培养方式 核酸 核糖体 细菌滤器 对抗生素 对干扰素 无生命培养基 DNA和RNA 有 不能通过 敏感 不敏感 无生命培养基 DNA和RNA 有 不能通过 不敏感 不敏感 严格活细胞内寄生 DNA或RNA 无 能通过 不敏感 敏感 2.简述紫外线的杀菌机制和注意事项(6分)。
紫外线的杀菌机制主要是损伤细菌的DNA构型,干扰DNA的碱基配对,导致细菌死亡或突变。杀菌作用与波长有关,一般波长在240nm~280nm时具有杀菌作用,以265 nm~266 nm杀菌作用最强。 应用紫外线杀菌时应注意:①紫外线的穿透力弱,不能透过玻璃或纸张等,适用于空气和物体表面的消毒;②紫外线对人体皮肤和角膜有一定损伤,应注意个人防护。
3.简述人工自动免疫与人工被动免疫的主要区别(6分) 区别点 免疫物质 免疫出现时间 免疫维持时间 用途 慢,1~4年 长,半年~数年 预防 人工自动免疫 抗原(疫苗、类毒素) 快,立即 短,2~3周 治疗或紧急预防 人工被动免疫 抗体、细胞因子等细胞免疫制剂
4.简述不同的RNA型病毒在宿主细胞内进行基因组复制及mRNA翻译病毒蛋白的过程。(12分)
RNA病毒的生物合成及成熟释放过程因不同的RNA病毒而异,除正粘病毒科和逆转录病毒科病毒需在细胞核内复制基因组外,其余RNA病毒均在细胞质内复制。
(1)单股正链RNA(ssRNA)病毒,包括无包膜的小RNA病毒(如脊髓灰质炎病毒型肝炎病毒等)和有包膜的披膜病毒、冠状病毒等。 ①病毒ssRNA即为mRNA,脱壳后迅速进入宿主细胞质内核蛋白体(ribosome)并编码病毒结构蛋白(衣壳蛋白)和非结构蛋白(RNA聚合酶等)。 ②同时以病毒ssRNA为模板,在宿主细胞依赖RNA的RNA聚合酶作用下,按碱基配对原则(U=A,G≡C,A=U,C≡G),在细胞质光滑内质网内复制±RNA双链中间体,并裂解为-ssRNA模板,继续不断地复制子代ssRNA。 ③ssRNA装配进蛋白衣壳内,构成衣壳体(在无包膜RNA病毒,即为病毒体),细胞自溶,释放出大量子代病毒。
(2)单股负链RNA(-ssRNA)病毒,包括正粘病毒科、副粘病毒科、弹状病毒科和布尼雅病毒科病毒等,均为有包膜的病毒。 ①病毒穿入宿主细胞,脱壳释放出-ssRNA,依-ssRNA为模板,按碱基配对原则,在病毒本身具备的依赖RNA的RNA聚合酶作用下,由细胞提供核苷酸原料,复制±RNA链双股中间体(RI)。 ②RI双股氢键裂解为ssRNA,继续复制子代-SSRNA基因组,同时,ssRNA又作为mRNA编码衣壳蛋白和非结构蛋白。在基因组分节段的病毒(如正粘病毒科流感病毒基因组分为7~8个节段),各个基因节段分别编码出结构蛋白或功能蛋白。在基因组不分节段的病毒(如副粘病毒科麻疹病毒等),则先编码大分子蛋白,再切割为各种结构蛋白(衣壳蛋白、包膜蛋白等)及功能蛋白。-ssRNA基因组复制,除正粘病毒科病毒是在宿主细胞核内进行外,其余-ssRNA病毒复制均在细胞质内进行。
③在细胞质内组装成衣壳体,细胞膜与包膜蛋白共同构成病毒包膜,以出芽生方式释放出病毒体。 (3)逆转录病毒科(retroviridae),包括HIV、人类嗜T细胞病毒(HTLV)等,其基因组为两条相同的正股RNA链。 ①病毒核衣壳穿入宿主细胞(T细胞、巨噬细胞及神经元细胞)并脱壳后,两条ssRNA分别作为模板,以宿主细胞tRNA作引物,在病毒本身的逆转录酶作用下,逆向转录为RNA-DNA杂交中间体,经RNA酶H降解掉RNA链后,其余-ssDNA为模板,又复制出双股(ds)DNA。 ②dsDNA移行至宿主细胞核内,并与核内染色体成整合体,称为前病毒(provirus)。前病毒进而在宿主细胞的RNA多聚酶II作用下,病毒DNA转录为RNA并进入胞浆,其中有些RNA经拼接成mRNA,进而编码病毒的结构蛋白及非结构蛋白。另一些RNA经加帽接尾成为病毒的子代基因组RNA。 ③病毒的衣壳体从细胞膜出芽加装包膜,释放出病毒体到细胞外。 (4)双股RNA(dsRNA)病毒,主要为呼肠孤病毒科(reoviridae)病毒,为双层衣壳无包膜病毒。dsRNA病毒的生物合成均在宿主细胞质内进行,其穿入脱壳及成熟过程和小RNA病毒相似。dsRNA病毒基因组分为10~12个dsRNA节段,每个节段均由病毒本身的依赖RNA的RNA多聚酶转录为mRNA。dsDNA基因组中-ssDNA作为模板复制RNA→再复制-ssRNA,合成dsRNA即子代基因组。
(5)缺陷病毒(defective virus),是一类必须依靠辅助病毒(helper virus)参与,才能复制增殖的病毒,如HDV。缺陷病毒的基因组不完整,必须依靠辅助病毒提供部分结构蛋白或功能蛋白,才能成熟为病毒体,如HDV为有包膜的单股负链闭合环状RNA病毒,但其包膜为HBsAg,由HBV提供,HDV复制过程中的mRNA不能编码包膜蛋白,故HDV必须与HBV共同感染同一宿主肝细胞才能进行HDV复制。
5.简述HIV的复制过程(8分)
HIV病毒体的包膜糖蛋白gPl20刺突与宿主细胞膜上的CD4受体结合,病毒包膜与细胞膜发生融合。核衣壳进入细胞质内脱壳,释放其核酸RNA.在病毒的逆转录酶的作用下,以病毒的RNA为模板,籍宿主细胞的tRNA为引物经逆转录产生互补的负股DNA,构成RNA:DNA杂交体,杂交体中的亲代RNA股被RNA酶H水解,再以负股DNA为模板,产生正股DNA,构为双股DNA链,在DNA两端形成LTR序列,并由胞浆移行到细胞核内。在整合酶的作用下,双链DNA基因组整合进宿主细胞染色体,成为前病毒。当前病毒被激活时,可在宿主细胞的RNA多聚酶II的作用下,转录形成RNA,经加工成为mRNA,一部分转译、切割成病毒的结构蛋白和非结构蛋白,另一部分作为子代病毒的RNA,与结构蛋白装配成核衣壳,并从宿主细胞膜上获得包膜,形成完整的有感染性的子代病毒,最后以出芽的方式释放到细胞外。