替亚硝酸钠, 用同样配制方法的溶液为空白。在 610nm—450nm之间进行扫描，得到最大吸收波长λmax=545nm。
波长/nm 450 吸光度 460 470 480 490 500 510 520 530 535 0.005 0.008 0.011 0.015 0.021 0.029 0.038 0.046 0.053 0.057 545 550 555 560 570 580 590 600 波长/nm 540 吸光度 0.059 0.059 0.059 0.058 0.056 0.049 0.039 0.026 0.014 实验结果曲线图分析：
图一 最大吸收波长的测定0.0700.0600.0500.0400.0300.0200.0100.000420440460480500520540波长/nm560580600620吸光度吸光度多项式 (吸光度)
实验结果表明：反应生成的紫红色偶氮化合物在450—480nm波长范围内的吸收较小，小于0.020，而在540—550nm波长范围间取得最大吸收波长，在波长为550nm的波长后该偶氮化合物的吸光度又开始下降，故本方法选取545nm为实验中的最大吸收波长。
2) 空白溶液的选择
分别对试剂空白（2.00ml对氨基苯磺酸溶液+2.00mlα-萘胺溶液）、5g氯化钠溶液分别加入50.00ml比色管中加水至刻度，在545nm处进行了吸光度测试。 各种溶液的吸光度测定值
溶液 吸光度A 试剂空白 0.008 氯化钠 0.024 去离子水 0.014 实验结果表明：试剂空白在545nm下的吸光度最低，说明亚硝酸根与α-萘胺试剂的特征显色反应，在545nm波长下光度测定亚硝酸根的方法是合理的，而且该方法具有较好的选择性，实验说明试剂空白和去离子水的吸光度相差不大，对于实验的参比溶液的选择根据实验方便原则选择去离子水为参比溶液。 3）酸度的选取
因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐的反应需要在弱酸条件下反应，实验中分别采用15%、20%、25%的盐酸溶液溶解对氨基苯磺酸，按上述条件测定试样的吸光度，探究酸度对显色反应的影响。 不同酸度对吸光度的影响:
盐酸含量 吸光度A 15% HCl 0.058 ２０％HCl 0.060 25% HCl 0.056 实验结果表明：酸度对显色反应的影响并不是很明显，但是也有可能是因为，反应在稀释时PH值变化不明显导对显色反应的影响不明显。实验中用20%的盐酸溶解对氨基苯磺酸测得的吸光度相对较大，所以选取20%的盐酸溶解对氨基苯磺酸。
3) 显色剂用量的影响
α- 萘胺作为亚硝酸根的显色剂，灵敏度很高，且在反应中显色剂的用量对反应有一定影响，在545nm下，用20%的盐酸溶解对氨基苯磺酸与亚硝酸钠反应，分别加入0.50、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00ml的α- 萘胺溶液进行吸光度的比较。
不同显色剂的用量对吸光度的影响: 显色剂用量0.50 （mL） 吸光度 0.060 0.063 0.063 0.065 0.064 0.065 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 实验结果表明：随着显色剂用量的增加，吸光度逐渐升高，在显色剂用量达到2.00mL时，吸光度又下降，但是在显色剂增加到2.00mL时，吸光度又达到最大值0.065，故本实验选取50mL试液中加入2.0mLα- 萘胺溶液。
4）显色时间的选取
显色时间影响显色反应效果，为防止紫红色重氮偶合物在放置过程中分解，或发生其他反应使吸光度测定结果不准确，本实验将同一份标液，从加入盐酸萘乙二胺试剂溶液时开始计算，分别静置不同时间后测定其吸光度。
不同放置时间对吸光度的影响: 时间（min） 0 5 10 15 20 25
吸光度A 0.060 0.062 0.063 0.065 0.064 0.064 实验结果表明: 刚加入时，因为显色剂还未与反应物完全反应，测得的吸光度明显较低，随着放置时间的加长，显色剂和反应物逐渐反应，吸光度逐渐增加，在放置时间为15分钟是吸光度达到最大值，但是在15分钟后略有下降并且趋于稳定，可能是因为生成物又进一步反应，但是该反应速率较慢，故其吸光度降低但是不明显。故本实验选择显色反应时间为15分钟。 3、亚硝酸钠标准曲线的绘制
① 用移液管精确吸取亚硝酸钠标准液(5.015μg/mL) 0.00，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00，1.50，2.00mL于一组50.00 mL 容量瓶中，各加水至25mL，分别加2.00mL0.4%对氨基苯磺酸溶液，摇匀，静置3—5min 后，各加入2.00mL 0.2%α—萘胺溶液，并用水定容到50.00mL，摇匀。
② 静置15min后，用1cm比色皿，用分光光度计在545nm波长下测定吸光度，以蒸馏水为空白。以测得的各比色液的吸光度对应的亚硝酸浓度作曲线。比色液中亚硝酸钠浓度为0～0.30μg/mL时，两者呈线性关系。 标准溶液测定结果:
本实验中测得的线性相关系数R2 = 0.9998，线性相关性强，实验中配制的标准溶液浓度较准确，实验结果具有一定的可信度。 加入的NaNO2标准溶液浓度的体积 NaNO2标准溶液浓度（ug/mL） 吸光度A
0.008 0.021 0.036 0.051 0.066 0.081 0.119 0.155 0.00 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100 0.150 0.201 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.50 2.00
图二 亚硝酸钠标准曲线0.1800.1600.1400.120y = 0.7394x + 0.0072R = 0.9998吸光度A0.1000.0800.0600.0400.0200.0000.0000.0500.1000.1500.200NaNO2标准溶液浓度（ug/mL）0.250吸光度A线性 (吸光度A)
4、亚硝酸盐的测定
取20mL待测液于25mL容量瓶中，加1mL0.4%对氨基苯磺酸溶液，摇匀。静置3～5分钟后，加入1.0mL 0.2%α—萘胺溶液，定容，摇匀,静置15min。比色测定，记录吸光度。根据标准曲线方程算得相应的亚硝酸钠浓度（μg/mL），计算试样中亚硝酸盐（以亚硝酸钠计）的含量。 五、实验结果与讨论：
1. 本次实验探究结果显示，用紫外分光光度法并以α—萘胺溶液为显色剂测定熏肉中亚硝 酸盐的含量的最佳条件是:最大吸收波长545nm，以20%的盐酸为酸度调节剂（溶液最后PH值约为3-4）比较合适，显色剂用量为每50.00mL试液用2.00mL比较合适，显色时间为15分钟比较合适。由于使用了亚硝酸盐的特效试剂α- 萘胺为显色剂, 成功的避免了实验中其它阴阳离子的影响, 实验能达到较理想的效果。
2. 本次实验中，配制标准溶液得到的标准曲线的线性相关系数R2 = 0.9998，线
性相关性强，故而实验中配制的标准溶液浓度较准确，实验结果具有一定的可信度。
3. 样品中亚硝酸盐含量测定结果
样品
熏肉
质量(g) 吸光度A 未知样亚硝酸盐含量ug/mL 熏肉中亚硝酸盐的含量mg/kg 5.001g 0.030 0.032 4.0 从本次实验来看，实验中所用熏肉的检验结果（亚硝酸盐含量为0.004g/kg）来看符合国家标准及肉制品中亚硝酸盐添加量<0.05g/kg,残留量<0.03g/kg，所以该类熏肉可以放心食用，对市民健康影响不大，但是最好别长期食用，虽然说熏肉中亚硝酸盐含量在国家要求的合理范围内但是长期大量食用，亚硝酸盐在人体内累积仍会对我们的健康有所损害。且本次实验测定结果仅供参考，因为测定的熏肉试样溶液并非无色溶液，而是呈淡黄色，该有色物质可能对亚硝酸盐含量有一定影响，故测定结果的准确性有待进一步研究。 参考文献:
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