ZQ使用--waters液质联用仪的使用(4)

2020-04-17 20:34

a) 在溶剂和流速 页面,按如下设置:

1) 输入溶剂的比例。 2) 设置泵的运行时间。

Stroke Rate设置。 4) 输入泵的初始流速。

b) 在柱温设定

页面,按如下设置:

3) 对于典型的质谱流速 (50ul – 350ul) 在下拉菜单中选择 25 ul 为

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1) Temperature(℃) 设定柱温箱工作温度。

2) Temperature Limit(+/- ℃) 设定柱温箱温度允许范围。 3) High Pressure(Bar)

设定液相系统压力最高限,当系统压力超出范围

时,软件会自动停止泵的流速。

4) Pre-column Volume(选项) 输入系统滞后体积,对于2695系统,一般为

550ul,该参数只对梯度起作用。

c) 在

页面设定梯度表。

1) 设置梯度初始条件,按Insert Line编入梯度表,然后分别编辑、插入各项梯度条

件。 (curve 6是线性梯度变化)。

注意:梯度表的第一行的梯度曲线必须是Curve 1。

Insert Delete Delete Line Line Table 3. 如果你的液相色谱系统有样品加热和冷却装置,点击

样器吸样速度。

图标设定温度,并设定自动进

注意:自动进样器进样体积和瓶号不在这里设定,在样品表(Sample List)里编辑。

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4. 点击 设置 2996 二极管阵列检测器参数 。

a) Start Wavelength(nm) ,End Wavelength(nm) b) Resolution (nm)

波长采集范围

设定光谱分辨率,分辨率越高,数据量越大。通常,要看紫外光谱数

据时,光谱分辨率可以设到最高(1.2nm),如果只为了色谱定量,光谱分辨率可以设定到3.6nm或4.8nm,以减少数据量。同样,波长的采集范围也可以尽量缩小。 c) Sampling Rate

率。 d) Stop time

是指每个样品PDA的采集时间,这个时间一般应该与泵的运行时间和

质谱方法的数据采集时间一致。

e) 选择 Save to disk保证PDA数据被采集并存在电脑内。5. 选择 File – Save As 并输入液相方法的名称。 6. 点击状态

图标, 确认所有的状态灯是绿的。

将液相色谱通讯复

信号采集速率,采集速率越高,数据量越大。如果要保证对一个色谱

峰准确积分,通常这个色谱峰最少要有20个数据采集点拟和而成,以此来设定采集速

7. 如果液相通讯有问题,在液相方法编辑主菜单选择LC/

位。

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创建质谱方法

本单元介绍如何创建质谱采集方法。

1. 在Masslynx软件主界面点击质谱方法( MS Method )图标,界面。

进入质谱方法编辑

2. 创建全扫描方法(scan), 点击MS Scan图标 :

a. 输入需要扫描的质量数范围(Mass Range),过宽的质量扫描范围会减低灵敏度。

b. 输入质谱数据采集时间。

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c. 选择数据采集的方式,共有三种方式选择。

1. 对于产生单电荷的化合物,可以选择棒状图(Centroid )方式。 2. 对于产生多电荷的化合物,可以选择轮廓图(Continuum )方式。

d. 锥孔电压(Cone Voltage):

1. 如果希望能够得到分子离子峰,可以选择使用调谐窗口优化时所设置的条件,

。这时的锥孔电压会按照调谐窗口的设置执行。或者直

接在方法编辑窗口设定一个相对较低的锥孔电压。

2. 对于已经确定的分子离子峰,如果希望得到更多的碎片信息,可以选择使用较高的锥孔电压,(~ 40 – 70V)是一个较好的开始。

e. 设置扫描速率( Scan time),用你选择的质量数范围除以希望仪器所使用的扫描速率 (100-5000 DA/sec),即扫描速率

。虽然质谱的扫描速率可

以高达5000 DA/sec,但是使用过高的扫描速率,会造成较差的质谱分辨率及质量偏移,所以尽量将扫描速率控制在(500-1200DA/sec)之间。 f. 设定扫描间隔(Inter-scan Delay),一般设定为0.1 择正负离子同时扫描,扫描间隔要设为0.3。 g. 选择 OK,质谱条件将被列在表中。

h. 重复 a-e 步去建立多个正负离子扫描通道,最多可以建立32个采集通道,但过多的采集通道会降低灵敏度。

3. 创建选择离子采集模式,请选择 (SIR) 图标 模式有较高的灵敏度,用于定量计算。

,选择离子模式相对于全扫描

如果选

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