。它是 ① Na+ ② K+ ③ Ca2+ ④ Mg2+
22.有一个肽的组成是Ala、Asp、Gly、Leu2、Val、Pro，它的N端是封闭的，下列方法中你首选用什么方法作为你测定这一个肽的序列的第一步？ ① 胰蛋白酶水解 ② 溴化氰裂解 ③ 羧肽酶水解
23.形成稳定的肽链空间结构，一个重要的原因是肽链中的四个原子以及和它相邻的a碳原子处于
① 不断绕动状态 ② 可以相对自由旋转 ③同一平面 ④随不同外界环境而变换的状态 24.腺苷酸环化酶存在于 ① 内质网膜 ② 细胞核 ③ 质膜 ④ 胞浆或质膜 25. 非竞争性抑制剂使 变大，Km变大 二、是非题
1. 某一生物样品，与茚三酮反应呈阴性，用羧肽酶A和B作用后测不出游离氨基酸，用胰凝乳蛋白酶作用后也不失活。因此可肯定它属非肽类物质。( )
2. 与肌红蛋白不同，血红蛋白由四个亚基组成，因此提高了它与氧的结合能力，从而增加了输氧的功能。( )
3. 糖蛋白合成时蛋白质糖基化位点主要在Ser、Asn残基上。( ) 4. 酶的最适温度和最适pH都是酶的特征性常数。( ) 5. NO是最小的信使分子之一。( )
6. 真核生物的基因不组成操纵子，不生成多顺反子mRNA。( ) 7. 单克隆抗体和多克隆抗体的区别在于后者可以抗多种抗原。( ) 8. 米氏常数是酶与底物形成复合物的结合常数。( )
9. 突变是遗传物质的畸变，点突变时有一个碱基的改变，一定会导致氨基酸顺序的改变。( )
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① Vmax不变，Km变大 ② Vmax变小，Km不变 ③Vmax变小，Km变小 ④ Vmax