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系部病原生物学与医学免疫学系 教师姓名 课程 医学微生物学与名称 授课 方式 免疫学 讲习 专业 层次 授课 时间 年级 学时 4 授课题目：实验九 医学免疫学实验 (三) 目的要求： 掌握：免疫标记技术的原理、类型及应用。ELISA原理、类型及用途。 熟悉：双抗体夹心法检测抗HBs的操作方法及结果观察。分离外周血单个核细胞的Ficoll密度梯度离心法，淋巴细胞转化试验原理、方法及其临床意义，E玫瑰花结试验方法、结果观察。 了解：其他酶免疫测定法（间接法EILSA、BAS-ELISA、微粒捕获酶免疫分析技术、免疫组化技术）的原理和应用。其他免疫标记技术（免疫荧光技术、放射免疫测定法、化学发光免疫技术、免疫胶体金技术、免疫印迹技术）的原理和应用。 重点难点： 双抗体夹心法ELISA的原理、操作、结果观察。 教具与课件： PPT课件 课外作业：见课件 课后回忆（经验教训、效果估计或反应，存在问题……）： 系主任 201 年 月 日 21
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教学内容与组织安排： 课堂时间安排：讲授45min，示教操作25min，学生操作90min。 一、电教片：免疫标记技术----ELISA 二、免疫标记技术：ELISA（双抗体夹心法）------检测抗HBs（操作，3孔/人） P19 简单介绍免疫标记技术的原理、特点、常用标记物及免疫标记技术的种类。讲解ELISA的原理、方法，操作时注意事项、结果判定。 ?材料?HBsAg试剂盒、待检血清、微量移液器、酶标仪 ?注意事项?A、试剂盒置2℃～8℃保存。B、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。C、从冷藏环境中取出试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔条，置室温平衡30分钟后再行测试，余者应及时封存于冰箱中以备后用。D、结果判断须在10分钟内完成。 三、细胞免疫检测技术 1、外周血淋巴细胞的分离（多媒体示教） 结合多媒体课件介绍外周血单个核细胞分离技术的原理、方法等。 2、E花环形成试验 (示教片，2份/室) 讲E花环形成试验的原理、方法、结果观察、应用等。 4、淋巴细胞转化试验（示教片，2份/室） 讲淋转的原理、方法、结果观察，简单介绍淋巴细胞转化前后的形态特点。 作业： 1、记录并分析双抗体夹心法检测HBsAg结果。P3 2、绘图：E花环形成试验和淋巴细胞转化试验结果。P4 课外思考题： 1、常见的免疫标记技术有那些？ 2、细胞免疫功能的体外检测主要有那些方法？ 3、细胞免疫功能的体内测定法主要是什么？试述其原理。
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系部病原生物学与医学免疫学系 教师姓名 课程 医学微生物学与名称 授课 方式 免疫学 实验 专业 层次 授课 时间 年级 学时 2 授课题目：实验十 病毒学实验 (一) 病毒感染检查方法、综合实验---流感病毒的分离与鉴定（一） 目的要求： 掌握：病毒培养用标本的采取与处理。临床标本中病毒分离与鉴定的一般程序和基本过程。流感病毒的鸡胚尿囊腔接种法。 熟悉：病毒感染常用的检查方法。 了解：常见病毒的形态。 重点难点： 临床标本中病毒分离与鉴定的一般程序和基本过程。流感病毒的鸡胚尿囊腔接种法。 教具与课件： PPT课件 课外作业：见课件 课后回忆（经验教训、效果估计或反应，存在问题……）： 系主任 201 年 月 日 23
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教学内容与组织安排： 课堂时间安排：讲授25min，示教操作15min，学生操作40min。 一、电教片：病毒的组织培养 二、病毒的形态学观察 1、电镜观察病毒的形态（幻灯片） 观察要点：病毒大小；有无包膜及包膜上有无突起；内部结构；空心或实心。 2、病毒包涵体的观察(示教，1套/室) （1）狂犬病毒包涵体（内基氏小体）：大脑海马部位神经组织病理切片（HE染色） （2）麻疹病毒包涵体：麻疹病毒接种于羊膜细胞中，取培养后的组织细胞涂片，HE染色。 注意包涵体形态、存在部位及染色特点。 三、病毒的培养方法 1、小白鼠脑内接种法（示教，2套/室）P102 ?材料?脑炎病毒（小白鼠脑脊髓炎）悬液、小白鼠（3周龄，体重6－8克）、注射器、碘酒、消毒液、纱布等。 示教小白鼠脑内接种的方法。 2、综合实验：流感病毒的分离与鉴定（一）---尿囊腔接种（操作，1蛋/4人）P104 讲解流感病毒的分离与鉴定的程序。 ?材料?9-11日龄鸡胚、10-3稀释的流感病毒液、蛋座、锥子、检卵灯、1ml注射器、碘酒和酒精棉 球、胶布。 示教操作尿囊腔接种的方法、讲操作时注意事项。 作业： 绘图：狂犬病毒包涵体（内基氏小体）、正常人羊膜单层细胞、麻疹病毒包涵体。
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系部病原生物学与医学免疫学系 教师姓名 课程 医学微生物学与名称 授课 方式 免疫学 实验 专业 层次 授课 时间 年级 学时 2 授课题目：实验十一 病毒学实验(二) 综合实验---流感病毒的分离与鉴定（二） 目的要求： 掌握：血凝试验和血凝抑制试验的原理及应用。 熟悉：尿囊液收获的方法。血凝试验和血凝抑制试验的方法、结果观察、血凝效价和血抑效价的判定。 了解： 重点难点： 血凝试验和血凝抑制试验的原理、方法、结果观察、血凝效价和血抑效价的判定。 教具与课件： PPT课件 课外作业：见课件 课后回忆（经验教训、效果估计或反应，存在问题……）： 系主任 201 年 月 日 25
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教学内容与组织安排： 课堂时间安排：讲授25min，示教操作15min，学生操作40min。 一、收获尿囊液（操作，1份/4人） 示教收获尿囊液的方法、讲解注意事项。 二、血凝试验：（操作，1份/2人）P112 ?材料?流感病毒尿囊液、0.5%鸡红细胞悬液、生理盐水、血凝板、1ml吸管等。 讲原理、操作方法、操作时的注意事项、结果观察、血凝效价判定的方法等。 三、血凝抑制试验(示教，2套/室)P113 ?材料?病人血清、4个单位的流感病毒血凝素、0.5%鸡红细胞悬液、生理盐水、血凝板、1ml吸管等。 讲原理、方法、结果观察、血抑效价的判定的方法等。 作业： 1、记录流感病毒血凝试验结果，判定血凝效价。 2、记录流感病毒血凝抑制试验结果，判定血凝抑制效价。
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