实验5 家兔离体肠肌活动的影响实验
【摘要】目的研究0.01%乙酰胆碱(Ach)、0.01%肾上腺素(E)、NaOH溶液、HCl溶液、25℃台氏液及缺氧条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法家兔离体小肠平滑肌标本的制备,生物信号采集处理系统记录在不同因素作用下张力曲线。常用统计学方法和统计学指标。结果滴加0.01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液后,肠肌运动张力和频率都增大;滴加0.01%肾上腺素(E)、1NHCl、肠肌运动张力和频率迅速降低;25℃台氏液刺激离体肠肌时,肠肌运动张力和频率先迅速下降后逐渐增大;停止通氧后,肠肌运动张力和频率逐渐降低。结论 0.01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液刺激能促进肠肌运动,0.01%肾上腺素(E)、1NHCl能抑制肠肌运动,短时低温能使肠肌运动稍降后又加强直至正常,缺氧使肠肌运动减弱。
关键词:HCl、NaOH、离体肠肌、乙酰胆碱、肾上腺素
目录
1.
实验材料和方法....................................................................................................................... 2 1.1. 实验材料 ....................................................................................................................... 2 1.2. 实验方法: ................................................................................................................... 2 2. 实验结果:............................................................................................................................... 4 3. 实验讨论(见附页)............................................................................................................... 5 4. 实验结论:............................................................................................................................... 5 5. 参考文献:............................................................................................................................... 5 附页 .................................................................................................................................................. 5
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1. 实验材料和方法 1.1. 实验材料
1.1.1. 实验动物:兔子(浙江中医药大学动物实验中心 )
1.1.2. 实验材料和器械:家兔,麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、铁支架、
电脑、、木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗等。
1.1.3. 实验药品:台氏液:(0.8%NaCl、0.02%KCl、0.026%MgSO477H2O、
0.0065%NaH2PO4、0.02êCl2、0.1%NaHCO3)、0.1%葡萄糖溶液。1:10 000肾上腺素、1:10 000乙酰胆碱、1NHCl、1NNaOH溶液。
1.2. 实验方法:
1.2.1. 准备好离体肠管描记装置,麦氏浴槽中加固定量(10ml-15ml)的台式液,
调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在39摄氏度上下。通气管接95%O2+5%CO2混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节到浴槽中气泡一个一个逸出为止。换能器输出线接微机生物信号处理系统,仪器参数:
RM6240系统:点击实验菜单中的“肠肌收缩记录”项,参数:通道时间常数为直流,滤波频率为10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描频率1s/div。
1.2.2. 离体小肠段的制备:
1.2.2.1. 准备两个小手术盘,一个小手术盘用于清洗肠内容物,另一小手术盘盛
预冷台氏液倒入中,其液体量已淹过小肠段为准。
1.2.2.2. 用持针器夹持手术圆针、穿线备用。
1.2.2.3. 取家兔一只,将其倒提,用木锤猛击后脑勺,使之昏迷,迅速进行以下操
作:将其仰卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长,打开腹壁,暴露腹腔,顺着胃找到与胃相连的十二指肠,沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约30cm,放入一小手术盘中,用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物,直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中,用手术刀刮去肠管外的血管和系
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膜,将小肠段切割成小段,每小段肠约2cm长,并在小段肠的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线,注意在操作过程中,每10分钟换一次预冷台氏液。
1.2.3. 取出固定架,将肠段的下端的线头尽量靠近固定架的小钩,并牢固地绑紧
在小钩上,将固定架放回内槽,小钩尽量靠近槽底,重新用张力微调器固定固定架,将空气泵重新连接至固定架,并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。
1.2.4. 将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢升降
拉线,保持线有一定紧张度,肠段、线应与地平面垂直,同时,肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。
1.2.5. 换液:打开灌流槽的内槽排水阀门,排去原来的台氏液,用注射器从恒温
水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中,其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流量调节旋钮,使气泡即细小、均匀,又不影响肠段的运动。 1.2.6. 实验观察:
1.2.6.1. 记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,向台氏液中加入1:10 000乙酰胆碱2
滴,观察小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。
1.2.6.2. 肠活动恢复后,向台氏液中加入1:10 000肾上腺素2滴,观察小肠活动的
改变, 待反应稳定后冲洗2遍, 再加入等量的37℃ ~ 38℃的台氏液。
1.2.6.3. 肠活动恢复后,向台氏液中加入1NNaOH 2滴,观察小肠收缩活动的改变,
待反应稳定后冲洗2遍。
1.2.6.4. 记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,观察其收缩活动的特点。向台氏液中
加入1NHCl盐酸2滴,观察小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。
1.2.6.5. 肠活动恢复后,将原37℃ ~ 38℃台氏液换成等量的25℃台氏液,观察肠
活动的改变, 待其活动改变明显时,冲洗1遍, 再加入等量的37℃ ~ 38℃的台氏液。
1.2.6.6. 待肠活动恢复后,停止空气泵的工作,观察肠活动的改变,待其收缩活动
改变明显时反应稳定后冲洗1遍,再加入等量的37 ℃~ 38℃的台氏液,空气泵描记一段肠段收缩活动恢复曲线后终止实验。
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1.2.6.7. 记录所得曲线。整理仪器。
2. 实验结果:
滴加0.01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液后,肠肌运动张力和频率都增大;滴加0.01%肾上腺素(E)、1NHCl、肠肌运动张力和频率迅速降低;25℃台氏液刺激离体肠肌时,肠肌运动张力和频率先迅速下降后逐渐增大;停止通氧后,肠肌
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运动张力和频率逐渐降低。
3. 实验讨论(见附页)
4. 实验结论:
0.01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液刺激能促进肠肌运动,0.01%肾上腺素(E)、1NHCl、25℃台氏液及缺氧等刺激因素能抑制肠肌运动。 5. 参考文献:
陆源、林国华、杨午鸣: 机能学实验教程(第二版) 科学出版社.北京
张志雄:生理学(第二版) 上海科学技术出版社.上海
附页
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