由图可知，显色剂最佳用量为2.00 mL 0.15%邻二氮菲溶液。
⒊工业盐酸中铁含量的测定
⑴标准曲线的制作
铁标液体积 （ mL ） 铁浓度 （ μg/mL ） 透射比 T(%) 吸光度 A
0 0 100 0 0.2 0.4 85.0 0.0706 0.4 0.8 66.3 0.1785 0.6 1.2 57.8 0.2381 0.8 1.6 41.1 0.3862 1.0 2.0 38.1 0.4191 据上面数据，作得标准曲线图如下：
标准曲线方程为 y=0.2216*x-0.0061
R2=0.98
⑵试样测定(工业盐酸铁含量的测定)
未知样标号 吸入盐酸的量（mL) 透射比T(%) 吸光度A 稀释后盐酸中铁的 1 1.0 82.2 0.0851 0.4116 2 1.5 75.1 0.1244 0.5889 含量（μg/mL） 把y =0.0851，0.1244代入标准曲线方程y=0.2216*x-0.0061中，
得到x=0.4116，0.5889，即稀释后工业盐酸中铁的含量为0.4116μg/mL，0.5889μg/mL。
由1.0* Cx2/50 = 0.4116，得Cx1=20.58（μg/mL） 由1.5 Cx3/50 = 0.5889， 得 Cx2=19.63（μg/mL） 则Cx=（Cx1+ Cx2）/2= (20.58+19.63)/2 = 20.11（μg/mL） RSD=3.34%
所以工业盐酸中铁的含量为20.11μg/mL。
小结：通过实验数据可知，最适宜波长为λ=512nm；邻二氮菲(0.15%)的适 宜用量为2mL；最终由标准曲线得工业盐酸中铁的含量为：20.11μg/mL。
六、实验注意事项
⒈不能颠倒各种试剂的加入顺序。
⒉读数据时要注意A和T所对应的数据。透射比与吸光度的关系为:A=log(I0/I)= log(1/T)；测定条件指：测定波长和参比溶液的选择。
⒊最佳波长选择好后不要再改变。 ⒋每次测定前要注意调满刻度。 七、思考题
⒈邻二氮菲分光光度法测定微量铁时为何要加入盐酸羟胺溶液？
答：工业盐酸中含有Fe2+和Fe3+，其中Fe2+与邻二氮菲(phen)能生成稳定的 桔红色配合物[Fe(phen)3]2+此配合物的lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε510 =1.1×104
L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。所 以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，然后，进 行铁的总量的测定 。
2参比溶液的作用是什么？在本实验中可否用蒸馏水作参比？
答：参比溶液的作用是扣除背景干扰，不能用蒸馏水作参比，因为蒸馏水成分与试液成 分相差太远，只有参比和试液成分尽可能相近，测量的误差才会越小。 3邻二氮菲与铁的显色反应，其主要条件有哪些？
答：邻二氮菲与铁的显色反应，其主要条件有：酸度一般(PH=5~6)、温度、 邻二氮菲 的用量，显色时间等。 八、实验总结
通过本实验，学习了确定实验条件的方法，再次熟悉了可见分光光度法的测量原
理和实验操作步骤,掌握了邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理以及掌握721型分光光度计的使用方法。