3.生理生化特征实验:
对纯化的菌种进行革兰氏染色、糖发酵实验、淀粉水解实验、甲基红实验(M.R.)、伏普实验(V.P.)、柠檬酸盐利用实验、吲哚实验、硫化氢实验、 氧化酶实验等并记录结果. 4.16s-rDNA的鉴定细菌种属: 二,实验方法:
1.菌落的观察:用放大镜直接观察菌落特征并记录,并用照相机拍摄菌落照片。 2.菌体的观察:先革兰氏染色再在高倍镜及油镜下观察单一菌株的个体形态。 3.生理生化特征实验(参照微生物课本): (1)糖类发酵(分解) 试验
器具或材料:试管、接种针、恒温箱等,糖类发酵与氧化实验培养基(半固体) 操作步骤 ① 接种:以移接18—24小时待鉴定的菌用接种针穿刺接种。接4支,其中2支用灭菌的凡士林或石蜡洋菜上封盖,以隔绝空气为闭管,另2支不封为开管,同时要有不接种的闭管作对照。 ② 培养:置于37度恒温箱中,培养8—16个小时,1天、3天和7天 ③ 观察:在上述培养时间内观察试管中指示剂的变化情况
结果:在8小时、16小时检查,若培养基柱上部变黄,下部仍为绿色,则证明为氧化型,全部变黄或下部变黄上部为绿,则为发酵型。 (2).V-P试验(二乙酰试验)
(3).甲基红实验(M.R.) (4).淀粉水解试验 (5).吲哚试验
(6).过氧化酶测定 (7).柠檬酸盐利用试验
4.16s-rDNA的鉴定细菌种属 注:
查伯杰氏手册主要参考《伯杰细菌鉴手册》, 《真菌的形态和分类》 根据菌落形态、染色性质及生理生化性质查分离出的菌为哪几种菌。 参考文献:
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