位点与A位点;④引入错义抑制;⑤抑制30S与50S亚基的装配;⑥抑制转肽反应;⑦抑制核糖体的转位;⑧抑制核糖体的解离。
9.根据遗传密码字典,将mRNA序列5′-AUGUUCCAGACCACGGGCCCUAAA-3′翻译成多肽,假定翻译从5′端的AUG开始。如果 (1)C改成G; (2)C改成A; (3)C被缺失。 答:
Met-Phe-Gln-Ser-Thr-Gly-Pro-Lys。
(1)Met-Phe-Gln-Arg-Thr-Gly-Pro-Lys; (2)Met-Phe-Gln终止; (3)Met-Phe-Gln终止;
10.在大肠杆菌的一个无细胞蛋白质合成系统中,耗尽内源mRNA后与poly(AG)的随机多聚体共温育,其中A:G=3:1。预测何种氨基酸能够掺入到多肽中,以及它们的相对掺入频率。 答:
可能掺入的氨基酸及相对频率如下:
密码 氨基酸 频率
AAA 3×3×3=27
Lys =36/61
AAG 3×3×3=27
AGA Arg 3×3×3=27 =9/61
GAA 1×3×3=9
Glu =12/61
GAG 1×3×1=3 GGA 1×3×1=3
Gly =4/61
GGG 1×1×1=1
总数=61
11.为什么说翻译后氨基酸的化学修饰与蛋白质总体构象的形成有关? 答:
蛋白质总体构象取决于不同氨基酸之间氢键和疏水键形成的能力,以及侧链和其他基团对空间结构的影响,这些因素都与翻译后的加工有关。 12.说明氨基酸残基的磷酸化怎样调节蛋白质的活性? 答:
磷酸基团的添加常常会激活或失活酶。这两种情况在糖原的代谢控制中都能看到。磷酸基团同糖原磷酸化酶激酶结合后将酶由无活性转变为活性状态。相反,糖原合成酶被磷酸化后失活。
13.比较并指出O-连接和N-连接合成途径的异同。 答:
主要差别是:O-连接的侧链是直接在多肽上合成,聚糖逐步合成。N-连接的聚糖产生于
前体寡聚糖,这种前体寡聚糖是在一种叫作长醇的不饱和脂上合成的,然后N-聚糖被转给多肽。
14.为什么大多数移码突变导致多肽链的提前终止?
答:由于大多数的移码突变都会产生一个相同的链终止密码。
15.在一个外蛋白质翻译系统中,poly(UC)可被翻译成由Phe和Cye组成的蛋白质,但其中没有Ala。1962年Chapeville用拉内镍(Raney nickel)处理携带Cys的tRNA,削弱了
Cys与Ala的连接,当这种被改变的氨酰tRNA 用于体外系统中时,Ala能掺入蛋白质中,解释该结果的重要性。 答:
改变了tRNA虽然携带丙氨酸,但仍然具有半胱氨酸的反密码子,能对poly(UG) 中的半胱氨酸的密码子作出反应。因为poly(UG)不能正常地刺激通过丙氨酰-tRNA来掺入丙氨酸,所以对应每个密码子所掺入的氨基酸就必须依赖于tRNA的反密码子,而不是它们所携带的氨基酸。
16.列出各种tRNA 所有相同的反应及个别tRNA的特有反应。
答(1)相同反应:与核糖体结合;除了起始tRNA以外,其他均与延长因子相互作用。 (2)特殊反应:起始氨酰tRNA 的甲基化作用;起始氨酰tRNA同起始因子的相互作用;密码子与反密码子的碱基配对;由氨酰tRNA合成酶催化氨酰化。 17.起始tRNA 具有哪些两种与其他tRNA不同的特性? 答:(1)带有一个甲酰化的氨基酸(N-甲酰甲硫氨酸)。 (2)它是惟一一种同30S核糖体亚基-mRNA复合物内的密码子(AUG)起反应的tRNA。 18.区别tRNA 和mRNA在翻译中的作用。
答:mRNA是氨基酸装配成多肽的模板。tRNA一方面是识别特异氨基酸的接头分子,另一方面又可以识别特异的mRNA密码子。 答:
19.氨基酸分子如何与正确的tRNA分子连接?
答: 对于每一种氨基酸都有一种特殊的氨酰tRNA合成酶,这种酶可以识别自己的氨基酸和相应的空载tRNA。在ATP存在的情况下,它把氨基酸的羧基同tRNA 3′端的CCA连接起来。