碱基序列如果缺失，trp基因表达可提高6-10倍。mRNA合成起始以后，除非培养基中完全没有色氨酸，转录总是在这个区域终止，产生一个仅有140个核苷酸的RNA分子，终止trp基因转录。这个区域被称为弱化子，该区mRNA可通过自我配对形成茎-环结构。 顺式作用元件(cis-acting element)影响自身基因表达活性的非编码DNA序列。 断裂基因（splite gene）：真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。
基因的分子生物学定义：产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。 基因表达的时间特异性： 基因表达的空间特异性：
填空题
1、真核生物中反式作用因子的DNA结合结构域有：螺旋－转角－螺旋，碱性－螺旋-环-螺旋，锌指，碱性－亮氨酸拉链，同源域蛋白。
2、转录调节因子按功能可以分为：基本转录因子和特异转录因子。
3、真核生物有3类RNA聚合酶，负责转录rRNA基因的RNA聚合酶是：RNA聚合酶I 4、典型的原核启动子的四个特征是：转录起始位点，原核基因转录起始位点通常是嘌呤，-10区，-35区。 5、乳糖操纵子的结构结构基因有：lacZ，lacY，lacA。 选择题
1、在什么情况下，乳糖操纵子的转录活性最高（ A ）
A 高乳糖，低葡萄糖 B 高乳糖，高葡萄糖 C 低乳糖，低葡萄糖 D低乳糖，高葡萄糖 2、在真核基因表达调控中，( B )调控元件能促进转录的速率。
A 弱化子 B 增强子 C repressor D TATA Box 3、外显子是（ D ）
A 基因突变的表现 B DNA被水解断裂开的片段 C 不转录的DNA D真核生物基因的编码序列 4、关于外显子和内含子的叙述，正确的是（ C ）
A 仅外显子在DNA模板上有相应的互补序列 B hnRNA上只有外显子而无内含子序列 C 除去内含子及连接外显子的过程称为剪接 D 除去外显子的过程称为剪接 5、不属于转录后修饰的是（ C ）
A 腺苷酸聚合 B 5′端加帽子结构 C 外显子切除 D 内含子切除 6、AAUAAA序列是（ D ）
A 启动子的辨认序列 B 真核生物的转录终止点 C 真核生物的反式作用因子 D 真核生物转录终止修饰点 7、下列哪项不是真核生物转录后水平的调控机制（ D ）
A 5′端加帽和3′端多聚腺苷酸化 B mRNA选择性剪接 C mRNA运输的控制 D 外显子切除 问答题
1、乳糖操纵子的作用机制。 答：（1）乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z，Y，A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶，透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列O，一个启动子P和一个调节
基因I。
（2）阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。
（3）CAP的正性调节：在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高，与CAP结合,使CAP发生变构，CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点，激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。
（4）协调调节：乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制，互相协调，互相制约。
2、原核和真核生物基因表达调控的比较。
答：相同点：都具有转录水平的调控和转录后水平的调控，并且也以转录水平的调控最为重要；真核结构基因的上游和下游也存在着许多特异的调控成分，并依靠特异蛋白因子与这些调控成分的结合与否控制着基因是否转录
不同点：原核的染色质是裸露的DNA，而真核的染色质则是由DNA与组蛋白紧密结合形成的核小体。原核中染色质的结构对基因的表达没有明显的调控作用，而在真核中这种作用是明显的。在原核基因转录的调控中，既有激活物的调控，也有阻遏物的调控，二者等同重要。在真核生物中虽然也有正调控成分和负调控成分，但迄今已知的主要是正调控。
原核基因转录和翻译是偶联的，而真核生物的转录和翻译不是偶联的， RNA在细胞核中合成，只有经转运穿过核膜，到达细胞质后，才能被翻译成蛋白质。使得真核基因的表达有多种转录的调控机制。原核生物细胞内基因表达基本一致，且对于外界环境条件变化的反应也基本相同。真核生物大都是多细胞的复杂有机体，在个体发育中由一个受精卵逐步分化形成不同的细胞类型和各种组织，分化是不同基因表达的结果，在不同发育阶段和不同细胞类型中，基因的时空表达受到严密的调控。 32、真核生物转录后水平的调控机制？
（1）、5，端加帽和3，端多聚腺苷酸化的调控意义：5，端加帽和3，端多聚腺苷酸化是保持mRNA稳定的一个重要因素，它至少保证mRNA在转录过程中不被降解。 （2）、mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用 （3）、mRNA运输的控制
4、典型的DNA重组实验通常包含哪些步骤
（1）提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形成一个新的重组DNA分子。
（2）将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 （3）对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。
（4）对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 5、蓝-白筛选的原理？
某些质粒带有大肠杆菌的半乳糖苷酶基因片段，在半乳糖苷酶基因的基因区外又另外引入了一段含多种单一限制酶位点的DNA序列。这些位点上如果没有克隆外源性DNA片段，在质粒被导入lac-的大肠杆菌后，质粒携带的半乳糖苷酶基因将正常表达，与大肠杆菌的半乳糖苷酶基因互补，产生有活性的半乳糖苷酶，加入人工底物X-gal和诱导剂IPTG后，出现蓝色的菌落。如果在多克隆位点上插入外源DNA片段，将使lac Z基因灭活，不能生成半乳糖苷酶，结果菌落出现白色。由于这种颜色标志，重组克隆和非重组克隆的区分一目了然。