DNA的总长度是多少?是太阳-地球之间距离(2.2×109公里)的多少倍? 11.列述DNA双螺旋结构要点,并说明该螺旋模型提出的意义。 12.RNA的功能多样性表现在哪几方面?
13.以克为单位计算从地球延伸到月亮(约320,000km)这么长的双链DNA的重量:已知双链DNA每1000对核苷酸重1×10-18克,每对碱基对长0.34nm。 14.解释为什么双链DNA变性时紫外吸收增加?
参考答案
四、问答题参考答案:
1.答:将DNA的稀盐溶液加热到70~100℃几分钟后,双螺旋结构即发生破坏,氢键断裂,两条链彼此分开,形成无规则线团状,此过程为DNA的热变性,有以下特点:变性温度范围很窄,260nm处的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性丧失。Tm值代表核酸的变性温度(熔解温度、熔点)。在数值上等于DNA变性时摩尔磷消光值(紫外吸收)达到最大变化值半数时所对应的温度。 2.答: (2.5×107/650) × 0.34 = 1.3× 104nm = 13μm。 3. 答:(5ˊ)GCGCAATATTTTGAGAAATATTGCGC-3ˊ,含有回文序列;单链内可形成发卡结构;双链可形成十字结构。
4.答:在稳定的DNA双螺旋中,碱基堆积力和碱基配对氢键在维系分子立体结构方 面起主要作用。
5. 答:一个DNA含量为32%A、32%T、18%G和18%C,另一个为17%A、17%T、33%G和33%C,均为双链DNA。前一种取自温泉的细菌,后一种取自嗜热菌,因为其G-C含量高,变性温度高因而在高温下更稳定。
6.答:tRNA的二级结构为三叶草结构。其结构特征为: (1)tRNA的二级结构由四臂、四环组成。已配对的片断称为臂,未配对的片断称为环。 (2)叶柄是氨基酸臂。其上含有CCA-OH3’,此结构是接受氨基酸的位置。
(3)氨基酸臂对面是反密码子环。在它的中部含有三个相邻碱基组成的反密码子,可与mRNA上的密码子相互识别。 (4)左环是二氢尿嘧啶环(D环),它与氨基酰-tRNA合成酶的结合有关。 (5)右环是假尿嘧啶环(TψC环),它与核糖体的结合有关。
(6)在反密码子与假尿嘧啶环之间的是可变环,它的大小决定着tRNA分子大小。 7.答:(1)阳离子的存在可中和DNA中带负电荷的磷酸基团,减弱DNA链间的静电
作用,促进DNA的复性;
(2)低于Tm的温度可以促进DNA复性;
(3)DNA链浓度增高可以加快互补链随机碰撞的速度、机会,从而促进DNA复性。 8.答:(1) (3×105/618×10)×3.4=165.0 (nm)
(2) 3×105/618×10=48.5(圈)
9.答:mRNA:信使RNA,它将DNA上的遗传信息转录下来,携带到核糖体上,在那里以密码的方式控制蛋白质分子中氨基酸的排列顺序,作为蛋白质合成的直接模板;
与蛋白质共同形成核糖体,核糖体不仅是蛋白质合成的场所,rRNA是核糖体RNA,
还协助或参与了蛋白质合成的起始与转肽反应;
tRNA是转运RNA,与合成蛋白质所需要的单体:氨基酸形成复合物,将氨基酸转运到核糖体中mRNA的特定位置上。 10.答:(1)每个体细胞的DNA的总长度为:
6.4×109×0.34nm = 2.176×109 nm= 2.176m (2)人体内所有体细胞的DNA的总长度为:
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2.176m×1014 = 2.176×1011km
(3)这个长度与太阳-地球之间距离(2.2×109公里)相比为:
2.176×1011/2.2×109 = 99倍
11.答: DNA双螺旋的结构特点有:
(1)两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互相缠绕形成右手螺旋;
(2)每圈螺旋由10对碱基组成,双螺旋的直径为2nm,碱基堆积距离为 0.34nm,两核苷酸之间的夹角是36°;
(3)碱基位于结构的内侧,而亲水的戊糖-磷酸主链位于螺旋的外侧,通过磷酸二酯 键相连,形成螺旋的骨架;
(4)碱基平面与轴垂直,糖环平面则与轴平行,双螺旋结构表面有两条螺形沟,一大 一小;
(5)碱基按A=T,G≡C配对互补,彼此以氢键相连。
该螺旋提出的意义:直接揭示了遗传信息的传递机制,引发了人类对生物遗传性了解的一场革命。
12.答:RNA的功能多样性表现于:
(1) 控制蛋白质的生物合成:有三种RNA 参与了蛋白质的合成:
rRNA:构成核糖体是蛋白质的合成场所;
tRNA:在蛋白质合成过程中携带氨基酸参与蛋白质的合成, 是将mRNA的核苷顺序
翻译成蛋白质的氨基酸顺序的“适配器分子”;
mRNA:是蛋白质合成的模板,指导蛋白质的合成。 (2) 作用于RNA转录后的加工:snRNA。 (3) 生物催化:核酶具有催化功能。
(4) 与遗传信息的加工与进化有关,asRNA。 (5) 病毒RNA是遗传信息的携带者。 13.答:该DNA的碱基对数=320,000×1012/0.34=9.4×1017bp 该DNA的重量=9.4×1013×1×10-18=9.4×10-4(g)
14.答:DNA 分子中碱基上的共轭双键使 DNA 分子具有吸收260 nm 紫外光的特性, 在 DNA 双螺旋结构中碱基藏 入螺旋内侧,紫外吸收较弱。变性时 DNA 双螺旋解开, 于是碱基外露,更有利于紫外吸收,故而产生增色效应。
03 酶化学
一、填空题
1.酶具有 、 、 和 等催化特点。 2.丙二酸和戊二酸都是琥珀酸脱氢酶的 抑制剂。
3.与酶催化的高效率有关的因素有 、 、 、 、 等。
4.常用的化学修饰剂DFP可以修饰 残基,TPCK常用于修饰 残基。 5.酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk作图法),得到的直线在横轴上的截距为 ,纵轴上的截距为 。
6.磺胺类药物可以抑制 ,从而抑制细菌生长繁殖。
7.pH值影响酶活力的机制是:影响 ,影响 , 从而影响 。
8.脲酶只作用于尿素,而不作用于其他任何底物,因此它具有 专一性;甘油激 酶可以催化甘油磷酸化,仅生成甘油-1-磷酸一种底物,因此它具有 专一性。
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9.判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的 和 。
10.全酶由 和 组成,在催化反应时,其中 决定酶的专一性和高效率, 起传递电子、原子或化学基团的作用。
11.酶的活性中心包括 和 两个功能部位,其中 直接与底物结 合,决定酶的专一性, 是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。
12.酶活力是指 ,一般用 表示。
13.通常讨论酶促反应的反应速度时,指的是反应的初速度,即 时测得 的反应速度。
14.根据国际系统分类法,所有的酶按所催化的化学反应的性质可分为六类 、 、 、 、 和 。
15.测定酶活力时,通常控制在酶的 、 、 下进行。 16.酶活性受到多种因素的调节控制,最常见的调节方式有 与 调节。
二、选择题
1.酶具有高度催化能力的原因是:
A.酶能降低反应的活化能 B.酶能催化热力学上不能进行的反应 C.酶能改变化学反应的平衡点 D.酶能提高反应物分子的活化能 2.酶促反应中决定酶专一性的部分是:
A. 酶蛋白 B. 底物 C.辅酶或辅基 D. 催化基团 4. 假定一种酶只有当某一特定的组氨酸残基侧链未被质子化时,酶分子才具有活性,降低pH对于该酶会发生下列哪一种类型的抑制作用?
A.反竞争性 B.非竞争性 C.竞争性 D.混合型 5.磺胺药物治病的原理是:
A. 直接杀死细菌 B. 细菌生长所需的二氢叶酸合成酶的竞争性抑制剂 C. 分解细菌的分泌物 D.细菌生长某必需酶的非竞争性抑制剂 6. 有机磷农药作为酶的抑制剂是作用于酶活性中心的: A. 巯基 B. 羟基 C. 羧基 D. 咪唑基 7.酶原激活的实质是:
A.激活剂与酶结合使酶激活 B.酶蛋白的变构效应 C.酶原分子一级结构发生改变从而形成或暴露出酶的活性中心 D.酶原分子的空间构象发生了变化而一级结构不变 8. 蛋白酶是一种:
A.水解酶 B. 合成酶 C. 裂解酶 D.酶的蛋白质部分
9. 酶反应速度对底物浓度作图,当底物浓度达到一定程度时,得到的是零级反应,对此最恰当的解释是:
A.酶与形变底物产生不可逆结合 B.酶与未形变底物形成复合物
C.酶的活性部位为底物所饱和 D.过多底物与酶发生不利于催化反应的结合 10.酶的活性中心是指:
A.酶分子上含有必需基团的肽段 B.酶分子与底物结合的部位
C.酶分子与辅酶结合的部位 D.酶分子发挥催化作用的关键性结构区 11.竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列那种因素无关:
A.作用时间 B.抑制剂浓度 C.底物浓度 D.酶与抑制剂的亲和力的大小 E.酶与底物的亲和力的大小
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12.哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度:
A.不可逆抑制作用 B.竞争性可逆抑制作用 C.非竞争性可逆抑制作用 D.反竞争性可逆抑制作用 13.竞争性抑制剂作用特点是:
A.与酶的底物竞争激活剂 B.与酶的底物竞争酶的活性中心 C.与酶的底物竞争酶的辅基 D.与酶的底物竞争酶的必需基团; 15.酶催化作用对能量的影响在于:
A.降低活化能 B.增加活化能 C.降低反应物能量水平 D.降低反应的自由能 14.酶的竞争性可逆抑制剂可以使:
A.Vmax减小,Km减小 B.Vmax增加,Km增加
C.Vmax不变,Km增加 D.Vmax不变,Km减小
15.在生理pH7.0条件下,下列哪种基团既可以作为H+的受体,也可以作为H+的供体:
A.His的咪唑基 B.Lys的ε氨基 C.Arg的胍基 D.Cys的巯基 16.对于下列哪种抑制作用,抑制程度为50%时,[I]=Ki :
A.不可逆抑制作用 B.竞争性可逆抑制作用
C.非竞争性可逆抑制作用 D.反竞争性可逆抑制作用 17.下列常见抑制剂中,除哪个外都是不可逆抑制剂:
A 有机磷化合物 B 有机汞化合物 C 有机砷化合物 D 磺胺类药物 18.酶的活化和去活化循环中,酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残 基上:
A.天冬氨酸 B.脯氨酸 C.赖氨酸 D.丝氨酸 三、判断题
( )1.酶的最适温度与酶的作用时间有关,作用时间长,则最适温度高,作用时间短, 则最适温度低。
( )2.测定酶活力时,底物浓度不必大于酶浓度。
( )3.测定酶活力时,一般测定产物生成量比测定底物消耗量更为准确。
( )4.某些调节酶的V-[S]的S形曲线表明,酶与少量底物的结合增加了酶对后续底 物分子的亲和力。
( )5.当底物处于饱和水平时,酶促反应的速度与酶浓度成正比。
( )6.某些酶的Km由于代谢产物存在而发生改变,而这些代谢产物在结构上与底物 无关。
( )7.在非竞争性抑制剂存在下,加入足量的底物,酶促的反应能够达到正常Vmax。 ( )8.碘乙酸因可与活性中心-SH以共价键结合而抑制巯基酶,而使糖酵解途径受阻。 ( )9.酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。
9.对:检查酶的含量及存在,不能直接用重量或体积来表示,常用它催化某一特定反应的能力来表示,即用酶的活力来表示,因此酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。 ( )10.从鼠脑分离的己糖激酶作用于葡萄糖时Km=6×10-6mol/L作用于果糖时 Km=2×10-3mol/L,则己糖激酶对果糖的亲和力更高。
( )11.Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶浓度无关 ( )12.Km是酶的特征常数,在任何条件下,Km是常数。
( )13.Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶的底物无关。 ( )14.酶可以促成化学反应向正反应方向转移。 ( )15.酶促反应的初速度与底物浓度无关。 ( )16.一种酶有几种底物就有几种Km值。
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( )17.当[S]>>Km时, V趋向于Vmax,此时只有通过增加[E]来增加V。 ( )18.酶的最适pH值是一个常数,每一种酶只有一个确定的最适pH值。 ( )19.酶只能改变化学反应的活化能而不能改变化学反应的平衡常数。
( )20.金属离子作为酶的激活剂,有的可以相互取代,有的可以相互拮抗。 ( )21.增加不可逆抑制剂的浓度,可以实现酶活性的完全抑制。 ( )22.酶反应的最适pH值只取决于酶蛋白本身的结构。 四、问答题
1.简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其特性? 2.在很多酶的活性中心均有His残基参与,请解释? 3.怎样证明酶是蛋白质?
4.对活细胞的实验测定表明,酶的底物浓度通常就在这种底物的Km值附近,请解释其生理意义?为什么底物浓度不是大大高于Km或大大低于Km呢? 5.为什么蚕豆必须煮熟后食用,否则容易引起不适?
6.新掰下的玉米的甜味是由于玉米粒中的糖浓度高。可是掰下的玉米贮存几天后就不那么甜了,因为50%糖已经转化为淀粉了。如果将新鲜玉米去掉外皮后浸入沸水几分钟,然后于冷水中冷却,储存在冰箱中可保持其甜味。这是什么道理? 7.由酶总浓度特定的某一酶促反应S→P中,得到下表数据, [S] mol/L V(μmol/L.min) 6.25×10-6 7.50×10-5 1.00×10-4 1.00×10-3 1.00×10-2 1.00×10-1 1.00 15.0 56.3 60.0 74.9 75.0 75.0 75.0 求:(1)Vmax和Km;(2)为什么当 [S]≥1.0×10-2mol/L时,V为常数?(3) [S]=0.1mol/L时,游离酶浓度[E]是多少?(4)当[S]=2.5×10-5mol/L.min 时,求反应前5分钟内生成产物的总mol数。(5)当[Et]增加一倍时,Vmax与Km各是多少?
8.试述温度、pH对酶促反应速度的影响及其影响机理。 9.什么是酶的专一性?酶的专一性分几类?举例说明。 10.比较酶的三种可逆抑制作用的作用特点。
参考答案
四、问答题 1.答:(1)共性:用量少而催化效率高;仅能改变化学反应的速度,不改变化学反应
的平衡点,酶本身在化学反应前后也不改变;可降低化学反应的活化能。
(2)特性:酶作为生物催化剂的特点是催化效率更高,具有高度的专一性,因容易失
活而具有反应条件温和性,活力可调节控制并与辅助因子有关。
2.答:酶蛋白分子中组氨酸的侧链咪唑基pK值为6.0~7.0,在生理条件下,一半解离,一半不解离,因此既可以作为质子供体(不解离部分),又可以作为质子受体(解离部
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