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录空白值。
(6)打开取样臂,用干净的吸水纸将上下基座上的空白对照溶剂擦干净。
3.2.3 样品测量
(1)打开取样臂,用移液枪吸取0.3~2μL待测样品滴加到检测平台上。 (2)合上取样臂。
(3)点击“Measure”按钮,软件将对样品自动进行检测。
(4)数秒后,样品的测量结果(数据值和图形)将出现在工作界面上。 如果您觉得结果有问题或扫面曲线不正常,原因可能是样品没有形成液柱,或者空白对照做得不好。请检查样品液柱是否形成,重新测量样品,或者重新测量空白对照,然后再测样品。
(5)当一个样品测量完后,如果想保存图形,请点击“Save Graph”按钮。 (6)打开取样臂,用干净的吸水纸将上下基座上的空白对照溶剂擦干净。 3.2.4 结果输出
全部样品测定结束后,点击“Show Report”按钮,已测定的数据结果将出现在Excel表中。
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4工作界面介绍
打开K5600软件,进入K5600超微量分光光度计的工作界面如下:
为了便于介绍,我们将工作界面分为五部分:菜单栏、测量类型选项区、图形显示区、数据显示区和测量功能区。下面我们对这五部分逐一进行介绍。 4.1 菜单栏
菜单栏中有“File”,“View”,“Tool”和“Help”四个主菜单。
File:“File”主菜单下有一个“Exit”菜单,点击“Exit”菜单将会退出程序。
View:“View”主菜单下含有“Auto Scale”,“Multi Draw”,“Show Grid”和“Color Solution”四个子菜单。
点击“Auto Scale”菜单可调整Y轴范围大小。点击“Auto Scale”会出现下面的对话框,用户可从这里输入Y轴最大值来调整Y轴范围,使图形在图形显示区内显示最佳效果。其默认设置是根据样品自动调节Y轴。
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点击“Multi Draw”菜单会同时显示前几次测量的样品的波形,用户可以由此比较相同样品的重复性或不同样品的变化。
点击“Show Grid”菜单将会出现背景网格或取消背景网格。
点击“Color Solution”菜单会弹出一个“Color Solution”对话框,可对图形显示区的颜色进行更改,如背景、测量线、扫描曲线等。但是,测量线和扫面曲线的颜色一定不要跟背景颜色一样。
Tool: “Tool”主菜单下含有 “Check Calibration”和“Dye Editor”子菜单。
点击“Check Calibration”菜单会出现一个“Check Calibration”对话框,点击“UV”可检测紫外光光强,点击“VIS”可检测可见光光强。
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点击“Dye Editor”,会弹出荧光染料信息表,包括荧光染料的吸光系数、吸收波长和260nm和280nm处的修正百分数。
Help: “Help”菜单将会解决您在软件使用中出现大部分问题。该菜单下有“About”和“Help”两个子菜单。
“About”是关于K5600的产品说明,如果您发现软件出现异常错误或终止运行,您可以在此菜单的对话框下点击Email地址直接发送Email至我们的工程师。当然您也可以通过点击Web地址来访问我们的网页。
点击“Help”子菜单将会打开K5600超微量分光光度计的使用说明书。
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4.2 测量类型选项区
测量类型选项区有“Nucleic Acid”,“Protein”,“UV-VIS”,“Cell Culture”,“Micro Array”和“Sample &Test Type”六项可供选择,其中“Sample &Test Type”是对前面五项的补充。用户可根据待测样品的类型来选择正确的测量类型。
Nucleic Acid:该类型用于测量核酸,这时,“Sample &Test Type”中又有“DS-DNA”,“SS-DNA”和“RNA”三个类型可供选择,可分别用来测量双链DNA、单链DNA和RNA的浓度和纯度。
Protein:该类型用于测量蛋白质,点击该项进入蛋白质测量界面,这时,“Sample &Test Type”中又有“A280”,“BSA”,“IgG”,“Lysozyme”,“Labels”,“BCA”、“Bradford”和“Lowry”8种类型可供选择。
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