第8章 翻译
一、填空题 1.氨酰tRNA合成酶 可使每个氨基酸和它相对应tRNA分子相耦联形成一个 氨酰tRNA 分子。
2. 核糖体 包括两个tRNA分子的结合位点: 肽酰tRNA结合区 ,即P位点,紧密结合与多肽链延伸属端连接的tRNA分子; 氨酰tRNA结合区 ,即A位点,结合带有一个氨基酸的tRNA分子。
3.肽酰转移酶 催化肽键的形成,一般认为这个催化反应是由核糖体大亚基上的rRNA 分子介导的。
4.释放因子蛋白与核糖体上A位点的 终止 密码结合,导致肽基转移酶水解连接新生多肽与tRNA分子的化学键。
5.任何mRNA序列能以三种 可读框 的形式被翻译,而且一种都对应一种完全不同的多肽链。
6.蛋白质合成的起始过程很复杂,包括一系列被 起始因子 催化的步骤。
7.在所有细胞中,都有一种特别的 起始tRNA 识别 起始 密码子AUG,它携带一种特别的氨基酸,即 甲硫氨酸 ,作为蛋白质合成的起始氨基酸。
8.核糖体沿着mRNA前进,它需要另一个延伸因子 EF-G ,这一步需要 GTP 的水解。当核糖体遇到终止密码( UAG 、 UGA 、 UAA )的时候,延长作用结束,核糖体和新合成的多肽被释放出来。翻译的最后一步被称为 终止 ,并且需要一套 释放 因子。
9. 氨酰tRNA合成酶 “补充”tRNA分子,而 肽酰转移酶 催化肽链的合成。 10.假定摆动假说是正确的,那么最少需要 32 种tRNA来翻译61种氨基酸密码子。 11.胶原蛋白通过在不同的脯氨酸残基上添加 羟基 基团而被化学修饰。这个反应是由两种酶催化的,它们是 脯氨酰-3-羟基化酶 和 脯氨酰-4-羟基化酶。其他的一些蛋白质被则叫作 蛋白激酶 磷酸化。蛋白质添加寡聚糖的过程叫作 糖基化作用 ,而添加脂肪酸链则叫作 酰基化作用 。O-寡聚糖是一种同 丝氨酸 或 苏氨酸 残基上氧连接的寡聚糖,而N-寡聚糖是通过与 天冬酰胺 上的氮原子连接而成。N-寡聚糖又是从同一种叫作 常醇 脂的前体寡聚糖衍生而来。
12.阿黑皮素原是 多聚蛋白 被切割以后可以产生很多活性蛋白质的一个例子。如 骨髓灰质炎病毒之类的RNA病毒也能合成类似的结构物。蛋白质水解过程也涉及细胞外毒素的活性,如蜜蜂的 布鲁菌素 和动物激素的活性,如 胰岛素 和 胰高血糖素 。
二、选择题(单选或多选)
1.氨酰tRNA分子同核糖体结合需要下列哪些蛋白质因子参与?( B、D、E ) A.EF-G B.EF-Tu C.EF-Ts D.eIF-2 E.EF-1 2.在真核生物细胞中,翻译的哪一个阶段需要GTP?( B、C ) A.mRNA的5′端区的二级结构解旋 B.起始tRNA同核糖体的结合
C.在延伸的过程中,tRNA同核糖体的结合 D.核糖体的解体 E.5′帽子结构的识别
3.下列关于原核生物转录的叙述中正确的是( A、D、E )。
A.核糖体的小亚基能直接同mRNA作用
B.IF-2与含GDP的复合物的起始tRNA结合 C.细菌蛋白质的合成不需要ATP
D.细菌所有蛋白质的第一个氨基酸是修饰过程的甲硫氨酸 E.多肽链的第一个肽键的合成不需要EF-G
4.下面关于真核生物翻译的叙述中正确的是( A、E )。 A.起始因子eIF只有同GTP形成复合物才起作用
B.终止密码子与细菌的不同
C.白喉毒素使EF-1 ADP-核糖酰化 D.真核生物蛋白质的第一个氨基酸是修饰过程的甲硫氨酸,在蛋白质全盛完成之后,它马上被切除
E.真核生物的核糖体含有两个tRNA分子的结合位点 5.下列叙述不正确的是( A )。 A.共有20个不同的密码子代表遗传密码 B.色氨酸和甲硫氨酸都只有一个密码子 C.每个核苷酸三联体编码一个氨基酸 D.不同的密码子可能编码同一个氨基酸 E.密码子的第三位具有可变性 6.起始因子IF-3的功能是( B )。 A.如果同40S亚基结合,将促进40S与60S亚基的结合
B.如果同30S亚基结合,将促进30S与50S亚基的结合
C.如果同30S亚基结合,促进30S亚基的16S rRNA与mRNA的SD序列相互作用 D.指导起始tRNA进入30S亚基中与mRNA结合的P位点 E.激活核糖体的GTP酶,以催化与亚基相连的GTP的水解 7.真核起始因子eIF-3的作用是( B )。 A.帮助形成亚基起始复合物(eIF-3、GTP、Met-tRNA、40S)
B.帮助亚基起始复合物(三元复合物、40S)与mRNA 5′端的结合 C.若与40S亚基结合,防止40S与60S亚基的结合 D.与mRNA 5′端帽子结构相结合以解开二级结构
E.激活核糖体GTP酶,使亚基结合可在GTP水解时结合,同时释放eIF-2 8.核糖体的E位点是( B )。 A.真核mRNA加工位点 B.tRNA离开原核生物核糖体的位点
C.核糖体中受EcoR I限制的位点 D.电化学电势驱动转运的位点
9.下列关于核糖体肽酰转移酶活性的叙述正确的是( A、B、E )。 A.肽酰转移酶的活性存在于核糖体大亚基中(50S或60S)
B.它帮助多肽链的C端从肽酰tRNA转到A位点上氨酰tRNA的N端
C.通过氨酰tRNA的脱乙酰作用,帮助氨酰tRNA的N端从A位点移至P位点中肽酰tRNA的C端
D.它水解GTP以促进核糖体的转位 E.它将肽酰tRNA去酰基
10.核糖体肽链的合成因( B、D )而终止。
A.可读框内编码C端氨基酸的密码子
B.可读框内存在不对应氨酰tRNA的密码子 C.浓度太低工缺少特定的氨酰tRNA
D.释放因子(RF)的GTP依赖性作用,防止A位点中终止密码子与氨酰tRNA的错配结合
E.末端氨酰转移酶的活性,这个酶蛋白通过将一个赖氨酸或精氨酸残基加到新生多肽C端将肽酰tRNA脱乙酰化
11.下列复合物中哪些不是起始反应的产物?( B ) A.GTP+Pi B.ATP+Pi C.装配好的核糖D.起始因子 E.多肽
体
12.反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性(摇摆性)?( A ) A.第一个 B.第二个 C.第三个 D.第一个与第二个 E.第二个与第三个 13.GAUC四个碱基中,在密码子的第三位上缺乏特异性的是( B )。 A.G B.A C.U D.C E.它们通常都有独特的含义 14.“同工tRNA”是( C )。 A.识别同义mRNA密码子(具有第三碱基简并性)的多个tRNA
B.识别相同密码子的多个Trna C.代表相同氨基酸的多个tRNA D.由相同的氨酰tRNA合成酶识别的多个 tRNA E.多种识别终止密码子并导致读的tRNA
15.氨酰tRNA合成酶催化tRNA负载的氨基酸是否正确,由( E )来判断。 A.化学校正(非相关的氨酰腺苷酸被水被)
B.动力学校正(非相关氨酰腺苷酸迅速解体) C.tRNA D环中的特征序列 D.氨基酸乙酰化反应的特异性
E.氨酰tRNA合成后能否能进入核糖体A位点
16.氨酰tRNA合成的数量由( A、B )。 A.存在的tRNA的数量所决定 B.可翻译的mRNA密码子的数量所决定
C.由所用的氨基酸数量所决定 D.各个物种的种类所决定 17.下列有助于抑制功能的是( B、C、D、E )。 A.使用tRNA类似物,如嘌呤霉素 B.在tRNA修饰酶的结构基因中引入
点突变
C.在氨酰tRNA合成酶结构基因引入点突变
D.提高tRNA阻抑物的竞争效率(如与释放因子和正确的tRNA的竞争力) E.在编码tRNA的基因的反密码子区中引入点突变
18.密码子反密码子间的相互作用构成了翻译准确度的一个薄弱点,在体内它受以下因素
控制( B )。 A.tRNA与A位点结合时,对大亚基蛋白质的选择性
B.核糖体依赖于密码子侧翼序列产生的不同前进速度 C.延伸因子与糖体A、P位点相互作用的特异性
D.tRNA与A位点结合时,对小亚基蛋白质的选择性 E.释放因子与tRNA的竞争
19.以下哪些不是遗传密码的特征?( A )
A.密码子与氨基酸的数量相同 B.密码子几乎在任一物种中都通用 C.一些氨基酸由多个密码子编码 D.密码子是简并的
20.Yanofsky通过研究( )中( )的生物合成机制,破解遗传密码。( C ) A.沙门杆菌,亮氨酸 B.肺炎克氏杆菌,苯丙氨酸 C.大肠杆菌,色氨酸 D.塞氏杆菌,甘氨酸 21.细菌核糖体由( )及( )亚基组成。 ( B ) A.20S,40S B.30S,50S C.40S,60S D.50S,70S E. F. 22.反密码子的化学性质属于( A )分子。 A.tRNA B.m RNA C.r RNA D.DNA 15.正常情况下,同乙酰化蛋白质氨基末端的甘氨酸相连的脂肪酸是( D )。 A.软脂酸 B.油酸 C.十四酸盐(肉豆蔻酸盐) D.乙酰基 E.以上都对
16.在阿黑皮素原中被识别和切割的氨基酸残基是( C )。 A.赖氨酸和精氨酸 B.谷氨酰胺和甘氨酸
C.赖氨酸和天冬氨酰胺 D.天冬酰胺和赖氨酸
E.A和B,其中A是丙氨酸、天冬氨酸或甘氨酸,B是丙氨酸或脯氨酸
三、判断题
1.在tRNA分子中普遍存在的修饰核苷酸是在掺入tRNA转录物结合前由标准核苷酸共价修饰而来。(错误)
2.如果tRNATyr的反密码子发生单个碱基变化且成为丝氨酸的反密码子,这种tRNA被加入到无细胞系统,所得的蛋白质在原来应为丝氨酸的位置都变成了酪氨酸。(错误)(单个碱基转变后,tRNATyr识别两个丝氨酸密码子,UCU/C)
3.在肽链延伸的过程中,加入下一个氨基酸比加入氨酰tRNA更能激活每个氨酰tRNA间的连接。(正确)
4.摇摆碱基位于密码子的第三位和反密码子的第一位。(正确)
5.核糖体小亚基最基本的功能是连接mRNA与tRNA,大亚基则催化肽键的形成。(正确) 6.蛋白质合成时,每加入一个氨基酸要水解4个高能磷酸键(4个/密码子),所消耗的总能量比起DNA转录(每加入一个核苷酸用两个高能磷酸键,6个/密码子)要少。(错误) 7.因为AUG是蛋白质合成的起始密码子,所以甲硫氨酸只存在于蛋白质的N端。(错误) 8.通过延缓负载tRNA与核糖体结合以及它进一步应用于蛋白质合成的时间,可使与不适当碱基配对的tRNA离开核糖体,提高蛋白质合成的可靠性。(正确) 9.延伸因子eFF-1α帮助氨酰tRNA进入A位点依赖于ATP内一个高能键的断裂。(错误) 10.三种RNA必须相互作用以起始及维持蛋白质的合成。(正确) 11.G-U碱基负责fMet- tRNA对GUG的识别。(错误) 12.无义密码子同等于终止密码子。(正确) 四、简答题
1.N-甲酰甲硫氨酸- tRNA的功能是什么? 答:
N-甲酰甲硫氨酸-tRNA(fMet-tRNA)是原核细胞的起始氨酰tRNA,能够识别AUG和GUG作为翻译起始密码子,与IF-2结合成复合体进入小亚基的P位点。
2.解释核糖体肽基转移反应。 答:
肽基转移酶的活性区位于大亚基,邻近肽酰tRNA的氨基酸茎、核糖体P位点和A位点。催化即转移并将多肽链与在A位点的氨酰tRNA氨基基因共价结合是由大亚基rRNA负责。然而,许多大亚基的蛋白质是必需的。 3.简述真核细胞中翻译终止的过程。 答:
由于氨酰tRNA上没有反密码子能够与三个终止密码子互补配对,因此翻译终止。终止并需要tRNA的协助,此时没有氨基酸能够连接到位于P位点的肽酰tRNA上。释放因子(eRF)有助于终止的发生,可能使tRNA上的氨基酸C端不需要转肽基和脱酰基而发生转位。新生肽直接从P位点离开核糖体并进入细胞质(细胞质核糖体)或进入转位酶通道(内质网核糖体)。
4.真核与原核核糖体的主要区别是什么? 答:
真核细胞80S核糖体中核糖体蛋白和rRNA数量和体积比原核细胞70S核糖体的大,其体积约为原核的2倍。真核细胞的大小亚基(即40S和60S)均比原核细胞的大(原核细胞为30S和50S)。在两种细胞的核糖体中,rRNA占了绝大部分体积,原核细胞的RNA含量则比真核细胞高。原核细胞核糖体有E位点便于脱酰tRNA的离开。 5.简述真核与原核细胞中翻译起始的主要区别。 答:
原核细胞与真核细胞翻译起始的主要区别是来自mRNA的本质差异以及小亚基与mRNA起始密码上游区结合的能力。原核细胞mRNA较不稳定,而且是多顺反子,在IF-3介导下,通过16S rRNA的3′端在核糖体结合位点与小亚基直接结合后,原核细胞翻译起始复合物(IF-3、30S、mRNA、IF-2、GTP、fMet- tRNA)就装配起来了。而在真核细胞中,需要几种起始因子(eIf-4、4A、4B)帮助mRNA启动,起始复合物(SIC、40S亚基、eIF-2、GTP、Met、tRNA)才能结合(在eIF-4和eIF-3因子的促使下)到mRNA帽子上。一旦结合,SIC开始向mRNA下游区搜索,直至找到第一个AUG密码子。
6.氨酰tRNA合成酶的功能是什么? 答:
两个类型的10种氨酰tRNA 合成酶各自对应一种功能性氨酰tRNA 。通过两步反应,特定的氨基酸先通过磷酸化与氨酰AMP结合,然后与相关的tRNA 结合(磷酸二酯键的断裂),这一反应的精确性是mRNA遵循遗传密码进行翻译的基础。
7.有两个系统发育上十分接近的物种,它们染色体中的(G+C)%含量不同,A株(G+C)含量为55%而B株是68%。同源及异源转化/重组实验表明:来自(G+C)%低的DNA易于转化入(G+C)%高的生物体/基因组中,反之则不然。请说明原因。 答:
在AT含量高的生物中密码子的第三位突变漂移倾向于较高A+T含量,而在GC含量高的生物中则倾向于较高的G+C含量。外源DNA的重组似乎与此相似。基因组间密码子使用与不同的tRNA种类丰度有关,倾向于翻译效率高和准确性高的特定密码子。 8.根据翻译过程所涉及的各个步骤,设计出至少6种抑制翻译的方案。 答:
通过以下影响核糖体加工的方法可以抑制翻译:①阻碍起始因子三级结构的形成;②用反义RNA与mRNA结合形成双链结构抑制RNA翻译;③选择性地封闭30S亚基的P