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咽拭子DNA快速提取试剂盒使用说明书?
预期用途?
本试剂盒可用于提取咽拭子样本中人上皮细胞、细菌和真菌的DNA。本试剂盒提供的裂解液能快速有效裂解细胞,裂解产物能够直接用于PCR扩增,并且灵敏度高,特异性强,省去了繁琐的核酸提取与纯化步骤,实现快速PCR检测。对于病原微生物检测,流行病学调查、菌群调查及其它一些以口腔微生物为样本的核酸检测都非常适用。?
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组成成分?
咽拭子DNA快速提取试剂盒?
货号?MKNJGNSWDL007?
规格?25?tests?FastLyse?L1?
5?ml?
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储存条件?
‐20?C储存。?
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样本要求?
用专用采样拭子,适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位,应避免触及舌部;迅速将拭子放采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封,以防干燥。?
*以上标本可立即用于测试,也可放置在‐20℃条件下长期保存。?
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操作步骤?
1. 待检拭子样本直接置于200?μl?FastLyse?L1中,充分搅拌洗脱拭子上的样本,在管壁挤压数次后弃拭子;?
仅供试用?
2. 吹打混匀,95?℃孵育5?min;?
3. 孵育后的样本12,?000?rpm离心2~3?min,上清可直接用于PCR扩增,上清如不立即使用,需置于‐20℃长期保存。?
*推荐使用咽拭子DNA快速提取扩增试剂盒(荧光PCR法),货号MKNJGNSWDLAQP008。??注意:?
离心后的上清加入PCR反应体系的量不宜超过总体积的5%。如偏好较小体积的反应体系,可将裂解产物稀释5倍或10倍后用作模板;?
?实验示例?
咽拭子DNA提取以及GAPDH基因和口腔链球菌属16S?rDNA荧光PCR检测?
取人口腔拭子,按照说明书进行DNA提取,并使用咽拭子DNA快速提取扩增试剂盒(荧光PCR法)(货号MKNJGNSWDLAQP008)中的2×qPCR?Mix?1制备如下PCR反应体系:?
?裂解产物?2?μl?2×qPCR?Mix?1?25?μl?Primer?F?(10?μM)?1?μl?Primer?R?(10?μM)?1?μl?Probe?(10?μM)?0.5?μl?H2O?20.5?μl?
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扩增反应结果如下图:?
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注意事项?
1、 为了避免样本中任何潜在的生物危险,检测
样品应视为具有传染性物质。操作者应穿上实验服,佩戴乳胶手套,并避免样本接触到皮肤和粘膜;样本的处理建议在可防止气雾外流的生物安全柜中操作。?
2、 如样本中扩增反应抑制物较多时,可将裂解
后的上清稀释5倍作为模板,进行PCR扩增。?3、 实验完毕用1%的次氯酸钠或75%酒精处理
工作台和移液器。?????
MOKOBIO?BIOTECHNOLOGY?R&D?CENTER?INC.NC.?
Building?#7‐?Room?701‐703,?104?T.W.?
Alexander?Drive,?Research?Triangle?Park,?Durham,?NC?27709,?USA?P.O.?Box?14533?
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