参考资料一：
常见的名词解释
1、灭菌：杀灭或除去特定环境或物品中一切微生物的过程。目前国际上规定，灭菌过程必须使灭菌物品污染的微生物存活率减少到10-6及以下。
2、微生物：在显微镜下才能看到的微小实体，包括细菌、真菌、原生动物和病毒。
3、无菌技术：是指在微生物试验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施，其中包括无菌环境设施、无菌试验器材以及无菌操作。
4、无菌操作：是指在无菌环境条件下，在对无菌制品或无菌器械进行检验的过程中，能防止微生物污染与干扰的一种常规操作方法。
5、培养条件：用于促进微生物发育、生长和繁殖的生长培养基和培养方式的组合。
6、需氧菌：在代谢中，有氧条件下才能生存的微生物。 7、厌氧菌：在代谢中，没有氧的条件下才能生存的微生物。 8、抑细菌/抑霉菌试验：用选定的微生物来演示某些物质的存在能够抑制这些微生物的繁殖。
9、促生长试验：用于证明生长培养基能够支持微生物生长的技术操作。 10、假阴性：实际阳性的无菌试验结果被变成了阴性。 11、假阳性：实际阴性的无菌试验结果被变成了阳性。
12、生物指示物：对特定灭菌工艺有确定的抗力，可供使用的微生物检验器材。
13、化学指示物：根据暴露于某种灭菌工艺所产生的化学或物理变化，在一个或多个预定工艺参数上显示变化的指示器材。
14、无菌保证水平（SAL）:灭菌后产品上存在单个活微生物的概率。
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参考资料二：
无菌室空气中菌落数的检查
无菌室在消毒处理完毕后，应检查空气中的菌落数。方法如下：取直径约90mm培养皿，无菌操作注入融化的营养琼脂培养基约20mL，在30℃～35℃培养48小时证明无菌后，取3只培养皿在无菌室操作台或超净工作台平均位臵打开上盖，暴露30分钟后盖好，臵30℃～35℃培养48小时后取出检查，3只双碟上生长的菌落数平均不得超过1个。无菌试验过程中应检查空气中的菌落数，方法同上。在试验开始进行时打开平皿盖，至试验结束盖好照上法培养，应符合上述要求。
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参考资料三：
供试品数量的选择
检验数量是指一次试验所用供试品最小包装容器的数量。除另有规定外，出厂产品按药典附录ⅩⅢ B中表1规定；上市产品监督检验按表2、表3规定。表1、表2、表3中最少检验数量不包括阳性对照试验的供试品用量。一般情况下，供试品无菌检查若采用薄膜过滤法，应增加1/2的最小检验数量作阳性对照用；若采用直接接种法，应增加供试品1 支（或瓶）作阳性对照用。执行GB/T14233.2的供试品数量应满足同一批号3～11个单位供试品。
检验量是指一次试验所用的供试品总量（g或ml）。除另有规定外，每份培养基接种的供试品量按表2、表3规定。若每支（瓶）供试品的装量按规定足够接种两份培养基，则应分别接种硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基。采用薄膜过滤法时，检验量应不少于直接接种法的总接种量，只要供试品特性允许，应将所有容器内的全部内容物过滤。
表1 批出厂产品最少量检验数量
每种培养基最少检验数量 10%或4个(取较多者) 10个 2%或20个(取较少者) 2%或10个(取较少者) ≤200 5%或2个(取较多者) ＞200 10个 桶装固体原料 ≤4 每个容器 4＜N≤50 20%或4个容器(取较多者) ＞50 2%或10个容器(取较多者) 医疗器具 10≤100 10%或4 件（取较多者） 100＜N≤500 10 件 ＞500 2%或20 件（取较少者） 注:若每个容器中的装量不足接种两种培养基,那么表中的检验数量应加倍 供试品 注射剂 大体积注射剂(＞100ml) 眼用及其他非注射产品 批产量N(个) ≤100 100＜N≤500 ＞500
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表2 上市抽验样品(液体制剂)的最少检验量 供试品量V (ml) ≤1 1＜V＜5 5≤V＜20 20≤V＜50 50≤V＜100 50≤V＜100(静脉给药) 100≤V≤500 V＞500 每支样品接入每管培养基的最少样品量 全量 半量 2ml 5ml 10ml 半量 半量 500ml 10 10 10 10 10 6 6 最少检验数量 (瓶或支) 20① ①每种培养基各接种10支供试品.
表3 上市抽验样品(固体制剂)的最少检验量
供试品装量M (瓶或支) M＜50mg 50mg≤M＜300mg 300mg≤M＜5g M≥5g 一次性使用含药产品 每支样品接入每管培养最少检验数量 基的最少样品量 全量 半量 150mg 500mg 整个产品 (瓶或支) 20① 10 10 10 10 ①每种培养基各接种10支供试品 ②桶装固体原料的最少检验数量为4个包装
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参考资料四：
培养基的制备
培养应注意培养条件：硫乙醇酸盐流体培养基 30～35℃14天；改良马丁培养基 23～28℃14天。选择培养条件需考虑的因素：产品的性质、制造方法、潜在的微生物污染来源、可能遇到的微生物种类。硫乙醇酸盐流体培养基必须在煮沸后，再进行分装、灭菌。
1、硫乙醇酸盐流体培养基
酪胨 (胰酶水解) 15.0g、酵母浸出粉 5.0g、葡萄糖 5.0g、氯化钠 2.5g、L-胱氨酸 0.5g、新配制的0.1%刃天青溶液 1.0 ml、硫乙醇酸钠 0.5g(或硫乙醇酸 0.3ml)、琼脂 0.75g、水 1000 ml
除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节 pH 为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节 pH 值使灭菌后为 7.1±0.2。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的 1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的 1/5 ，否则，须经 100 ℃水浴加热至粉红色消失（不超过 20 分钟），迅速冷却，只限加热一次，并防止被污染。
硫乙醇酸盐流体培养基臵 30℃～35℃培养。 2、改良马丁培养基
胨 5.0g、磷酸氢二钾 1.0g、酵母浸出粉 2.0g、硫酸镁 0.5g、葡萄糖 20.0g、水 1000 ml
除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值约为6.8，煮沸，加入葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节pH值使灭菌后为6.4±0.2，分装，灭菌。
改良马丁培养基臵 23℃～28℃培养。
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