南农博士生化真题(2)

2019-04-05 13:58

子开始转录。

类固醇激素受体有对立的DNA结合和激素集合结构域。各种类固醇受体DNA结合域的中心结构很相近,各种受体的N-末端区同源性低,该区含转录所需的另一些区域。C-末端与激素结合。不同激素受体C-末端区不同,从而决定了不同激素有不同的活性。如果将糖皮质激素受体C-末端删除,保留的蛋白质具有组成型活性,即不需要类固醇激素就要活性。这表明,类固醇激素的缺乏,其受体的类固醇结合域阻止受体识别GRE,从而起内在负调控物的作用。加入类固醇激素能消除其抑制作用,是受体能与GRE结合,激活转录。而雌激素受体的结构域间的关系与此不同。具有激活活性,不是阻抑活性。每种受体识别的应答元件很保守,这些应答元件有明显的特点:每个共有序列都含有两个短的重复序列,每个重复序列也可称为半位点。各种受体的应答元件也可能是反向或者正向重复序列。

受体超家族可分为:糖皮质激素受体(GR),盐皮质激素(Mineralcorticoid)受体(MR)雄激素受体(AR),孕酮受体(PR),它们都以相同亚基组成二聚体,所识别的元件的半位点有共有序列TGTTCT,半位点反向重复排列,位点间间隔决定其识别元件的类型。第二类:甲状腺素受体(T3R),维生素D受体(VDR),视黄酸受体(RAR)及9-顺-视黄酸受体(RXR)。除RXR外由不同两个亚基构成二聚体,所识别的元件的半位点序列是TGACCT,半位点是直接重复排列,识别特异性由半位点间间隔序列长度决定,1bp对应RXR,2bp对应VDR,3bp对应T3R,4bp对应RAR。

6.说明Ca2+在细胞信号转导系统中的作用。

2006年试题

一、名词解释

1. Lineweaver-Burk plot

Telomerase:端粒酶 PrP c

Ampholyte

Recognition helix:螺旋-转折-螺旋基序,两段螺旋被一个?-转角分开,其中一段为识别螺旋,直接与暴露在DNA大沟中碱基对接触结合,识别和结合的作用力包括氢键,离子键,范德华力等。识别螺旋只有几圈,圈数有三种情况,1圈螺旋,与DNA大沟垂直,2圈螺旋以广泛的角度与DNA大沟结合,3圈螺旋,与DNA大沟平行。其氨基酸残基可分三类:与DNA碱基接触的残基,主要是极性氨基酸;与DNA主链磷酸集团接触的残基,大多为碱性氨基酸;与蛋白质其他部分接触的残基,多为疏水性氨基酸残基。

二、问答题

1. 结构分析显示,腺苷酸环化酶与DNA聚合酶有很高的同源性,从它们的催化反应

性质你能提供进一步证据吗?

AC是一种跨膜糖蛋白,其激活或抑制需要GTP和镁离子的存在,由五部分组成,Rs,Ri,C,Gs,Gi

2. 把正在37℃条件下培养细菌转移到25℃培养。你认为细菌质膜中脂肪酸组成将会

发生怎样的变化,请予解释

3. 有人向动物注射用生长激素受体的胞外部分制备的抗体,发现也具有生长激素是效

应。为什么?

2. 3. 4. 5.

生长激素受体的胞外部分制备的抗体与动物体中的生长激素能形成抗原抗体复合物,使机体中生长激素水平下降,刺激脑垂体分泌大量的生长激素。

4. 下表记录了某酶的分离纯化过程,请填写表格中的空格,并对结果进行分析评价 纯化过程 粗提物 硫酸铵沉淀 总蛋白(mg) 20000 5000 总活性(单位) 比活性(单位/mg) 纯度 得率 200 1 100 4,000,000 3,000,000 1,000,000 750,000 675,000 600 666 1500 1500 DEAE-纤维素层析 1500 500 分子筛层析 亲和层析 45 5. Tm是核酸研究中普遍采用的物理参数。Tm值受哪些因素的影响?DNA复性的速度又受哪些因素的影响

热变性一般发生在较窄的温度范围内发生,如以温度对紫外吸收作图,可得一S曲线,称熔解曲线,Tm是熔解曲线的中点,称熔点,熔解温度或转变温度。

离子强度低时,Tm值偏低,熔点范围较窄,离子强度高时,Tm值升高,熔点范围宽。DNA的Tm值一般在70-85度间。

DNA碱基组成的均一性,如果DNA分子组成十分均一,如由两条多聚A-T或多聚G-C组成的双链,其变性过程是同步的Tm范围较窄,表现为一条很陡的熔解曲线,反之,非均一性DNA分子,则Tm值围较宽。

DNA分子中G+C含量,G-C含量高时,稳定,因为G-C间有三个氢键,A-T中只有两个氢键,故G-C含量高的DNA,Tm值也较高,亦较稳定。

去除变性因素后,变性的DNA两条互补链可以重新结合起来,恢复到原来的双螺旋结构,此过程称DNA复性(DNA renaturation)或退火(Aennealing。)在一定条件下复性的速度变化可以用Cot值衡量,表示变性DNA最初浓度(bp,mol/l),t为复性时间(秒)。即变性DNA最初浓度与复性时间的乘积。相同的分子越多,复性越容易,Cot值越小。简单序列的DNA分子复性很快,时间短;同一种DNA,当浓度大时,互补序列互相碰撞的机会增多,复性速度也快;DNA片段大时,扩散速度受限制,复性速度变快,加热变性,如果缓慢冷却,两条链可得到特异组合,恢复成双链。

6. 有一个8肽序列为Ala-Val-Trp-Arg-Val-Lys-Ser。用胰蛋白酶水解之后,你选择用分子

筛色谱,还是离子交换色谱来分离其水解产物,说明理由,如果用胰凝乳酶水解,其产物用哪种方法分离更好,为什么?

7. 举例并简述原核生物通过影响新生mRNA的二级结构调节基因转录的机制

8. 在动物(大鼠)的饥饿实验中,观察到三种“燃料”分子(A、B和C)在血浆中的

浓度变化如图所示。它们可能是什么物质?解释它们在动物饥饿状况下的相互关系 A酮体,B血糖,C脂肪酸。(P455)


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