转化(Transformation)是在 1928 年由格里菲思在对 菌进行研究时发现的。转导(Transduction)是 1952 年由莱德伯格在研究 菌的遗传重组时发现的。
重组 DNA 导入宿主的一般方法有 , , , 和 等。
称为感受态细胞(Competent cell)。
有关感受态出现的机制,目前主要有两种假说: 和 。
.外源 DNA 可以通过转化(transformation)的方法导入到宿主菌中,transformation 是
指 的过程。常用的 transformation 的方法有 , 和 。
转染(Transfection)是指 的过程;感染(Infection)是指 。
细菌结合(Conjugation)是指 的过程。
转导(Transduction)是指 ,它可分为两种: 和 。
重组体的筛选有两层含义:① ;② 。
目前,在重组体的筛选中,已经发展了许多构思巧妙、具有极高准确性的筛选方法。大致可以分为:① ;② ;
③ ;④ 等。
噬菌斑形成选择法有两种判断标准:① ;② 。
PCR 扩增筛选重组体是比较简便的筛选方法,它适合于 。
核酸杂交探针可分为两大类:DNA 探针和RNA 探针。其中DNA 探针又分为 探针和 探针。.
如果用限制性核酸内切酶切割双链DNA 产生5’突出的黏性末端,则可以用 的方法进行3’端标记。如果用限制性核酸内切酶切割双链DNA 产生的是3’突出的黏性末端,则可以用 进行3’端标记。
根据Northern 印迹的结果可以说明: 。
RNA 分子经凝胶电泳后按大小不同分开,然后被转移到一张硝酸纤维素膜 (尼龙膜) 上,同一放射DNA 探针杂交的技术称 。
在 技术中,DNA 限制性片段经凝胶电泳分离后,被转移到硝酸纤维素膜 (或尼龙膜)上,然后与放射性的DNA 探针杂交。
为了鉴定某一具有特殊功能蛋白质的结构,可以用一个容易检测的报告蛋白制备 ,然后跟踪报告蛋白在细胞中的行为即可。
可用T4 DNA 聚合酶进行平末端的DNA 标记,因为这种酶具有 和 的活性。
硝酸纤维素膜(NC)结合DNA 的能力为 ,尼龙膜(Nylon)为 。
如果对一个克隆的基因进行遗传操作,使互补的链转录,会产生同正常的RNA 转录物互补的 分子。 在Southern 印迹中,DNA 转移的速度取决于 和 。
用不对称PCR 合成单链DNA 探针时,两个引物的浓度比为 。
点杂交的主要缺点是 。
根据外源片段提供的遗传表型筛选重组体,必须考虑三种因素:① ;② ;③ 。
Northern 印迹和Southern 印迹有两点根本的区别:① ;② 。
放射免疫筛选的原理基于以下三点:① ;② ;③ 。
能够与特定DNA 序列结合的放射性DNA 片段称为 。
技术是基于互补的DNA 单链分子能够形成稳定双螺旋结构的天然特性而发展起来的。
下面关于用T4 多核苷酸激酶标记5’端制备探针的描述中 ( )是不正确的。
A.既能标记DNA,又能标记RNA B.既能标记双链DNA 又能
标记单链DNA
C.只能标记突出的5’端不能标记其他类型末端 D.DNA 或RNA 必须有5'-OH 的存在
报告基因 ( )。
A.以其易于分析的编码序列代替感兴趣基因的编码序列 B.以其易于分析的启动子区代替感兴趣基因的启动子区
C.能用于检测启动子的活性 D.能用于确定启动子何时何处有活性
在利用Lac Z 失活的显色反应筛选法中,IPTG 的作用是 ( )。
A.诱导宿主的α肽的合成 B.诱导宿主的ω肽的合成
C.作为酶的作用底物 D.作为显色反应的指示剂
用菌落杂交法筛选重组体时,( )。
A.需要外源基因的表达 B.不需要外源基因的表达
C.要根据克隆基因同探针的同源性 D.上述说法都正确
切口移位是指在 ( ) 的作用下,使 ( ) 带上放射性标记。
A.DNA 聚合酶I,RNA B.DNA 聚合酶I,DNA C.DNA 聚合酶III,RNA D.DNA 聚合酶III,DNA D.染色体未同蛋白质分开而沉淀
用于核酸分子杂交的探针可以是放射性标记的 ( )。
A.DNA B.RNA C.抗体 D.抗原
Southern 印迹是用DNA 探针检测DNA 片段,而Northern 印迹则是 ( )。 A.用RNA 探针检测DNA 片段 B.用RNA 探针检测RNA 片段
C.用DNA 探针检测RNA 片段 D.用DNA 探针检测蛋白质片段
用免疫化学法筛选重组体的原理是 ( )。
A.根据外源基因的表达 B.根据载体基因的表达 C.根据mRNA 同DNA 的杂交 D.根据DNA 同DNA 的杂交
随机引物标记探针,下列各项中哪一项是不正确的? ( )
A. 双链DNA、单链DNA、RNA 都是可以标记的 B.不需要用DNase I 预处理 C.反应时可用Klenow 酶 D. 反应时可用DNA 酶I
在切口移位标记DNA 探针时只能使用 ( )。
A.Klenow 酶 C.DNA 聚合酶II
要对一双链的DNA 分子进行3’端标记,可用( )。
A.Klenow 酶 C.T4 DNA 聚合酶
关于噬菌斑筛选法的原理,下面哪一种说法不正确? ( A.噬菌斑颜色变化 的变化
C.对IPTG 的分解能力
下列筛选重组体的方法中,不属于遗传学的方法是:( A.插入失活法 C.噬菌斑选择法
B.DNA 聚合酶I D.DNA 聚合酶III B.DNA 聚合酶I D. T7 DNA 聚合酶 )
B.cI 基因失活造成的噬菌斑D.对X-gal 的分解与否 )。
B.显色反应选择法 D.R 环分析法