SBA-90生物传感分析仪使用说明书 - 图文(2)

2019-04-09 11:54

二、反应池系统

反应池系统由有机玻璃反应池、进样开关、电极、搅拌电机等组成,右图上部黑色圆柱体为进样开关,中间为进样孔。下部为搅拌系统,搅拌电机安装于黑色支架下面。反应池二侧是2个酶电极,白色螺母是电极的固定螺丝。更换酶膜时只要拧下这个螺母即可卸下电极。

进样开关是一个红外光控开关,进样时,将进样针从进样孔插入,当进样针插到底部时,进样开关的光路断开,仪器即探测到进样动作。

试样用微量进样针注入反应池后,因为反应池的搅拌作用,样品随后被快速混匀,进入固定化酶传感器内部,产生酶促反应。

1 2 3

4 5

图4:反应池系统

1、进样口 2、进样开关 3、电极固定螺母

4、电极 5、搅拌子

三、固定化酶膜

固定化酶膜是分析仪工作的关键部件,它是一个多层膜结构,其切面结构如下图所示,酶膜装到电极后,其内膜和固定化酶层与电极表面紧贴在一起。O型橡胶圈使酶膜容易运送、装配,并确保流动反应池的密封

图5:固定化酶传感器剖面与安装示意图

内膜层 固定化酶层 电极表面 支撑微孔膜 O型橡胶圈 第二节 仪器的二次仪表

仪器的二次仪表部分由前置放大、AD转换、CPU数据处理及数据显示与打印等电路组成,其结构组成如下图所示,使用者对此仅有一般了解即可。详细电路图见附件。

键盘 时钟与数据液晶 储存DS1644 显示器 — 5 — 电源监控 看门狗CSI1161

电极1 电极2 电极3 电极4

前置+AD1 前置+AD2 前置+A/D3 前置+A/D4 主控制 P89V51RC 传感器 (缓冲液、 进样开关) RS232 接口 图6: 仪器电路控制系统框图

第三章 分析仪配套的试剂盒 第一节 酶膜的贮运说明

酶膜圈是分析仪关键传感器的一部份:SBA专用酶膜圈的结构见图4。 ? 贮存、运送过程中保持0-8℃,并注意贮存期限。

? 使用中酶膜活性是缓慢地逐渐下降的,当活性下降到对标准液响应电压为50.0mV以下,建议更换酶膜,即使酶活不太低,但如酶活不稳定,测定误差大,也需更换酶膜,SBA-90分析仪在换膜时可自动记录酶膜的安装时间,第一次定标时间和定标酶活性,最后一次定标时间和定标酶活性,第一次校线性时间和线性值,最后一次校线性时间和线性值,可以随时从显示菜单的通道信息项中查询酶膜安装时间及其活性与线性相关信息。

第二节 酶膜的参数

? 酶膜的活性:,因为SBA-90分析仪内建有温度补偿系统,不便直接测定电极的响

应电流,酶活性以定标过程中,过氧化氢电极前置放大器的响应电压表示。这个电压不同种类的酶膜有差别,一般均在100mV以上。 酶膜在其使用期内的表观活性变化(由酶活和电极表面状态共同决定)是有一定规律的:刚装上膜后,活性迅速上升,达到一定值后,活性上升越来越慢,直到稳定。这是酶膜活性的前期,约需数小时,这个阶段膜上的固定化酶层充分吸水,由固态变成充分膨胀的凝胶状态,固定化酶层对底物和小分子的通透性趋向于越来越好。这个阶段分析仪也能工作,但是由于酶膜活性有变化,因此需要在测定过程中增加定标校正次数。

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酶膜在装机后24小时内可能活性变化较大,以后活性变化趋向缓慢,在短期内很难察觉,这是理想的工作期,一般可持续半月以上,不同酶膜有差别,有的可以持续一个月以上,甚至达到数月。

酶膜的活性与操作、运送、保养条件有关,下列的不当操作可以造成酶膜失活: 1. 运送和贮存温度高于8℃ 。

2. 进样的样品中含有过量的酸或碱,没有进行中和处理。 3. 不用SBA-缓冲液进行分析操作。

4. 由于缓冲液用尽、泵管破裂、或接口漏气等原因造成酶膜长时间失水。 ? 酶膜的线性:理想的酶膜应对被测物质在测定浓度范围内具有良好的线性响应,但

实际上,由于酶促反应的非线性,很难保证完全的线性响应,由酶的米氏动力学反应方程可知,在小于标样浓度的范围内,当浓度为标样的1/2时,测定中可能具有最大的误差,当测定对象的浓度低于标样浓度时,可选择标样浓度的1/2来作线性校正,当测定对象的浓度经常高于标样浓度,也可选择2倍标样浓度来校线线。SBA-90分析仪把校线性点的测定值与标样浓度的比值定义为酶膜的线性。根据米氏动力学方程可知,当标样浓度1/2作校线性点时,膜的线性应略大于50%,而用2倍标样浓度校线性时,则膜的线性略应小于200%。

SBA-90分析仪可以通过“设置|项目参数|线性校正”菜单开关线性校正功能,并选择仪器的线性校正类型,新酶膜一般不需要作线性校正,酶膜的线性随着酶膜的使用而逐渐变坏,不同种类的酶膜线性情况也不一样,如检查发现酶膜线性不好,可以通过设置菜单,启用线性校正,仪器会在定标通过后提示进行线性校正。酶膜的线性的变化是非常慢的,SBA-90型分析仪在作线性校正后会自动保存最后一次线性校正参数,除非有更换酶膜或重新设定标样浓度的操作,线性校正参数保持不变,所以对酶膜的线性不需经常校正。每周作1-2次线性校正就足够了。线性校正的间隔时间可以通过“设置|参数|校线性时间”来定义。【当线性校正或二次定标功能开启后,如定标键设定为手动定标时,则按定标键后菜单自动弹出,提示确定定标类型是正常定标、还是线性校正或二次定标。对于正常定标,可以通过按住定标键2秒以上(此时不弹出菜单),直接定标】

? 酶膜的工作寿命:即安装后酶膜连续工作期。有酶膜的有效期内,符合标准运送条

件和工作条件的合格葡萄糖和谷氨酸酶膜应能连续工作30天以上;乳酸酶膜的连续工作寿命为15-30天。

? 在4℃的贮存条件下,葡萄糖、谷氨酸酶膜有效期为12个月。乳酸酶膜的9个月。

下表为常用酶膜的质量标准:

表3:常用酶膜的质量标准

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酶活性 对于100mg/100ml谷氨酸,葡萄糖,50mg/100ml乳酸的标样,前置输出电压为:标样谷氨酸、乳酸>250mV, 葡萄糖>125mV。 在低于标样浓度下,各点偏差小于±2%标样。 其中:葡萄糖不需要进行线性校正,谷氨酸、乳酸使用后期需要进行线性校正 线性 响应 工作期 贮存期 达最大反应速度小于20秒 30天 乳酸9个月, 葡萄糖、谷氨酸12个月 贮存、运送条件 0-8℃,不符合此条件的酶膜不能保证正常质量。 第三节 缓冲剂

缓冲剂是为保护酶膜并创造酶反应最适条件的专用辅助材料,含有抗菌素、防霉剂、络合剂等成份,详见下表,缓冲剂要用蒸馏水配制。

大包缓冲剂每包可配制5000ml。 配制时在一个5升的容器内倒入一包缓冲剂, 加蒸馏水溶解。完全溶解(常温一般需8小时以上)后再倒入仪器的缓冲液瓶内使用。袋装缓冲剂在常温下贮存,有效期1年。溶解后可保藏一个月。

小包缓冲剂成分相同每包可配制500 ml。

表4: 缓冲剂成分及其作用 试剂名称 磷酸氢二钠 磷酸二氢钠 EDTA二钠盐 苯甲酸钠盐 硫酸庆大霉素 氯化钠

作用 维持恒定的pH,提供一定的离子强度 维持恒定的pH,提供一定的离子强度 络合使酶失活的二价阳离子 抗霉剂 抗菌剂 与电极电解质平衡 第四节 标准液

? SBA血糖、血乳酸专用:200mg/100ml葡萄糖、100mg/100ml L-乳酸混合标准液、

100mg/100ml葡萄糖、50mg/100mlL-乳酸混合标准液。 ? SBA三合一标准液:100mg/100ml谷氨酸、100mg/100ml葡萄糖、50mg/100mlL-乳

酸混合标准液。 ? dl=100ml (仪器面板显示单位为dl) 。

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SBA-系列标准液与SBA-仪器配套使用:在有效应用期内不会霉变和长菌。在密封状态下,常温可保藏1个月,冰箱内保藏6个月以上,在使用中应防止蒸发和污染。 标准液除用于仪器读数校正,还兼作线性检查。

第四章 仪器的键盘操作和系统参数 第一节 仪器的键盘及显示

本仪器采用点阵液晶显示器,以全中文菜单的方式实现人机交换操作和测定数据的显示,仪器的操作界面如下图如示:

图7: SBA-90显示面板示意图

仪器的点阵液晶显示屏最多可显示3行中文和1行状态,每行可显示12个汉字或24个字母。开关面板有9个按键,分别为:菜单(M)、运行(R)、定标(C)、清洗(W)、输入(E)和上、下、左、右四个方向键。除运行、清洗和定标键外,其它键均与菜单操作有关。其中输入键为多用途键,除菜单操作外,还用于出错重试、报警信息消除和手动打印等。显示屏的最下一行为状态行,显示当前有效按键状态和系统的即时时间。只有在状态行内显示的按键,输入时才有效。如当仪器处于电极平衡过程时,状态行不显示“R”,此时按“运行”键无效。在菜单操作过程中,状态行也不显示“R”。当仪器处于手动打印状态时,仪器完成一次测定后,在状态行显示“E=P”,这时按下输入键,直接打印最后一次测定结果。当仪器显示出错或报警信息时,状态行只显示“E”,这时只有“输入”键有效,按输入键取消显示报警信息,按其它键均不起作用。

第二节 仪器的按键功能

1. 菜单(M):仪器显示屏在非菜单显示状态下,按“菜单”键进入菜单操作,在菜单操作状态下,按“菜单”键退出到上一级菜单,或退出菜单操作,“菜单”键与“输入”键配合,用于菜单功能输入。用“菜单”键退入上一级菜单时不保存更改的数据。

2. 输入(E): 在菜单状态下,“输入”键用于进入选定菜单的下级菜单,或输入当前选定项或输入数据,在进入数据浏览状态下,输入键用于打印当

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