标准缓冲液的配制及常用数据 2004.11
标准缓冲液的配制及常用数据
一、标准缓冲液pH值与温度对照表
温度 四草酸氢钾 邻苯二甲酸氢钾 混合磷酸盐 硼砂 ℃ 0.05M 0.05M 0.025M 0.01M 5 1.67 4.00 6.95 9.39 10 1.67 4.00 6.02 9.33 15 1.67 4.00 6.90 9.28 20 1.68 4.00 6.88 9.23 25 1.68 4.00 6.86 9.18 30 1.68 4.01 6.85 9.14 35 1.69 4.02 6.84 9.11
二、常用缓冲溶液的配制方法
1． 甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 2.0 50 44.0 3.0 50 11.4 2.4 50 32.4 3.2 50 8.2 2.6 50 24.2 3.4 50 6.4 2.8 50 16.8 3.6 50 5.0 甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）
X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升 pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y 2.2 5 4.070 3.2 5 1.470 2.4 5 3.960 3.4 5 0.990 2.6 5 3.295 3.6 5 0.597 2.8 5 2.642 3.8 5 0.263 3.0 5 2.022 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升 3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH 0.2mol/L 0.1mol/L pH 0.2mol/L 0.1mol/L Na2HPO4 柠檬酸 Na2HPO4 柠檬酸 （毫升） （毫升） （毫升） （毫升） 2.2 0.40 10.60 5.2 10.72 9.28 2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85 2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.40 2.8 3.17 16.83 5.8 12.09 7.91 3.0 4.11 15.89 6.0 12.63 7.37 3.2 4.94 15.06 6.2 13.22 6.78 3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.15 3.6 6.44 13.56 6.6 14.55 5.45 3.8 7.10 12.90 6.8 15.45 4.55 4.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53 4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61 4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83 4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.27 4.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85 5.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55 Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
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标准缓冲液的配制及常用数据 2004.11
C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。 4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度 柠檬酸（克） 氢氧化钠(克) 盐酸（毫升） 最终体积（mol/L） C （升）①6H8O7·H2O NaOH 97% HCl（浓） 2.2 0.20 210 84 160 10 3.1 0.20 210 83 116 10 3.3 0.20 210 83 106 10 4.3 0.20 210 83 45 10 5.3 0.35 245 144 68 10 5.8 0.45 285 186 105 10 6.5 0.38 266 156 126 10 ① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L） pH 0.1 mol/L 0.1 mol/L pH 0.1 mol/L 0.1 mol/L 柠檬酸 柠檬酸钠 柠檬酸 柠檬酸钠 （毫升） （毫升） （毫升） （毫升） 3.0 18.6 1.4 5.0 8.2 11.8 3.2 17.2 2.8 5.2 7.3 12.7 3.4 16.0 4.0 5.4 6.4 13.6 3.6 14.9 5.1 5.6 5.5 14.5 3.8 14.0 6.0 5.8 4.7 15.3 4.0 13.1 6.9 6.0 3.8 16.2 4.2 12.3 7.7 6.2 2.8 17.2 4.4 11.4 8.6 6.4 2.0 18.0 4.6 10.3 9.7 6.6 1.4 18.6 4.8 9.2 10.8 柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。 6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L） 0.2 mol/L 0.3 mol/L 0.2 mol/L 0.3 mol/L pH(18℃) NaAc(毫升) HAc(毫升) pH(18℃) NaAc(毫升) HAc(毫升) 2.6 0.75 9.25 4.8 5.90 4.10 3.8 1.20 8.80 5.0 7.00 3.00 4.0 1.80 8.20 5.2 7.90 2.10 4.2 2.65 7.35 5.4 8.60 1.40 4.4 3.70 6.30 5.6 9.10 0.90 4.6 4.90 5.10 5.8 9.40 0.60 Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。 7．磷酸盐缓冲液
（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2） 0.2 mol/L 0.3 mol/L 0.2 mol/L 0.3 mol/L pH Na2HPO4 NaH2PO4 pH Na2HPO4 NaH2PO4 (毫升) (毫升) (毫升) (毫升) 5.8 8.0 92.0 7.0 61.0 39.0 5.9 10.0 90.0 7.1 67.0 33.0 6.0 12.3 87.7 7.2 72.0 28.0 6.1 15.0 85.0 7.3 77.0 23.0 6.2 18.5 81.5 7.4 81.0 19.0 6.3 22.5 77.5 7.5 84.0 16.0 6.4 26.5 73.5 7.6 87.0 13.0 6.5 31.5 68.5 7.7 89.5 10.5 6.6 37.5 62.5 7.8 91.5 8.5 6.7 43.5 56.5 7.9 93.0 7.0 6.8 49.5 51.0 8.0 94.7 5.3 6.9 55.0 45.0 Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
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标准2004.11
缓冲液的配制及常用数据 Na2HPO4·2H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。 Na2HPO4·2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。 （2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L）
pH mol/L/15Na2HPO4 mol/L//15KH2PO4 pH mol/L//15Na2HPO4 mol/L//15KH2PO4 (毫升) (毫升) (毫升) (毫升) 4.92 0.10 9.90 7.17 7.00 3.00 5.29 0.50 9.50 7.38 8.00 2.00 5.91 1.00 9.00 7.73 9.00 1.00 6.24 2.00 8.00 8.04 9.50 0.50 6.47 3.00 7.00 8.34 9.75 0.25 6.64 4.00 6.00 8.67 9.90 0.10 6.81 5.00 5.00 8.18 10.00 0 6.98 6.00 4.00 Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。 KH2PO4分子量 = 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2M K2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升 pH(20℃) 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 X (毫升) 5 5 5 5 5 5 Y（毫升） 0.372 0.570 0.860 1.260 1.780 2.365 0.2V盐酸 18.4 17.8 16.7 15.3 13.4 11.47 9.39 7.21 pH 8.4 8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 9.6 pH(20℃) 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 X (毫升) 5 5 5 5 5 5 Y（毫升） 2.963 3.500 3.950 4.280 4.520 4.680 0.2N盐酸(毫升) 5.21 3.82 2.52 1.65 1.13 0.70 0.35 9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃） pH 0.04M巴比妥钠溶液 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 8.2 100 100 100 100 100 100 100 100 0.04M巴比妥钠溶液(毫升) 100 100 100 100 100 100 100 100 巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升 10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）
50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。
pH 7.10 7.20 7.30 7.40 7.50 7.60 7.70 7.80 7.90 8.00 C
X(毫升) 45.7 44.7 43.4 42.0 40.3 38.5 36.6 34.5 32.0 29.2 pH 8.10 8.20 8.30 8.40 8.50 8.60 8.70 8.80 8.90 X(毫升) 26.2 22.9 19.9 17.2 14.7 12.4 10.3 8.5 7.0 三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OH
HOCH2 NH2
分子量=121.14;
1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根） pH 0.05M硼砂（毫升） 0.2M硼砂（毫升） pH 0.05M硼砂（毫升） 0.2M硼酸（毫升） 3
标准2004.11
7.4 7.6 7.8 8.0 1.0 1.5 2.0 3.0 缓冲液9.0 8.5 8.0 7.0 的配8.2 8.4 8.7 9.0 制及3.5 4.5 6.0 8.0 常用6.5 5.5 4.0 2.0 数据 硼砂Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。 硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 11．硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根） pH 7.4 7.6 7.8 8.0 0.05M硼砂（毫升） 1.0 1.5 2.0 3.0 0.2M硼酸（毫升） 9.0 8.5 8.0 7.0 pH 8.2 8.4 8.7 9.0 0.05M硼砂（毫升） 3.5 4.5 6.0 8.0 0.2M硼酸（毫升） 6.5 5.5 4.0 2.0 硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。 硼酸H2BO3，分子量=61.84, 0.2M溶液为12.37克/升。 硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 8.6 50 4.0 9.6 50 22.4 8.8 50 6.0 9.8 50 27.2 9.0 50 8.8 10.0 50 32.0 9.2 50 12.0 10.4 50 38.6 9.4 50 16.8 10.6 50 45.5 甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。 13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）
X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 9.3 50 6.0 9.8 50 34.0 9.4 50 11.0 10.0 50 43.0 9.6 50 23.0 10.1 50 46.0 硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。 14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M） Ca2+、Mg2+存在时不得使用 pH 0.1MNa2CO3(毫升) 0.1MN2HCO3(毫升) 20℃ 37℃ 9.16 8.77 1 9 9.40 9.12 2 8 9.51 9.40 3 7 9.78 9.50 4 6 9.90 9.72 5 5 10.14 9.90 6 4 10.28 10.08 7 3 10.53 10.28 8 2 10.83 10.57 9 1 Na2CO2·10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。 N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。
15．“PBS”缓冲液 PH H2O NaCl 7.6 1000 8.5 7.4 1000 8.5 7.2 1000 8.5 7.0 100ml 8.5g 4
标准2004.11
Na2HPO4 NaH2PO4 缓冲2.2 0.1 液的2.2 0.2 配制2.2 0.3 及常用2.2g 0.4g 数据
三、实验室中常用酸碱的比重和浓度 名称 盐酸 硫酸 硝酸 冰乙酸 乙酸 磷酸 氨水 氢氧化钠溶液 分子式 HCl H2SO4 HNO2 CH3COOH CH3COOH H2PO4 NH4OH NaOH 分子量 36.47 98.09 63.02 60.05 98.06 35.05 40.0 比重 1.19 1.18 1.10 1.84 1.18 1.42 1.40 1.20 1.05 1.71 0.90 0.904 0.91 0.96 1.5 面分浓度%（W/W） 37.2 35.4 20.0 95.6 24.8 70.98 65.3 32.36 99.5 36 85.0 27.0 25.0 10.0 50.0 当量浓度（粗略）N 12.0 11.8 6.0 36.0 6.0 16.0 14.5 6.1 17.4 6.0 15,30,45(依反应而定) 15 14.3 13.4 5.6 19 配1升1N溶液所需毫升数 84 28 63 59 67(以15N计) 67 70 53 四、硫酸铵饱和度的常用表 1．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（25℃） 硫 酸铵 初 浓 度 ， % 饱和 度 0 10 20 25 30 33 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 90 10 56 20 114 57 25 144 86 29 30 176 118 59 30 33 196 137 78 49 19 硫整硫酸铵终浓度,%饱和度 35 40 45 50 55 ①每1升溶液加固体硫酸铵的克数 209 243 277 313 351 150 183 216 251 288 91 123 155 190 225 61 93 125 158 193 30 62 94 127 162 12 43 74 107 142 31 63 94 129 31 63 97 32 65 33 60 390 326 262 230 198 177 164 132 99 66 33 65 430 365 300 267 235 214 200 168 134 101 67 34 70 472 406 340 307 273 252 238 205 171 137 103 69 34 75 516 449 382 348 314 292 178 245 210 176 141 105 70 35 80 561 494 424 390 356 333 319 285 250 214 179 143 107 72 36 90 662 592 520 485 449 426 411 375 339 302 264 227 190 153 115 77 100 767 694 619 583 546 522 506 469 431 392 353 314 275 237 198 157 79 ①在25℃下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
2． 调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃）
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