免疫思考题
4、淋巴细胞归巢：是指血液中的淋巴细胞选择性的趋向迁移并定居于外周免疫器官的特定区域或特定组织的过程。淋巴细胞表面不同的粘附分子与特定组织HEV表面的粘附分子的相互作用决定该细胞的去向。
5、淋巴细胞再循环：是指定居在外周免疫器官的淋巴细胞，由输出淋巴管经淋巴干、胸导管或右淋巴导管进入血液循环；经血液循环到达外周免疫器官后，穿越HEV，重新分布于全身淋巴器官和组织的反复循环过程。淋巴细胞再循环的生物学意义在于：①分布更加合理，有助于增强整个机体的免疫功能②增加与APC接触的机会，有利于适应性免疫应答的产生③使机体所以免疫器官和组织联系成为一个有机的整体，并将免疫信息传递给全身各处的淋巴细胞和其他免疫细胞，有利于动员各种免疫细胞和效应细胞迁移至病原体、肿瘤或其他抗原性异物所在的部位，从而发挥免疫效应。因此，淋巴细胞再循环是维持机体正常免疫应答并发挥免疫功能的必要条件。
6、固有分子模式概念及其特点:是启动和诱导固有免疫应答的物质（具有免疫原性，无免疫反应性）。在感染早期，位于机体皮肤粘膜表面的固有免疫细胞，通过模式识别受体对IMP（固有分子模式）进行泛特异性识别，介导以炎症效应为主的固有免疫及吞噬杀菌效应。或者清除衰老损伤细胞以维持生理平衡。包括病原体相关分子模式PAMP和损伤相关分子模式DAMP。特征：①为病原微生物所特有②为微生物生存和致病性所必须③可被固有免疫模式识别受体所识别。
7、影响抗原免疫原性的因素：一、抗原分子的理化与结构性质：①异物性②化学属性③分子量④分子结构⑤分子构象⑥易接近性⑦物理性状二、宿主的特性：①遗传因素②年龄、性别与健康状态。三、抗原进入机体的方式：皮内注射和皮下免疫途径荣誉诱导免疫应答，肌内注射次之，静脉注射效果较差，口服免疫则易诱导耐受。
8、比较不同的免疫刺激剂的区别：一、超抗原：某些抗原物质，只需极低浓度（1-10ng/ml）即可非特异性激活人体总T细胞库中2%-20%的T细胞克隆，产生极强的免疫应答。机制:Sag其一端直接与TCR的Vβ链结合，另一端则与APC表面的MHC-II类分子α螺旋外侧结合，以完整蛋白的形式激活T细胞，该激活不涉及抗原表位与MHC及TCR的识别，无MHC限制性，除非特异性激活T细胞，金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)等可非特异性激活B细胞;热休克蛋白（HSP）则可激活TCRγδ+T细胞。Sag所诱导的细胞应答，其效应并非针对超抗原本身，而通过非特异性激活免疫细胞，分泌大量炎症性细胞因子、导致中毒性休克，多器官功能衰竭等严重病理过程的发生。二、佐剂adjuvant：指预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的非特异性免疫增强性物质。机制：①改变可以物理性状，延缓抗原降解，延长抗原在体内的潴留时间②刺激抗原提呈细胞，增强其对抗原的加工和提呈③刺激淋巴细胞的增殖分化，增强和扩大免疫应答。佐剂作为非特异性免疫增强剂，已被广泛应用于预防接种疫苗的成分配置；还可用于抗肿瘤与抗感染的辅助免疫治疗添加剂。三、丝裂原mitogen：又称有丝分裂原，因可致细胞发生有丝分裂而得名，属于非特异性的淋巴细胞多克隆激活剂。丝裂原通过与淋巴细胞表面相应受体结合，刺激静止淋巴细胞转化为淋巴母细胞并进行有丝分裂，从而激活某一类淋巴细胞的全部克隆。 9、BCR多样性产生的机制：一、组合多样性combinational diversity:指在免疫球蛋白V/(D)/J基因片段重排时，只能在众多V/(D)/J基因片段中各取用一个，因而可产生众多V区基因片段组合。二、连接多样性junctional diversity:Ig基因片段之间的连接往往有插入、替换或缺失核苷酸的情况发生，从而产生新的序列，称为连接多样性。包括①密码子错位②框架移位③N序列插入 三、受体编辑：指一些完成基因重排并成功表达BCR(mIgM)的B细胞识别自身抗原后未被克隆清除，而是发生RAG基因的重新活化，导致轻链VJ再次重排，合成新的轻链，替代自身反应性轻链，从而使BCR获得新的特异性。四、体细胞高频突变：somatic
hypermutation体细胞高频突变形成的多样性是在已完成Ig重排的基础上的，成熟B细胞在外周淋巴器官生发中心接受抗原刺激后发生。体细胞高频突变的方式是编码V区CDR部位的基因序列发生碱基的点突变。体细胞高频突变不仅能增加抗体的多样性，而且可导致抗体的亲和力成熟。
10、B细胞表面主要分子及功能：（1）BCR复合物：膜表面Ig（BCR），功能：V区特异性结合抗原，与Igα、Igβ，功能：1）信号转导——活化信号，参与Ig从胞内向胞膜的转运。（2）B细胞共同受体：CD19/CD21/CD81/CD225，作用：使BCR与辅助受体交联,CD19胞内酪氨酸激酶活化促进增殖。（3）协同刺激分子：CD40、CD27、CD70、CD80和CD86，1）CD40/CD40L，提供B细胞激活的第二信号。2)CD80和CD86，(B7-1,2)/CD28，提供T细胞激活的第二信号；（4）丝裂原的结合分子：（5）Fc受体（6）细胞因子受体（7）其他表面分子：CD45 ，MHC，丝裂原受体，细胞因子受体。
11、B细胞识别特点：BCR是B细胞识别特异性抗原的受体。BCR对抗原的识别与TCR识别抗原有所不同：①BCR不仅能识别蛋白质抗原，还能识别多肽、核酸、多糖类、脂类和小分子化合物；②BCR可特异性识别完整抗原的天然构象，或识别抗原降解所暴露的表位的空间构象；③BCR识别的抗原无需经APC的加工和处理，也无MHC限制性。 12、B细胞活化的信号转导概念：B细胞特异性活化的需要双信号（一）活化信号1 (抗原特异性识别信号)第一活化信号由Igα/Igβ将信号传递到B细胞内（二）活化信号2，活化Th2与B细胞间协同刺激分子相互作用（三）细胞因子(IL-1、 IL-4等)。
13、B细胞各亚群？1）根据对抗原的刺激状态分类：初始B细胞、活化B细胞、记忆B细
1+2-12
胞；2）根据CD5分子表达与否分类：B细胞（CD5）、B细胞（CD5）；3）B细胞与B细胞的比较：B1细胞表达CD5分子，自我更新，自发性IgG产生高，针对的是碳水化合物类的抗原，分泌的IgM＞IgG,具有多反应性，体细胞高频突变低，免疫记忆很少；B细胞不表达CD5分子，由骨髓产生，自发性IgG产生低，针对的是蛋白质类抗原，分泌的IgG＞IgM，单特异性，体细胞高频突变高，免疫记忆高。
14、B细胞的功能？B1细胞的功能：产生抗菌抗体、产生多反应性自身抗体、产生致病性自身抗体；B2细胞的功能：产生抗体行使体液免疫功能、抗原提成功能、免疫调节功能； 13、T细胞免疫应答的基本过程？识别阶段——即抗原识别和递呈阶段，指APC对抗原的摄取、加工并递呈给T、B细胞识别；活化增殖分化阶段——T、B细胞识别相应抗原刺激后活化、增殖和分化的阶段；效应阶段——指产生特异性抗体或致敏淋巴细胞发挥免疫效应和进行免疫调节的阶段。调节复原。
14、T细胞的阳性选择和阴性选择及意义？阳性选择：双阳性T细胞的TCR与胸腺皮质内上皮细胞表达的MHC分子有效结合，该DP细胞继续发育，未结合者发生程序性死亡，从而获得T细胞MHC限制性识别能力。这一过程，称T细胞发育的阳性选择；阴性选择：经阳性选择后存活的单阳性T细胞通过表面TCR，在皮髓交界处，与胸腺树突状细胞和巨噬细胞表面自身肽—MHC-I/II类分子复合物结合而发生程序性死亡或成为失能；称为T细胞发育的阴性选择。意义：A.获得自身耐受性 B.具有识别非己抗原能力的T细胞成熟。 15、抗原提呈细胞种类？
根据APC表面膜分子表达的特点和功能的差异分：*专职APC：（表达MHC-Ⅱ),DC、单核巨噬细胞、活化的B细胞。*非专职APC：内皮细胞、上皮细胞、纤维母细胞及脑内小胶质细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞的靶细胞等。
16、T细胞的重要表面分子及其作用？（1）T细胞受体复合体，TCR-CD3复合物，识别抗原功能:TCR V区与抗原肽-MHC分子复合物结合，CD3分子参与信号转导（2）T细胞辅助分子-共受体，分子结构：受MHC限制性；CD4/CD8功能:1）辅助TCR识别抗原 2）参与T细胞活化 3）信号转导（3）协同刺激分子受体：CD28/CTLA-4配体OCOSL。CD2配体
2
CD58。LFA-1配体ICAM-1,2,3。OCOS配体ICOSL（4）丝裂原结合分子，参与T细胞活化（5）细胞因子受体.
17、T细胞各亚群的特性？分类方法多种(1).根据活化阶段分类：A、初始T细胞：参与再循环，识别抗原，但无效应功能。B、效应T细胞：不参与再循环,迁移外周发挥免疫效应。C、记忆T细胞：表达CD45RO、黏附分子（整合素和CD44），参与再循环。(2).根据TCR双肽链组成分类:A、TCRαβT细胞识别抗原具多样性和特异性。MHC限制性，只识别MHC分子呈递的抗原肽。B、TCRγδT细胞: CD4-及CD8-,少数CD8+。分布:黏膜上皮层、外周血。很少进入再循环。TCR多样性有限，抗原识别谱相对窄。识别抗原无MHC限制性；(3).根据CD4和CD8表达分类:CD4+T细胞：表型3+4+8-，识别抗原肽13-17AA，MHCII类分子，Th+++，Tr-；CD8+T细胞 .：表型3+4-8+，识别抗原肽8-10AA，MHCI类分子，Th-,Tr+++（4).根据T细胞效应功能分类:辅助性T细胞，细胞毒性T细胞，调节性T细胞。 18、T细胞的功能？一、CD4+Th细胞免疫效应功能:1、Th1细胞：分泌IL-2、IFN-r、IL-12.参与细胞免疫、迟发型超敏反应；抗胞内病原体感染；抗肿瘤；移植排斥反应；器官特异性自身免疫病（类风湿性关节炎和多发性硬化病与Th1分泌CK有关）.2、Th2细胞：分泌细胞因子(IL-4、5、6、9、10、13)促进B细胞增殖、分化和产生抗体；参与Ⅰ型超敏反应；参与免疫调节；参与自身免疫病（特应性皮炎和支气管哮喘与Th2分泌CK有关） .二、CD8+ 杀伤性T细胞（CTL或Tc）: MHC-I类分子限制性T细胞，特异性介导靶细胞裂解或凋亡.机制：1、释放穿孔素，致靶细胞裂解、死亡;释放颗粒酶，借助穿孔素的穿孔作用进入靶细胞，导致细胞凋亡. 2、高表达FasL，通过Fas/FasL途径导致靶细胞凋亡.3、其它效应机制（IFN-γ，TNFα/β） 参与抗病毒免疫、抗肿瘤免疫、移植排斥反应和免疫调节等。三、CD4+ CD25+Treg调节性细胞:免疫负调节作用,免疫耐受中发挥作用,抑制CD4+ 、 CD8+ T细胞活化、增殖,抑制B细胞的功能,抑制APC抗原提呈. 作用机制：细胞间直接接触。 17、CD4+T细胞杀伤靶细胞过程、机制及特点？第一信号：抗原特异性信号：TCR——Ag肽-MHCⅡ分子复合物；CD4——MHC-Ⅱ类分子。通过CD3向胞内传递第一信号 ——表达高亲和力IL-2R。第二信号：协同刺激信号：CD28—— B7（CD80、CD86）；CD2（LFA-2）——CD58（LFA-3）；LFA-1 ——ICAM-1——表达IL-2。缺乏第二信号，T细胞无能（anergy）。 18、CD8+CTL杀伤靶细胞的过程、机制及特点？第一信号：TCR——Ag肽-MHCⅠ分子复合物
CD8——MHC-Ⅰ类分子；通过CD3向胞内传递第一信号。第二信号：CD28——B7；CD2——LFA-3
；LFA-1——ICAM-1；CD4+T细胞的辅助。
19、超敏反应的概念、分型：超敏反应是机体受到某些抗原刺激时出现生理功能紊乱或组织细胞损伤等异常的适应性免疫应答。
21、抗体产生的一般规律：①初次应答：当抗原初次进入机体时，需首先刺激有限的特异性细胞克隆繁殖才能达到足够的反应细胞数，表现为经一定时间的潜伏期才能在血液中检出抗体。特点：潜伏期长；产生的抗体浓度低；在体内持续时间短；抗体与抗原的亲和力低，以IgM为主。②再次应答：当相同抗原再次进入机体后，原有抗体与抗原结合，使抗体效价迅速增加，并活化记忆B细胞。特点：潜伏期短，一般为1-3天，血液中即出现抗体；产生的抗体浓度高；在体内持续时间长；抗体与抗原的亲和力高，以IgG为主。
22、免疫球蛋白的功能：1）5种免疫球蛋白的作用：①IgG：IgG的特性和功能：血清中的主要抗体成分；易扩散；半寿期长；出生后3个月开始合成，3—5岁接近成人水平；是唯一能通过胎盘的Ig，发挥自然被动免疫功能；具有活化补体经典途径的能力（IgG3>IgG1>IgG2）；具有调理作用、ADCC作用和结合SPA等；多数抗菌、抗病毒、抗
毒素抗体均属IgG类;参与Ⅱ型、Ⅲ型超敏反应，某些自身免疫病的抗体也属IgG。②IgM:IgM的特性和功能：为五聚体，分子量最大，称为巨球蛋白；个体发育中最先出现的Ig，胚胎晚期即能产生，脐带血IgM增高提示胎内感染抗原初次刺激机体时，是体内最先产生的Ig；血清IgM升高说明有近期感染；有强大激活补体能力和调理作用，在机体早期免疫防御中具有重要作用；天然血型抗体是IgM；未成熟B细胞仅表达mIgM，记忆B细胞mIgM消失；参与Ⅱ型、Ⅲ型超敏反应，某些自身免疫病的抗体也属IgM。③IgA:IgA的特性和功能：分为单体的血清型和二聚体的分泌型IgA；sIgA 主要由粘膜相关淋巴组织产生，存在于唾液、泪液、乳汁及呼吸道、消化道、泌尿道的分泌液中和粘膜表面，是机体粘膜局部抗感染免疫的重要因素；④IgD:膜结合型IgD构成BCR，是B细胞分化发育成熟的标志，未成熟B细胞仅表达mIgM，成熟B细胞可同时表达，称为初始B细胞；活化的或记忆B细胞其表面的mIgD逐渐消失。不能通过胎盘，不能激活补体。⑤IgE:在种系进化中最晚出现，是正常人血清中含量最少的Ig。可引起机体的I型超敏反应，也可能与机体抗寄生虫免疫有关。2）免疫球蛋白V区和C区的作用：V区的主要功能是特异性结合抗原，从而中和毒素、阻断病原入侵；C区则在V区与特异性抗原结合后，通过激活补体和与靶细胞表面的FC受体结合后，发挥调理作用、ADCC效应、介导超敏反应和穿越胎盘等作用。
23、体液免疫应答的生物学效应：①游离病毒、中和作用、激活补体、调理作用②溶解细胞③促进吞噬病原体④ADCC杀伤靶细胞⑤sIgA阻止局部抗原侵入黏膜，清除非己抗原⑥引起I/II/III型超敏反应。
22、粘膜免疫系统的功能特点？
（1）参与粘膜局部免疫应答：在粘膜部位构成一道免疫屏障，是参与局部免疫应答的主要部分，在局部抗感染免疫防御中发挥了关键作用（2）产生大量分泌型IgA，经粘膜上皮细胞分泌至粘膜表面，成为粘膜局部抵御病原微生物的主要机制（3）口服抗原街道免疫耐受 24、免疫细胞组成？
（1).固有免疫细胞吞噬细胞：树突状细胞DC；自然杀伤细胞 NK细胞 ；B1细胞；γδT细胞；NKT细胞。（2).适应性免疫细胞：T淋巴细胞；B淋巴细胞。（3）.造血干细胞。（4）.其它免疫相关细胞：B-1细胞；NKT细胞；γδT细胞
25、补体激活三条途径的异同及生物学意义？ 1）经典激活途径：（1）激活物：主要是由IgG或IgM类抗体与相应抗原结合形成的免疫复合物。（2）参与成分：C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9。（3）激活过程：分为识别阶段、活化阶段、膜攻击阶段。（4）激活顺序：依次为C1、C4、C2、C3、C5--C9。 （5）转化酶：C3转化酶：C4b2b；C5转化酶：C4b2b3b。 （6）生物学作用：可在特异性免疫的效应阶段发挥作用。C5转化酶裂解C5后形成膜攻击复合物，最终溶解靶细胞；补体裂解形成的小片段C4a、C2a、C3a在血清等体液中可发挥多种生物学效应。 2）旁路激活途径：（1）激活物：主要是病原体胞壁成分，如脂多糖、肽聚糖、磷壁酸等。（2）参与成分：除C3、C5、C6、C7、C8、C9外，还有B因子、D因子、P因子等。（3）激活过程：首先激活C3，然后完成C5--C9的活化过程。（4）激活顺序：依次为C1、C4、C2、C3、C5--C9。 （5）转化酶：C3转化酶：C3bBb；C5转化酶：C3bBb3b或C3bnBb 。（6）生物学作用：参与非特异性免疫，在感染早期发挥重要作用。其生物学效应与经典途径相似。3）MBL激活途径：（1）激活物：表面具有甘露糖、葡萄糖的病原微生物。（2）参与成分：MBL、C反应蛋白、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9。（3）激活过程：A、MBL：MBL激活起始于炎症急性蛋白与病原体的结合。MBL与病原体表面的甘露糖等糖类配体结合后，激活与之相连的MBL相关的丝氨酸蛋白酶（MASP）。MASP2与C1s活性相似，其激活补体的过程与经典途径相似；MASP1具有C3转化酶活性，其激活补体过程与旁路途径相似。B、C反应蛋白：C反应蛋白与C1q结合使之活化，激活过程与经典途径相似。（5）转化酶：
C3转化酶、C5转化酶与经典途径相同。（6）生物学作用：参与非特异性免疫，在感染早期发挥重要作用。其生物学效应与经典途径、旁路途径相似。
26、树突状细胞及其主要生物学作用？ 简称D细胞（DC），因成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名，免疫系统中的“卫兵”，能激活T细胞，并让白细胞识别、记忆并攻击入侵病原。 作用： DC是目前已知功能最强大的专职抗原提呈细胞，具有强大的活化初始T细胞能力，参与T、B细胞的分化、发育，参与调节B细胞发育、分化及激活，参与固有免疫应答，树突状细胞诱导免疫耐受，防治移植排斥反应方面中的作用，已成为目前器官移植领域研究的热点。 27、补体的生物学功能？
1）补体介导的细胞溶解：补体激活形成的膜攻击复合物可使细菌和细胞溶解破坏，这在抗感染免疫和免疫病理过程中具有重要意义。2）调理作用：补体裂解产物C3b/C4b通过N端非稳定结合部位与细菌等颗粒性抗原或免疫复合物结合后，再通过C端稳定结合部位与表面具有相应补体受体的吞噬细胞结合，由此而产生的促进吞噬的作用称为补体的调理吞噬作用。3）.免疫粘附作用：C3b/C4b与细菌等颗粒性抗原或免疫复合物结合后，再与表面具有相应补体受体的血红细胞或血小板结合，则可形成大分子复合物，此即补体的免疫粘附作用。免疫粘附形成的大分子聚合物易被吞噬清除，在抗感染免疫和清除免疫复合物过程中具有重要意义。4）炎症介质作用：（1）C2a具有激肽样作用，能使血管扩张，通透性增加，引起炎性渗出和水肿。（2）C3a、C4a和C5a具有过敏毒素作用，能使肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒，释放组胺等血管活性物质，引起血管扩张，通透性增强，平滑肌收缩和支气管痉挛等症状。（3）C3a和C5a有趋化作用，能吸引中性粒细胞和单核-吞噬细胞向炎症病灶部位聚集，发挥吞噬作用，释放炎性介质引起或增强炎症反应。
28、ELISA试验包括哪些？及常用的两种酶是什么？各有何优缺点？1）间接法、三明治法、竞争法。2）碱性磷酸酶：五毒便宜，适合低水平试验；辣根过氧化物酶：比碱性磷酸酶有更多种类的试剂盒，某些底物和产物致癌。
29、间接法ELISA法技术测定抗体的原理和检测方法？
是将酶标记在二抗上，当抗体（一抗）和包被在酶标板的抗原结合形成抗原-抗体复合物后，再以酶标二抗和复合物结合，通过测定酶反应产物的颜色可以（间接）反映一抗和抗原的结合情况，进而计算出抗原或抗体的量。该方法可用于抗体检测，是目前检测抗体最常用的ELISA方法。
30、双抗夹心法ELISA技术测定抗原的原理和检测方法？
双抗夹心法是先将未标记的抗体包被在酶标板上，用于捕获抗原，在用酶标的抗体与抗原反应形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，加入酶反应底物，测定产物的吸光值，计算出捕获的抗原量，本方法也称为直接夹心法 。 该方法可用于抗原检测，例如细胞因子、激素、蛋白质、细菌、病毒等，是目前检测抗原最常用的ELISA方法。
31、ELISPOT检测技术的原理？
细胞受到刺激后局部产生细胞因子，此细胞因子被特异单克隆抗体捕获。细胞分解后，被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗结合，其后再与酶标记（例如碱性磷酸酶）的亲和素结合。底物（BCIP/NBT即5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸 /氮蓝四唑 ，产物为蓝紫色）孵育后，PVDF 孔板出现“紫色”的斑点表明细胞产生了细胞因子，通过 酶联斑点分析系统对斑点分析后得出结果。
32、自身免疫的典型疾病有哪些？发病机制如何？
1）系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosis SLE）是一种累及多器官、多系统的小血管及结蹄组织疾病。发病机制：抗核抗体+细胞核成分→免疫复合物→沉积在肾小球、关节、心血管结蹄组织→中性粒细胞浸润炎症。2）类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）机