2 方法
2.1 提取的工艺流程提取的工艺流程见图2。图2 八角茴香油的提取工艺流程
2.2 样品处理
2.2.1 八角茴香油的提取称取50 g的八角，按一定料液质量比将蒸馏水加入圆底烧瓶中，用挥发油提取装置进行提取八角茴香油3次，加热温度为100℃，收集其挥发油。第1次按1∶8料液质量比循环浸提3 h;第2次和第3次分别按1∶7和1∶6料液质量比循环浸提2 h。提油结束后读出提油装置中茴香油的体积，计算出得油率。
2.2.2 阴离子交换树脂的预处理[11]预处理流程为：乙醇浸泡 →水洗→酸洗→碱洗。
2.3 莽草酸样品的制备
2.3.1 阴离子交换树脂分离纯化莽草酸将经过预处理的150 g树脂和水同时倒入层柱析中，然后将八角水提液缓慢加入柱中，待交换完全后，用1.5～2.0倍树脂体积的2%的稀硫酸洗脱。每50 ml收集一次洗脱液，然后用旋转蒸发仪浓缩，加入少量乙醇溶解，用薄层色谱点板定性检测是否有莽草酸。如确定有莽草酸的存在，然后在室温下进行重结晶，使莽草酸晶体析出。
2.3.2 硅胶吸附的方法分离纯化莽草酸将水溶液浓缩旋干后，加入少量的乙醇，使其能重新充分溶解，加入80 g的硅胶(已在110℃烘干活化2 h)搅拌均匀，再倒入圆底烧瓶中用旋转蒸发仪旋干，然后倒入研钵中研碎，再放入烘箱中烘干，冷却后贮于干燥器中待用。使用干法装柱，然后用洗脱剂进行洗脱，再用旋转蒸发仪浓缩，加入少量乙醇溶解，用薄层色谱点板定性检测是否有莽草酸。如确定有莽草酸的存在，然后在室温下进行重结晶，使莽草酸晶体析出。
2.4 阴离子交换树脂的再生[12]用3%～5%的盐酸溶液浸泡2～4 h，用蒸馏水洗至中性，再用3%～5%的氢氧化钠溶液浸泡2～4 h，用蒸馏水洗至中性，备用。
2.5 莽草酸的薄层色谱法定性检测使用薄层色谱法检测的展开剂[13]：氯仿∶甲醇∶甲酸体积比=7.5∶0.5∶0.5。
2.6 莽草酸的HPLC定量检测[14]
2.6.1 对照品溶液制备准确称取莽草酸标准样品0.005 g,用蒸馏水溶解，倒入5 ml容量瓶中，定容至刻度，摇匀，配制成所含莽草酸的浓度为1.0 mg/ml的溶液。
2.6.2 HPLC色谱条件色谱柱：YWG C18柱(250 mm×4.6 mm，10 μm);流动相：V[0.01 mol/L Na2HPO4磷酸盐缓冲溶液]∶V[甲醇]=97∶3(磷酸盐缓冲溶液用磷酸调配，pH=3);流量：1.00 ml/min;检测波长：220 nm;进样量：10 μl;柱温：室温;灵敏度AUF：S=0.005。
2.6.3 标准曲线绘制精密吸取莽草酸标准样品溶液3，6，9，12 μl进样，测定色谱峰峰面积，并以色谱峰峰面积对标准样品的质量回归，得出回归方程。
2.6.4 精确度的测定精密吸取莽草酸标准样品溶液9 μl，按照上述色谱条件分别重复进样3次，测定精密度。
2.6.5 样品中莽草酸含量、得率、回收率的测定精确吸取用不同方法制备的莽草酸待测溶液10 μl进样，按照上述色谱条件测定待测溶液中莽草酸的色谱峰面积。计算样品中莽草酸的含量、得率和回收率。
3 结果
3.1 八角茴香油的得油率[15] X=0.990×3.3050.000×100%=6.543%在提取茴香油的过程中，精油在一直不断地蒸馏出来，水分有所损失。采取多次提取与蒸馏的次数，可以提高八角茴香油的得油率。
3.2 莽草酸定性检测结果在硅胶薄层上，制备的莽草酸样品与莽草酸标准样品在同一位置上出现相同颜色的斑点，Rf值为0.56。
3.2.1 莽草酸标准样品的标准曲线以莽草酸标准样品的色谱峰峰面积对莽草酸标准样品的含量回归，得回归方程Y=53 239X-22 614，r=0.997 2。其线性范围在0～12.0 μg内，具有良好的线性关系。见图3。
3.2.2 精密度的测定结果结果见表1。精密吸取莽草酸标准样品溶液9 μl，按照相同的色谱条件分别重复进样3次，测得其标准偏差为1.702×104，精密度为3.68%，精密度良好。图3 莽草酸标准样品的标准曲线表1 精密度实验结果