实验三 血液和肌组织(2课时)
一、实验目的和内容
1.学习掌握人血涂片制作和染色的方法 2.识别并比较各种血细胞和血小板的形态特征
3.观察了解平滑肌、骨骼肌和心肌三种肌纤维纵切和横切 的结构特点 二、实验材料和用具
1.试剂:75%乙醇溶液、瑞特染液、缓冲液、蒸馏水 2.用具:载玻片、盖玻片、消毒棉、刺血针、油镜用油、显
微镜
3.玻片:平滑肌或小肠横切片(H-E染色)、骨骼肌纵切和横
切片(H-E染色、苏木精染色)、心肌切片(铁苏木精染色) 三、实验操作过程
(一)血涂片的制作与观察:
1. 消毒和采血:①.消毒 ②.采血:耳垂或手指
2. 涂片: 将流出的第二滴血蘸滴在一干净的载玻片右端→迅速用另一载玻片推片(角度30°—40°角),厚片适于观察
3. 染色:在标本选定的区域滴加瑞特染液,静置10-15min,清水冲洗,待观察 4. 涂片观察 ①.红细胞
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②.血小板 ③.白细胞:
a.嗜中性粒细胞:核紫色、分叶;叶间有染色质丝相连。 b.嗜酸性粒细胞:少。胞质有红色颗粒;核紫色、两叶。c.嗜碱性粒细胞:胞质染成紫色颗粒;极少。
d.淋巴细胞:较多。胞核圆形、一侧常有小陷窝;胞质较少,围在核周围,被染成天蓝色。 操作流程:
揉搓手指或耳垂
冲片
推片
消毒
角度在30°-40°之间
采血
滴加瑞氏染液
擦掉第一滴
第二滴血蘸于载玻片
蒸馏水
静置10-15min
自然干燥
观察
(二)玻片观察
1. 平滑肌分离装片的观察 2. 猫的小肠横切片观察
3. 骨骼肌的纵切、横切(苏木精染色)观察 4. 心肌(铁苏木精染色)观察 四、作业
1.光镜下如何辨认三种肌组织? 2.绘一张骨骼肌肌纤维纵切面图。 3.光镜下如何区分各种血细胞?
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实验四 神经组织(2课时)
一、实验目的和内容
1.学习神经元涂片的制作方法
2.掌握神经组织的组成特点。了解神经元和神经胶质细胞的
结构和功能特点、种类和分类依据。了解尼氏体和神经原纤维结构、功能和分布特点。
3.联系功能观察突触、有髓纤维、运动终板、环层小体、触
觉小体的形状结构和特点。 二、实验材料和用具 1. 新鲜的猪脊髓
2. 装片:猪的脊髓横切、肠系膜、兔的坐骨神经纵切和横切片。
3. 试剂:载玻片、盖玻片、解剖器、显微镜 三、实验操作
(一)神经元涂片制作与观察: 1.神经元涂片制作流程:
取新鲜猪脊髓灰质前角少许
1-2min
待干后
置于载玻片上
2-3min染色
+95%乙醇固定
+0.1%次甲基蓝水溶液
待观察
清水冲洗 甘油封片
2.低倍镜下观察的结构:神经元(蓝色)
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3.高倍镜下观察的结构:
(1)细胞核(染色较浅)、核仁(浅蓝色) (2)尼氏体:嗜碱性的不规则的颗粒或深蓝色小块 (注:电镜下尼氏体是由平行排列的内质网和游离的核 体构成的。主要功能是合成蛋白质、复制细胞器、产生 神经递质有关的蛋白质和酶。) (3)轴丘和轴突:两结构中均无尼氏体 (二)运动终板玻片标本的观察 1.低倍镜观察:
(1)骨骼肌纤维:多呈蓝色,少有紫红色,肌原纤维的横 纹清晰可见。
(2)神经核神经纤维:黑色。神经纤维末端呈爪状分支。 2.高倍镜观察:可见运动终板的爪状分支末端呈纽扣状膨大。 (三)猫的脊髓横切观察
1.低倍镜观察:灰质前角有多角形有突起的多级神经元。 2.高倍镜观察:
(1)神经原纤维:在神经元胞体和突起内,棕褐色细丝状结 构。
(2)终扣:胞体或树突上的黑色小圈状或扣环状结构,是形 成突触的结构。
(四)环层小体的观察:(猫的肠系膜切片纵横切) 1.低倍镜观察:纵切面上为卵圆形,可见:
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(1)内柱(环层小体中心的一棍状结构)
(2)被囊:在内柱外周的多层扁平结缔组织细胞形成的同心 板层结构。 (五)触觉小体的观察
1.肉眼观察:表皮层、真皮层。触觉小体位于真皮的乳头 层,形状为卵圆形。
2.低倍镜观察:与表皮垂直排列的卵圆形触觉小体。 3.高倍镜观察:
(1)被膜:在触觉小体外的结缔组织薄膜。 (2)扁平细胞:在被膜之中横列的细胞。 (3)神经:呈黑色,盘曲在触觉小体内。 四、作业
1.绘一神经元的结构图。
2.解释神经、神经纤维、神经原纤维、神经末梢、感受器和 效应器的概念。
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