广东海洋大学微生物学考试(3)

2019-05-18 22:40

关键是出发菌株的选择和诱变方法的选择。因为这些都决定诱变的效果和方向。

试以梯度平板法来说明定向培育抗药性菌株的原理,并说明为何不能把定向培育说成是“定向变异”。

梯度平板是一种含有某药物的梯度浓度的琼脂培养基平板,它由含药物的上半个斜面和不含药物的下半个斜面分两次浇合而成。通过制备琼脂表面存在药物浓度的平板→在其上涂布诱变处理后的细胞悬液→经培养后再从上选取抗药性菌落等步骤,就可定向筛选到相应抗药性突变株。在筛选抗代谢药物的抗性菌株以取得相应代谢物的高产菌株方面,此法能达到定向培养的效果。

定向变异就是按照人的意愿通过一定的技术手段(主要是基因工程)让生物朝人的需要进行的变异。但是在定向培养中的变异是不定向的,是不可人为控制的。(实在编不下去...)

试用表解法概括一下筛选营养缺陷型菌株的主要步骤和方法。

筛选步骤如下:

1)诱变剂处理,与一般诱变处理相同;

2)淘汰野生型:通过抗生素法或菌丝过滤法就可淘汰为数众多的野生型菌株,从而达到浓缩极少数营养缺陷型的目的;

3)检出缺陷型:有夹层培养法,限量补充培养法,逐个检出法,影印平版法; 4)鉴定缺陷型,可借生长谱法进行。

抗生素法和菌丝过滤法为何能“浓缩”营养缺陷型菌株?

抗生素法有青霉素法和制霉菌法等数种。青霉素法适用于细菌,原理是青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成,因而可杀死能正常生长繁殖的野生型细菌,但无法杀死正处于休止状态的营养缺陷型细菌,从而达到“浓缩”后者的目的。制霉菌法适用真菌,原理是制霉菌能与真菌细胞膜上甾醇作用,从而引起膜的损伤。因为它只能杀死生长繁殖着的酵母菌或霉菌等真菌,故也可用于淘汰相应的野生型菌株和“浓缩”营养缺陷型菌株。

菌丝过滤法适用于进行丝状生长的真菌和放线菌,原理是在基本培养基中,野生型菌株的孢子能发芽成菌丝,而营养缺陷型的孢子则不能。因此,将诱变剂处理后的大量孢子放在基本培养基上培养一段时间后,再用滤孔较大的擦镜纸过滤。如此重复数遍后,就可去除大部分野生型菌株,从而达到了“浓缩”营养缺陷型的目的。 什么叫准性生殖?试以荨麻青霉为例,说明利用准性生殖进行半知菌类真菌杂交育种的一般操作。

准性生殖是一种在同种而不同菌株的体细胞间发生的融合,它可不借减数分裂而导致低频率基因重组并产生重组子。

1)选择亲本。即选择来自不同菌株的合适的营养缺陷型作为准性杂交的亲本。2)强制异合。即用人为的方法强制两个营养缺陷型的亲本菌株形成互补的异核体。3)移单菌落。将平板上长出的单菌落移种到基本培养基[ — ]的斜面上。4)验稳定性。指设法检验获得的菌株究竟是一种不稳定的异核体,还是稳定的杂合二倍体。5)促进变异。6)选出良种。

第八章 微生物的生态

正常菌落:生活在健康动物各部位、数量大、种类较稳定、一般能发挥有益作用的微生物种群。 条件致病菌:某种特定条件下可致病的细菌。

共生:指两种生物共居在一起,相互分工合作、相依为命,甚至形成独特结构,达到难分难解、合二为一的极其紧密的一种相互关系。

寄生:一般指一种小型生物生活在另一种较大型生物的体内(包括细胞内)或体表,从中夺取营养并进行生长繁殖,同时使后者蒙受损害甚至被杀死的一种相互关系。

拮抗:又称抗生,指由某种生物所产生的特定代谢产物可抑制他种生物的生长发育甚至杀死它们的一种相互关系。 捕食:指一种大型的生物直接捕捉、吞食另一种小型生物以满足其营养需要的相互关系。 混菌培养(混合培养):将两种或数种微生物混在一起培养,以获得更好效果的培养方法。 生化需氧量(BOD):指1L污水或待测水样中所含的一部分易氧化的有机物,当微生物对其氧化、分解时,所消耗的水中溶解氧毫克数(其单位为mg/L)。

化学需氧量(COD):指1L污水中所含的有机物在强氧化剂将它氧化后,所消耗氧的毫克数(其单位为mg/L)。 11

一杯清水,一杯自来水放在阳台上,两者微生物的变化?

最初,微生物数量较少,主要是清水型水生微生物,当中以化能自养微生物和光能自养微生物为主。 然后,水型水生微生物数量上升后下降,而腐败型水生微生物数量上升。

最终,变成主要是败型水生微生物为主,有各种肠道杆菌、芽孢杆菌、弧菌和螺菌等

清水最初基本无微生物,然后微生物数量上升,其中主要是清水型水生微生物,再然后...(请自行改良)

第九章 传染与免疫

外毒素:指在病原细菌生长过程中不断向外界环境分泌的一类毒性蛋白质,有的属于酶,有的属于酶原,有的属于毒蛋白。

类毒素:若用0.3%~0.4%甲醛溶液对外毒素进行脱毒处理,可获得失去毒性但仍保留其原有免疫原性(抗原性)的生物品。

内毒素:是G-细菌细胞壁外层的组分之一,其化学成分是脂多糖。 补体:存在于正常人体或高等动物血清中的一组非特异性血清蛋白。

干扰素:是高等动物细胞在病毒或dsRNA等干扰素诱生剂的刺激下,所产生的一种具有高活性、广谱抗病毒等功能的特异性糖蛋白。

免疫应答:一类发生在活生物体内的特异性免疫的系列反应过程。

细胞免疫:指机体在抗原刺激下,依赖胸腺的T细胞发生增殖、分化,进而直接攻击靶细胞或间接地释放淋巴因子的免疫作用。

体液免疫:指机体受抗原刺激后,B细胞进行增殖并分化为浆细胞,由它合成抗体并释放到体液中以发挥其免疫作用。

胸腺依赖性抗原(TD抗原):包括血细胞、血清成分、细菌细胞核其他可溶性蛋白等在内的多数抗原。 非胸腺依赖性抗原(TI抗原):指它在刺激机体产生抗体时,不需要T细胞辅助的抗原或是对T细胞依赖程度很低的抗原。(包括一些多糖类、脂类和核酸类抗原,例如细菌荚膜多糖、LPS或聚鞭毛蛋白等,它们一半仅引起机体产生体液免疫中的初次应答,而不引起再次应答。)

T细胞表面标志:包括表面受体和表面抗原两类。

抗原:是一类能诱惑机体发生免疫应答并能与相应抗体或T淋巴细胞受体发生特异性免疫反应的大分子物质。 半抗原:缺乏免疫原性而有免疫反应性的抗原物质。

抗原决定簇:位于抗原表面可决定抗原性的特异性的特定化学基团,亦即指构成抗原的免疫原性所必需的最少亚单位数。

初次免疫应答、再次免疫应答P306

抗原结合价:凡能与抗体相结合的抗原决定簇的总数。

免疫交叉反应:在细菌细胞中存在多种抗原,由于甲、乙两菌存在共同抗原而引起的甲菌抗原(或抗体)与乙菌抗体(或抗原)间发生较弱的免疫反应的现象。

克隆选择学说:澳大利亚免疫学家F.M.伯内特于1957年提出的抗体形成理论。(1)在高等动物体内,天生存在着大量具有不同抗原受体的免疫细胞克隆每细胞表面仅一种特异性抗原受体,它的存在受遗传基因控制。(2)某一特定抗原进入机体,就可与相应淋巴细胞表面上唯一的一个与其相应的特异性受体发生结合。(3)生物处于胚胎期时,若某一淋巴细胞克隆接触相应抗原(不论外来抗原或自身抗原),则它会被消除、排除或受抑制(失活),形成禁忌细胞,它们对机体自身抗原物质不发生免疫应答,即处于天然耐受状态。(4)禁忌克隆可复活或发生突变,从而又可成为能与自身抗原成分起免疫应答的克隆。

免疫耐受性:当生物处于胚胎期时,若某一淋巴细胞克隆接触相应抗原(不论外来抗原或自身抗原),则它会被消除、排除或受抑制(失活),形成禁忌细胞,它们对机体自身抗原物质不发生免疫应答,即处于天然耐受状态。

什么是免疫应答?由TD抗原和TI抗原引起的免疫应答反应有何不同?试加以说明。

免疫应答是指一类发生在活生物体内的特异性免疫的系列反应过程。这是一个从抗原的刺激开始,经过抗原特异性淋巴细胞对抗原的识别(感应),使淋巴细胞发生活化、增殖、分化等一系列变化,最终表现出相应的体液免疫或(和)细胞免疫效应。

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产生TD抗体需要何种免疫细胞参与?试说明其过程。 需要3中免疫细胞的参与,他们分别是:

1)抗原递呈细胞,主要是巨噬细胞,能有效摄取、处理、递呈抗原和激活T细胞;2)T细胞,在抗体形成过程中能特异性地识别抗原,辅助B细胞,促使B细胞活化和进一步分化成浆细胞以产生抗体。3)B细胞,是产生抗体的效应细胞,也能特异识别抗原。

什么是免疫分子?试以MHC蛋白为例作图, 说明它在免疫应答中的功能。

免疫分子主要指抗原和抗体。

什么是Burnet抗体形成的克隆选择学说?试图示并简要说明之。

克隆选择学说的要点是:其要点为:

1)在高等动物体内,天生存在着大量具有不同抗原受体的免疫细胞克隆每细胞表面仅一种特异性抗原受体,它的存在受遗传基因控制。

2)某一特定抗原进入机体,就可与相应淋巴细胞表面上唯一的一个与其相应的特异性受体发生结合。由此从无数免疫细胞克隆中选择出一个与之相对应的克隆,促使这一克隆发生活化、增殖和分化,最终变成能分泌大量相应抗体的浆细胞和记忆细胞的过程。

3)当生物处于胚胎期时,若某一淋巴细胞克隆接触相应抗原(不论外来抗原或自身抗原),则它会被消除、排除或受抑制(失活),形成禁忌细胞,它们对机体自身抗原物质不发生免疫应答,即处于天然耐受状态,这就称免疫耐受性的原因。

4)禁忌克隆可复活或发生突变,从而又可成为能与自身抗原成分起免疫应答的克隆。

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第十章 微生物的分类和鉴定

种:是生物分类中基本的分类单元和分类等级。微生物的种可以看作是:具有高度相似、亲缘关系极其接近、与同属内的其他物种有着明显差异的菌株的总称。

模式种:微生物中,一个种只能用该种内的一个典型菌株当作它的具体代表,故此典型菌株就是该种的模式种或模式活标本。

菌株:从自然界中分离得到的任何一种微生物的纯培养物都可以称为微生物的一个菌株;用实验方法(如通过诱变)所获得的某一菌株的变异型,也可以称为一个新的菌株,以便与原来的菌株相区别。菌株是微生物分类和研究工作中最基础的操作实体。

三域学说:20世纪70年代末由于美国伊利诺斯大学C.R.Woose等人对大量微生物和其它生物进行16S和18S rRNA寡核苷酸测序,并比较其同源性水平后,提出了一个与以往各种界级分类不同的新系统,称为三域学说。包括细菌域、古生菌域和真核生物域。

什么是学名?用双名法和三名法表达学名有何差别?

学名是某一菌种的科学名称,是按“国际命名法规”进行命名并受国际学术界公认的通用正式名称。

双名法(属名大写,种名加词小写):

学名=属名+种名加词+(首次定名人)+现名定名人+现名定名年份 排斜体字 排正体字(一般省略) 三名法:学名=属名+种名加词+符号subsp或var+亚种或变种名的加词 排斜体 排正体(可省略) 排斜体(不可省略) 何谓三域学说?提出此学说的依据何在?它在目前还存在何种挑战?

20世纪70年代末由于美国伊利诺斯大学C.R.Woose等人对大量微生物和其它生物进行16S和18S rRNA寡核苷酸测序,并比较其同源性水平后,提出了一个与以往各种界级分类不同的新系统,称为三域学说。包括:细菌域、古生菌域和真核生物域。

挑战:1)有些学者认为6S和18S rRNA的分子进化很难代表整个基因组的分子进化。2)已知有许多真核生物的基因组和它们表达的功能蛋白更接近于细菌而非接近于古生菌等。

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