（1）玉米秸杆经预处理后，应该选用 酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。 （2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？ （多选）
A．酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌 C．制作酸奶的乳酸菌 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌
（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为 （按功能分），培养
基中的碳源为 。
（4）从生物体提取出的酶首先要检测 ，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的
过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用 技术。 （5）发酵阶段需要的菌种是 酒精时要控制的必要条件是 。 3. 某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制得（1）在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，短肽和氨基酸含量越高。为研究其原因，该小组取适量豆腐乳制成样液，等量加入各试管，进行了以下实验。
实验中，加入双缩脲试剂A后，样液的颜色将 。处理④中，100℃加热的目的是 。
如果处理③与处理④相比，显色较 ，且处理 ③ 与处理 ② 相比，显色较 ，则表明豆腐乳中蛋白质被微生物产生的 分解。最终使短肽和氨基酸等含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。
（2）食用豆腐乳后，其中的氨基酸可以在人体内通过 作用形成新的氨基酸，还可以由氨基酸产生的不含氨部分合成 。
4．有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基
上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。 （2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
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（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能
力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、
和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
5．葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题： （1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥 作用的微生物是 。 （2）该微生物通过无氧呼吸可分解 ， 终产物是 和 。 （3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别
装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是 ，导致发酵中出现的主要异常现象是 。丙同学的错误是 ，导致发酵中出现的主要异常现象是 。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是 、 、 。
（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是 。
6. （1）商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生 ，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间的 表示。 （2）利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图：
Ⅰ中的主要成分为 ；Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶
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的方法及其依据。 （3）为建设基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，
每次循环包括三步： 。反应过程中打开模板DNA双链的方法是 。
(4)除植酸酶外，微生物还应用在 的生产中。）
7.研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。
（1）柚皮易焦糊，宜采用__________ __法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过_______ ____除去其中的固体杂质。-
（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。
（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。用电泳法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子的 、大小及形状不同，在电场中的 不同而实现分离。 （4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。 8.（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑__ ____、___ ___和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、__ ____、____ __等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需进行清洗和___ ___；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能___ _______。 （3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格
操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_____ __。
（4）通常对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_______。
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（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是______ ___。
（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过_____ __处理后才能丢弃，
以防止培养物的扩散。
9.生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
（1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用__ ___、___ __方法从油料作物中提取。 （2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供__ __，培养基灭菌采用的最适方法是__ __法。 （3）测定培养液中微生物数量，可选用__ ___法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测___ ___，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用____ __技术使脂肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可利用耐热DNA聚合酶催化的____ _技术。
10．为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果，将一种无酶洗衣粉分成3等份，进行3组实验。甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍，其他实验条件均相同，下表为实验记录。请回答下列问题。
水温/℃ 组别 清除血渍时间 清除油渍时间 10 20 30 40 50 甲 乙 丙 甲 乙 丙 甲 乙 丙 甲 乙 丙 甲 乙 丙 67 66 88 52 51 83 36 34 77 11 12 68 9 11 67 93 78 95 87 63 91 82 46 85 75 27 77 69 8 68 （1）提高洗衣粉去污能力的方法有_____ ___。甲组在洗衣粉中加入了______ __。乙组在洗
衣粉中加入了____ _____。
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（2）甲、乙组洗涤效果的差异，说明酶的作用具有_____ ____。
（3）如果甲、乙和丙3组均在水温为80℃时洗涤同一种污渍，请比较这3组洗涤效果之间的差异
并说明理由。 。 （4）加酶洗衣粉中的酶是特殊的化学物质包裹的，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发
挥催化作用。请说明这是否运用了酶的固定化技术及其理由。 。 11.辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。“汉水丑”超级（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的_______ ___和_____ _____过程。
（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是_________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值__________（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是__________。
（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是__________。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是__________和纤维素酶。“
（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是_______ _ __。 12. 草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传给后代。导致产量降低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖技术的基本过程如下：
（1）微型繁殖培育无病毒草莓时，一般选取 作为外植体，其依据是 。 （2）在过程?中，常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和 ，在配置好的培养基中，常常需要添加 ．有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织．接种后2－5d，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是 ．
（3）在过程?中，愈伤组织在诱导生物的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是 ．
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