1、原核生物基因组
答：原核基因组很小，大多数只有一条染色体，且DNA含量小，特点如下：a结构简练，原核DNA分子的绝大部分用来编码蛋白质，只有一小部分不转录。b、存在转录单元c、有重叠基因，存在3种情况：一个基因完全在另一个基因里面；部分重叠；两个基因只有一个碱基对的重叠。d、有质粒 2、真核生物基因组的特点
答:a、真核基因组庞大，一般远大于原核基因组b、存在大量重复序列c、大部分为非编码序列，占整个基因组的90%以上，该特点是真核生物与细菌和病毒间最主要的区别。d、真核基因组的转录产物为单顺反子e、真核基因是断裂基因，有内含子。f、真核基因组存在大量顺式作用原件，包括启动子、增强子、沉默子。g、存在大量的DNA多态性。多态性是指DNA序列中发生变异而导致的个体间核苷酸序列的差异，主要包括核苷酸多态性和串联重复序列多态性。h、具有端粒结构。
3、DNA复制的特点和条件，以及复制起点 答：特点：a、半保留复制b、有一定的复制起始点c、复制方向(双向复制）d、需要引物e、半不连续复制。 条件：a、底物b、模板c、引发体和RNA引物d、DNA复制酶系。复制起点：DNA复制是从DNA分子的特定位置开始的，这一位置叫复制原点（复制起始点）（用ori表示）。是由一些具有特定核苷酸排列顺序的片段组成。 4、DNA聚合酶的共同特点
答：a、需要提供合成模板b、不能起始新的
DNA链，必须有引物提供3，
—OH c、合成
的方向都是5，—3，
d、除聚合DNA外还有其他功能
5、DNA连接酶
答：所需条件：a、切刻的 3’－OH 和 5’－P 相邻b、切刻各自碱基处于配对状态c、需要能量。原核（ATP、NAD）、真核（ATP） 用途： 复制过程中，5’ 端RNA引物被置换后切刻的连接、重组。 预引发：解旋解链，形成复制叉。 参与的因素有两个：复制原点的特异性结构；另一个是识别这些结构的特异性的蛋白质因子。
6、单链结合蛋白（SSB） 答：在E.coli 中以四聚存在
作用：a、结合DNA单链，稳定单链DNA，使DNA保持伸展的构像，可以重复使用。b、保护单链DNA，避免核酸酶的降解。 在原核中SSB与DNA结合表现出协同效应。 1）SSB之间的相互作用；2）第一个SSB和DNA的结合改变了DNA的结构。 7、哪些DNA进行滚环复制
a、真核rDNA的扩增,b、F因子DNA的转移,c、λ噬菌体裂解途经的复制, d、φX174,M13，G4等。单链环状DNA噬菌体第二阶段复制都是进行滚环复制的.
8、原核生物和真核生物DNA复制的比较 原核生物 真核生物 复制起点 一个 多个 复制子大小 大于1000kb 100kb 复制叉移动快（900bp/sec） 慢（50bp/sec） 速度 冈崎片段大1000~2000nt 100~200nt 小 聚合酶 3种 15种以上 快速生长时，复制在染色体全部复制完成之前， 起点可连续开始各个起点不再重新开始，快 新的复制（多复制速生长时，采用更多的复制 叉） 起点 端粒/端粒酶 无 有 复制起始的 许多因子的控制 9、DNA修复系统有哪些
答： DNA修复系统 功能 错配修复 恢复错配 切除修复（碱基、核苷酸） 切除突变的碱基和核苷酸片段 重组修复 复制后的修复，重新启动停滞的复制DNA直接修复 修复嘧啶二体或甲基化DNA SOS系统 DNA的修复，导致变异 10、细菌中的RNA酶 答：1）、核心酶：2个α亚基、一个β亚基、一个β’亚基和一个w亚基组成，在延长过程中起作用。依靠静电引力与DNA模板结合；非专一性的结合。2）全酶：核心酶加上 σ亚基后形成全酶，转录起始需要全酶，由δ因子辨认
起始位点。依靠空间结构与DNA模板结合；列，也不能形成稳定的发夹结构，在ρ 因专一性地与启动子结合；转录效率低，速度子作用下，NTP水解，释放能量，使新生缓慢。 RNA与模板脱落。 终止机制：RNA Pol转11、原核生物启动子结构 录DNA→ρ因子附着到RNA识别位点上→答：-10序列，也称为Pribnow框盒（Pribnow ρ因子跟在RNAPol后沿RNA移动→RNA box）保守序列为T80A95T45A60A50T100 Pol 在终止位点停下，并被ρ因子追上→在因此又称TATA Box 特点：1）在-6 - -13bp之间,位于-10bp左右，A.T较丰富，易于解链。 2）RNA聚合酶的牢固结合位点 （B 位点），在转录方向上解开双链形成开放型起始结构。 功能：(1) RNA pol紧密结合; (2) 形成开放启动复合体； (3) 使RNA pol定向转录。-35序列又称为Sextama盒（Sextama box），其保守序列为（T82T84G78A65C54A45）是RNA聚合酶起始识别区，这一识别过程与σ因子有关。在很大程度上决定了启动子的强度。 功能：为RNA pol的识别位点。σ亚基识别-35序列，为转录选择模板 12、真核生物启动子结构 答:1)核心启动子：①TATA区或Hogness区：一致序列是：T85A97T93A85A63A83A50）（全为A-T，少数含有一个G-C对）。中心在-25至-30，长度7bp左右，相当于原核的-10序列。是解链区。其作用是：(1) 选择正确的转录起始位点。(2) 影响转录的速率。 2）②中心在-75处，长度为9bp，共有序列GGT（G）CAATCT，前两个 G 的作用十分重要(转录效率)。作用：控制转录起始的频率。③在CAAT框上游，序列GGGCGG，与某些转录因子结合。CAAT和GC框均为上游序列，对转录的起始频率有较大影响。可有多个拷贝，也可以正反两方向排列。 13原核生物转录终止子分类 答：1）强终止子－内部终止子 终止机制：发夹开始形成→与RNApol发生作用，阻止RNA链的释放→造成高度延宕→RNA－DNA之间的 rU－dA 结合力弱 →DNA-RNA杂合体分开→转录终止 真正的终止点不固定，在 U串中的任何一处2）弱终止子－需要辅助ρ因子，又称为ρ依赖性终止子，终止子后无连续的U序转录泡中ρ因子使DNA-RNA杂种双链解开→转录终止 14、原核生物mRNA的特征 答：1)Prok.的mRNA半衰期短，只有几分钟2)许多原核生物mRNA以多顺反子的形式存在3）无帽子结构，有SD序列。 15、真核生物mRNA的特征 答：1）一般为单顺反子2）5’ 端的帽子。3）3’polyA尾巴 。 16、遗传密码特点 答：1）读码的连续性：编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读，密码间既不重叠、无间隔 2）密码具有简并性：由一种以上密码子编码同一个氨基酸的遗传现象称为密码的简并性。很多的氨基酸有几个密码子。只有甲硫氨酸和色氨酸有一个密码子。三个终止密码子不编码任何氨基酸：UAA、UGA、UAG。AUG既是起始密码子，又编码甲硫氨酸。2）密码子的普遍性与特殊性：蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。在有些情况下，终止密码子也可以编码氨基酸。 摆动性—密码子与反密码子的相互作用：当转运氨基酸的tRNA的反密码子与mRNA的密码子配对时，密码子前两对严格遵守碱基互补配对法则，但第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”。这种现象称为密码子的摆动性 方向性：密码子阅读方向为5’~3’ 17、tRNA种类 答：1）起始tRNA和延伸tRNA： 能特异地识别mRNA模板上起始密码子的tRNA称起始tRNA，其他tRNA统称为延伸tRNA 2）同工tRNA：携带AA相同而反密码子不同的一组tRNA。不同的反密码子识别AA的同义密码。结构上能被AA– tRNA合成酶识别的共性。
3）校正tRNA
18、氨酰tRNA合成酶的特点和功能
答：特点：1）该酶存在于胞液中，与特异氨基酸的活化以及氨基酰tRNA的合成有关。2）每种氨基酰tRNA合成酶对相应氨基酸以及携带氨基酸的数种tRNA具有高度特异性，这是保证tRNA能够携带正确的氨基酸对号入座的必要条件。3）酶对tRNA的识别，是因为在tRNA的氨基酸臂上存在特定的识别密码，即第二套遗传密码。 功能：1）为肽建的合成提供能量。2）执行遗传信息的解读。3）具有校正功能 19、rRNA的结构功能 答：结构：rRNA具有高度复杂的二级结构，线性rRNA分子内部有70％的区段形成了双链螺旋。各种蛋白质则结合到折叠的rRNA分子上。功能：1）具有肽酰转移酶的活性；2）为tRNA提供结合位点(A位点、P位点和E位点)；3）为多种蛋白质合成因子提供结合位点；4）在蛋白质合成起始时参与同mRNA选择性地结合以及在肽链的延伸中与mRNA结合；5）核糖体大小亚单位的结合、校正阅读无意义链或框架漂移的校正、以及抗菌素的作用等都与rRNA有关。 20、细菌中翻译的起始
答：1）第一个氨基酸是N-甲酰甲硫氨酸，是修饰的甲硫氨酸。是对游离的氨基进行封闭，防止他在肽链延伸时插入内部。 2）起始时mRNA和rRNA的碱基配对：翻译时的第一个密码子正确选读 3）30S起始复合物的形成：IF-3和核糖体30S rRNA结合，16S RNA和mRNA的S-D顺序结合。IF-2 + GTP + 氨酰甲硫氨酸形成中间复合体。 4）70S 起始复合物形成：带有tRNA、mRNA和3个翻译起始因子的小亚基复合物与50S大亚基结合，GTP水解，释放翻译起始因子。
21、肽链合成的延伸与GTP的作用 答：延伸：1）、AA-tRNA与核糖体A位点的结合。需要消耗GTP，并需EF-Tu、EF-Ts两种延伸因子2）肽键形成。是由转肽酶/肽基转移酶催化3）移位：核糖体向mRNA3’端方向移动一个密码子。需要消耗GTP，并需EF-G延伸因子和Mg2+ GTP 的作用： GTP 是一种变构因子 1） 使各种翻译因子与 tRNA 或核糖体易于以非共价键结合。2）GTP 水解释放的能量提高核糖体结合氨酰－tRNA 和移位的能力。3） GTP 还有使翻译准确的功能。 22、乳糖操纵子结构 答：1）P（启动子区）：长约 82bp。2）O操纵基因：长约35bp，阻遏物与O区结合影响了RNA聚合酶与启动子区结合形成转录复合物的效率。3）lacI基因（调节基因）：长约 1045bp，编码阻遏蛋白的基因，阻遏蛋白mRNA是弱启动子控制下组成型合成的，有4个亚基，每个亚基能结合一分子诱导物。每个细胞中有5-10个阻遏蛋白分子，lacYZA处于阻遏状态。
23、乳糖操纵子的负控阻遏调控机制： 1）当环境中无乳糖有葡萄糖时，无诱导物和阻遏蛋白结合，阻遏蛋白结合在操纵区，RNA聚合酶不能正常结合在操纵子区形成转录开放复合物，分解利用乳糖的基因不转录表达2）当环境中有乳糖无葡萄糖时，别乳糖诱导物和阻遏蛋白结合，阻遏蛋白构型改变，从操纵区解离下来，操纵子去阻遏，RNA聚合酶结合在启动子区形成转录开放复合物，开始转录结构基因，细菌分解利用乳糖。
24、乳糖操纵子的正调控
答：1）cAMP-CAP是正调控因子，cAMP是由腺苷环化酶催化合成。其浓度受葡萄糖代谢的调节。CAP是代谢物激活蛋白/CRP环腺甘酸受体蛋白，对转录没有影响，只有cAMP与它结合才起作用。结合位点是～22bp I -70 ~ -50 II -50 ~ -40 结合位点序列保守。cAMP-CAP 以两种方法来激活转录：①它可能直接和RNA Pol a亚基相互作用；②作用于DNA，改变其结构，从而帮助RNA Pol结合2）CAP-cAMP调控机制：无葡萄糖，cAMP浓度高时促进转录；有葡萄糖，cAMP浓度低时不促进转录。 25、协调调节
答：lac operon的功能是在正负两个调控体系的协调作用下实现的。阻遏蛋白封闭转录时，CAP不发挥作用；如没有CAP加强转录，即使阻遏蛋白从P上解聚仍无转录活
性。cAMP—CAP复合物与启动子区的结合是转录起始所必需的。当葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌优先利用葡萄糖，只要有葡萄糖存在，这些操纵元就不表达，lac操纵子的诱导作用既需要乳糖又需缺乏葡萄糖。 1） 当培养基中乳糖浓度升高而葡萄糖浓度降低时 ↙ ↘ 细胞中cAMP浓度升高 乳糖作为诱导剂与阻抑蛋白结合 ↓ ↓ cAMP与CRP结合并使之激合 ↓ CRP与启动基因结合并促使 促使阻抑蛋白与操纵基因分离 RNA聚合酶与启动子结合 ↘ ↙ 基因转录激活 2） 当培养基中乳糖浓度降低而葡萄糖浓度升高时 ↙ ↘ 细胞中cAMP浓度降低 缺乏乳糖与阻抑蛋白结合 ↓ ↓ CRP失活 ↓ 阻抑蛋白与操纵基因结合 CRP及RNA聚合酶不能与 启动基因结合 ↘ ↙ 基因转录被阻遏 26、色氨酸操纵子结构特点 答：(1) trpR(89’)和trpABCDE(25’)不连锁；(2) 操纵基因在启动子内(3) 有弱化子 (4) 启动子和结构基因不直接相连，二者被前导序列所隔开。 27、负阻遏系统调控机制 答:1）色氨酸是辅阻遏物，和阻遏蛋白结合， 激活阻遏蛋白活性，使阻遏蛋白能够结合到操纵区，对色氨酸操纵基因转录产生抑制作用。即阻遏蛋白＋trp → 有活性的阻遏物＋trp O →不转录。2)有活性的阻遏物和 RNA pol 在P,O重叠区产生竞争性抑制。在高Trp时，会抑制基因转录。无Trp时，阻遏蛋白无活性，阻遏蛋白不能和色氨酸结合，并结合到操纵区，色氨酸操纵基因活化得以表达。 28、弱化机制 答：有三部分组成：1）弱化子转录前导序列的mRNA能形成几种不同的颈环（发夹）结构，其中的一个发夹结构具有典型的转录终止子的结构特征。可导致转录过早终止，这一段核甘酸序列（123-150区）。 2）前导序列:在trp mRNA5'端trpE基因的起始密码前一个长162bp的mRNA片段。包括：1，2发卡2，3发卡3，4发卡 3)前导肽：含有14个氨基酸，内有两个相连的色氨酸 机制：色氨酸含量低时，核糖体翻译前导序列mRNA会延迟在色氨酸密码子上。翻译延迟，转录继续，此时2,3配对，3,4不配对。当色氨酸含量高时，序列3和4配对形 成弱化子，转录终止。 29、阻遏作用与弱化作用的协调 答： 1）、阻遏效率：启动子的转录起始频率在R+和R-相差70倍 当大量Trp 存在时，阻遏系统起作用。阻遏物与之结合，阻止先导mRNA合成。 2）弱化作用 ：少量trp存在时，约有10％的RNA pol侥幸转录 细菌通过弱化作用弥补阻遏作用的不足，因为阻遏作用只能使转录不起始， 对于已经起始的转录，只能通过弱化作用使之中途停下来。阻遏作用的信号是细胞内色氨酸的多少；弱化作用的信号则是细胞内载有色氨酸的tRNA的多少。它通过前导肽的翻译来控制转录的进行，在细菌细胞内这两种作用相辅相成，体现着生物体内周密的调控作用。 30、DNA的忠实性 答：1）遵守严格的剪辑配对规律2）DNA聚合酶在复制时对碱基的正确选择3）对复制过程中出现的错误及时进行校正