·柠檬酸盐试验
取装有西蒙斯氏柠檬酸盐培养基的试管分别标记待测菌种的编号和空白对照以无菌操作分别将少量菌苔接种于各支相应的管中，然后置于37℃恒温箱中培养24h。观察结果，若培养基变蓝色，则表明该菌能利用柠檬酸盐作为碳源而生长，即为阳性反应，以“＋”表
【】
示。若培养基仍为绿色则为阴性反应，以“－”表示8。
6、产淀粉酶芽孢杆菌产淀粉酶活性的测定
发酵：将初筛纯菌种接种于30/250mL 种子培养基,37 ℃、250r/min摇床培养过夜。种子液以2 %接种量接种于产酶液体培养基50/500mL ,相同条件培养72h ,发酵8000r/min，离心10min ,取上清液测酶活, 每个样品重复3 次,最后结果取平均值。
在Young等方法的基础上作了改进：取5ml 0.5%的可溶性淀粉溶液，在40℃水浴中预热10min，然后加适当稀释的酶液0.5ml，反应5min后，用5ml 0.1mol/L H2SO4终止反应。取0.5ml反应液与5ml碘液显色，在620nm处测光密度。以0.5ml水代替0.5ml反应液为空白，以不加酶液（加同样体积的缓冲液）的管为对照。酶活力根据下式计算：
酶活力（u/ml）=(R-r)/R*50*D
式中R、r分别表示对照和反应液的光密度，D为酶的稀释倍数。调整D使（R-r）/R在0.2-0.7之间。确定在40℃ 5min内水解1mg淀粉的酶量为一个活力单位。 菌种保藏法（斜面冰箱包保藏法）
将菌种接种在新鲜外面培养基上，定温培养长出丰满菌苔后（一般形成芽孢的细
菌要形成芽孢），贴上标签，放在试管上，在棉塞部位用尼龙纸或防水纸包好，以防外界污染和水浸湿，放入4℃冰箱中保藏。
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六、可能遇到的问题和需要注意的关键点。
1、要严格按照培养基配方配制培养基，防止杂菌污染。 2、观察结果时要注意滴加药量及反应时间。 3、严格无菌操作，防止污染情况的发生。
4、称药品用的药匙不要混用，称完药品应及时盖紧瓶盖。调pH时要小心操作，避免回调。不同培养基各有配制特点，要注意具体操作。
5、革兰氏染色时注意脱色的时间的控制，过长或过短都会影响实验结果。
6、进行染色鉴定时，都应有已知的对照菌种在同等条件下染色，然后进行对比记录结果。 7、在芽孢染色中，应注意温度的控制，避免染料在玻片上蒸腾，否则影响实验结果。
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