白漏出,重装填后不能洗出。
电泳图上出现大量抖峰,是管内出现气泡所致,原因可能如下1 从下方给予负压,且流速过大 2 下方的管口漏气(一侧缝隙我们添加了液体,并未漏泄,接口处可能漏液),3 凝胶的缝隙中本身有空气,4,buffer并未排气,在负压条件下溶解的空气被析出 4 压强过低出现真空泡
由于出现了大量蛋白卡在分界面上,且前期从电泳图上看到分离出约两种杂蛋白,我们采取了倒出胶体重新装柱,重新洗脱的方法,所以紫外吸收图谱并未记录。
4.6. 凝胶电泳的分离胶是我配的,一块水封时候用力过大,出现了凹面,并未有多余,所
以只好自用,对点样结果的的美观性有影响,组员点样的时候可能出现失误,使得5,6,7,8与位置不符合,可能未点上。从前三个泳道分析,小韦组结果十分好,目标条带及其明亮,可能我们组拿的并不是波峰管,所以上方有微弱杂带。我们的离子交换柱结果较好,凝胶柱图谱上显示两个杂蛋白,在电泳图上的确比离子柱少两个杂带,图上红色所示,层析依旧是有作用的。泳道4,推测是离子交换柱的穿出和wash液,目标条带区域有浅色痕迹,可能是蛋白与柱体结合不紧密,依旧有少量渗漏。 5. 参考文献
陈鹏 生物技术综合大实验 西北农林科技大学生物技术大实验 邓超等 绿色荧光蛋白及其应用 中国生物工程杂志
赵仲麟等 内含肽介导的绿色荧光蛋白纯化 河南农业大学学报
参考文献