总胆红素（重氮盐法） 1：概述
血清中的[胆红素大部分来源于衰老红细胞被破坏后产生出来的血红蛋白衍化而成，在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做直接胆红素，未在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做间接胆红素，二者的和就是总胆红素。 2标本的收集
新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。 3：方法原理
本试剂采用表面活性剂作为增溶剂，样品中结合胆红素和经增溶的未结合胆红素与重氮对氨基苯磺酸反应，生成酸性偶氮胆红素，其在570nm处吸收值的增加与样品中胆红素的浓度成正比，通过测定570nm处吸光度值的变化，即可计算出样品中总胆红素的浓度。 4剂来源，配置及储存 试剂来源：迪瑞 试剂配置：。试剂一和试剂二按100:1的比例。即10ml试剂一加0.1ml试剂二，混
合后即成工作液
试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器
CS-600B全自动生化分析仪
分析参数：样品量25 u/l 试剂量：250 u/l
测光点0--41 测定模式：1点终点法 正反应 分析波长：570nm/660nm(主波长/副波长)
6计算方法
总胆红素浓度（μmol/L）=样本管吸光度×校准液浓度（μmol/L）
校正管吸光度
7 线性范围：本实验的线性范围：0---300μmol/L 8 参考范围成人1.7—21μmol/L 新生儿20—200μmol/L 9 失控控理
1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。 2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。
3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。
4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。 10 注意事项
1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。
2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。
3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。 4：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。 5：胆红素重氮反应对温度敏感，测定时应以恒温。 6：反应形成的色素可稳定1小时。 7国际换算：μmol/L﹡0.585=mg/dl
11临床意义：临床上主要用于诊断肝脏疾病和胆道梗阻，当血清总胆红素有很大增高时，人的皮肤、眼睛巩膜、尿液和血清呈现黄色，故称黄疸。当肝脏发生炎症、坏死、中毒等损害时均可以引起黄疸，胆道疾病及溶血性疾病也可以引起黄疸。以直接胆红素升高为主常见于原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻等。以间接胆红素升高为主常见于溶血性疾病、新生儿黄疸或者输血错误等。肝炎与肝硬化病人的直接胆红素与间接胆红素都可以升高。总胆红素增高，见于中毒性或病毒性肝炎、溶血性黄疸、恶性贫血、阵发性血红蛋白尿症。红细胞增多症、新生儿黄疸、内出血、输血后溶血性黄疸、急性黄色肝萎缩。先天性胆红素代谢异常（Crigler-Najjar综合征、Gilbert综合征、Dubin-Johnson综合征）、果糖不耐受等，以及摄入水杨酸类、红霉素、利福平、孕激素、安乃近等药物。
直接胆红素（重氮盐法）
标准化操作程序文件
单位：大同滨河肝胆病医院 科室: 检验科生化室 文件编号： 版本： 批准施日期： 有校期: 一年
复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室 编写者： 审批者: 保管者: 修订者：
直接胆红素（重氮盐法） 1概述
直接胆红素[1](英文缩写DBIL)又称结合胆红素。未结合胆红素在肝细胞内转化，与葡糖醛酸结合形成结合胆红素，结合胆红素用凡登伯定性试验呈直接反应，故将这种胆红素称为直接胆红素。测定直接胆红素主要用于鉴别黄疸的类型。结合胆红素的升高，说明经肝细胞处理和处理后胆红素从胆道的排泄发生障碍。 2标本的收集
新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。 3：方法原理
样品中直接胆红素与重氮对氨基苯磺酸反应，生成酸性偶氮胆红素，其在570nm处光吸收值增加与杨品中直接胆红素的浓度成正比，通过测定570nm处吸光度的变化，即可计算出样品中直接胆红素的浓度。 4剂来源，配置及储存 试剂来源：迪瑞
试剂配置：试剂一和试剂二按100:1的比例。即10ml试剂一加0.1ml试剂二，混合后即成工作液
试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器
CS-600B全自动生化分析仪
分析参数：样品量25 u/l 试剂量：250 u/l
测光点0--41 测定模式：1点终点法 正反应 分析波长：570nm/660nm(主波长/副波长)
6计算方法
总胆红素浓度（μmol/L）=样本管吸光度×校准液浓度（μmol/L）
校正管吸光度μmol/L
7 线性范围：本实验的线性范围：0---300μmol/L 8 参考范围成人1.7—6.8μmol/L 9 失控控理
1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。 2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。
3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。
4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。 10 注意事项
1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。
2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。
3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。 4：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。 5：胆红素重氮反应对温度敏感，测定时应以恒温。 6：反应形成的色素可稳定1小时。 7国际换算：μmol/L﹡0.585=mg/dl 11：临床意义
直接胆红素增高，属阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸。以直接胆红素升高为主常见于原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻等。肝炎与肝硬化病人的直接胆红素都可以升高。胆红素总量增高、直接胆红素增高时，可 疑为肝内及肝外阻塞性黄疸，胰头癌，毛细胆管型肝炎及其他胆汁瘀滞综合征等。 1、梗阻性黄疸 如果肝外的胆道系统发生肿瘤或出现结石，将胆道阻塞，直接胆红素不能全部排入肠道，而逆流入血，会引起总胆红素高，而发生阻塞性黄疸。原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻、淤胆型肝炎等疾病都是引起直接胆红素高的原因。
2、肝细胞性黄疸 如果肝脏不好，肝脏将间接胆红素转化为直接胆红素的能力下降，即肝细胞受损，或者因胆红素不能正常地转化成胆汁，或者因肝细胞肿胀，使肝内的胆管受压，排泄胆汁受阻，这时会引起直接胆红素和间接胆红素同时偏高的现象，发生肝细胞性黄疸。肝脏疾病如乙肝、丙肝、脂肪肝、酒精肝、肝硬化等都是引起直接胆红素高的原因。
引起直接胆红素高的原因虽然很多，但最常见的是由肝脏疾病引起的直接胆红素高。因此，发现直接胆红素高时，首先要考虑是不是得了肝脏疾病，结合患者的病史、症状等进行综合分析，选择合适的检查项目，确定引起直接胆红素高的原因，针对病因进行治疗。
血清直接胆红素超过4.5umol/L有临床意义。正常血清中结合胆红素仅占总胆红素的4%-5%，其浓度一般<1umol/L，上限不超过3umol/L。正常血清内测的直接胆红素基本上不反映与葡萄糖醛酸相结合的胆红素，而在黄疸时，则基本反映后者的水平。
胆汁郁积性黄疸时，由于结合胆红素不能从肝细胞和细毛胆管排出，使血清直接胆红素明显升高，在总胆红素中所占比值升高显著；肝细胞性黄疸时，由于同时有肝细胞摄取、结合、排泄障碍，以致血清直接胆戏素/总胆红素比值也升高，但升高幅度不及胆汁郁积性黄疸。在肝细胞性黄疸时比值>40%，而胆汁郁积性黄疸时常在60%以上，最高的可达90%，有一定鉴别诊断价值。