沉降菌碟暴露时间验证文件
验证项目 验证方案编号 验证报告编号 验证证书编号
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沉降菌碟暴露时间 验证文件
目录
一、验证方案起草、审批 ............................................................................................. 1 二、验证报告起草审查及会审 ...................................................................................... 1 三、验证证书的批准 .................................................................................................... 1 四、引言 ...................................................................................................................... 2 五、菌种及培养基........................................................................................................ 2 六、菌液制备 ............................................................................................................... 2 七、验证方法 ............................................................................................................... 2 八、回收率计算 ........................................................................................................... 3 九、结果判断 ............................................................................................................... 3 十、验证结果和记录（附后） ...................................................................................... 3 十一、验证报告（附后） ............................................................................................. 3 十二、验证证书（附后） ............................................................................................. 3
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沉降碟暴露时间验证方案
一、验证方案起草、审批
1、验证方案起草 验证项目 使用部门 起草部门 起草人签名 沉降碟暴露时间验证 中心检验室 中心检验室 验证方案编号 验证委员会主任 YZ-13580-1 日 期 2、验证方案会审 审核人 日 期 3、验证方案批准 批准人 签名 日 期
二、验证报告起草审查及会审
1、验证报告起草 验证项目 使用部门 起草部门 起草人签名 日 期 2、验证报告会审 审核人 日 期
沉降碟暴露时间验证 中心化验室 验证报告编号 中心化验室 三、验证证书的批准
验证项目 使用部门 批准人 签名 日 期
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沉降碟暴露时间验证 中心化验室 验证证书编号 验证委员会主任
四、引言
1、验证目的：验证我公司沉降碟的暴露时间为4小时，依据《中国药典》2010年版附录无菌检查法和微生物限度检查法下灵敏度检查项进行验证，以证明沉降碟中培养基在空气暴露时间可以达到4小时。
2、概述：我公司沉降碟为普通的培养皿（φ90mm×15mm），所采用的培养基为大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA），每个培养皿含培养基20ml，根据培养基特性制订检验方法，按制定的方法进行试验，根据验证结果判断是否符合验证标准。
3、验证组织 组长：彭伟添
组员：陈杰辉，黄玉妍
五、菌种及培养基
1、菌种
金黄色葡萄球菌【CMCC（B）26003】、铜绿假单胞菌【CMCC（B）10104】、枯草芽孢杆菌【CMCC（B）63501】、生孢梭菌【CMCC（B）64941】、白色念珠菌【CMCC（F）98001】。
2、培养基
营养肉汤培养基、改良马丁培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、大豆酪蛋白琼脂培养基
3、无菌检验仪器及相关设备
无菌室、净化工作台、恒温培养箱（30～35℃）、生化培养箱（23～28℃）、高压蒸汽灭菌器、电子天平、电冰箱、电热干燥箱、玻璃器皿。
六、菌液制备
接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中培养18～24小时；接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中培养18～24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，培养24～48小时；上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。
菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2～8℃，可在24小时内使用。
七、验证方法
1、取配制好的沉降碟32个，同时灭菌后，取16个沉降碟，每3个分别接种小于100 cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30℃～35℃培养3天，逐日观察结果。
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2、把灭菌后的沉降碟16个放置在无菌检查时的超净洁净台上暴露4小时后，每3个分别接种小于100 cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30℃～35℃培养3天，逐日观察结果。
八、回收率计算
供试品组各的菌回收率（%）=
供试品组菌数-样品本底菌数×100%
验证加菌数九、结果判断
1、暴露前试验组的菌回收率应不低于70%。暴露4小时后试验组的菌回收率应不低于70%。
2、若暴露前试验组的菌回收率应不低于70%，说明加入的培养基能满足微生物生长，若暴露后试验组的菌回收率应不低于70%，说明培养皿暴露4小时后，培养基仍能满足微生物生长，
3、若任一次试验中试验组的菌回收率低于70%，应采用增加培养基，降低暴露时间，并重新进行方法验证，使试验组菌回收率大于70%。
十、验证结果和记录（附后） 十一、验证报告（附后） 十二、验证证书（附后）
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