2.1.2 股骨骨折并脑损伤组 早期表现为血肿和炎性渗出增多，成纤维细胞和软骨细胞较少；骨折第7天成纤维细胞和软骨细胞开始增多；第14天出现成骨细胞及纤维性骨痂形成。
2.1.3 股骨骨折并脊髓损伤组 骨折第1天表现为血肿和炎性渗出反应，骨膜明显增厚；第4天开始骨膜内层形成软骨细胞，成纤维细胞明显增多，形成纤维性骨痂；第7天纤维骨痂中的软骨细胞团增大，有的融合在一起，软骨内骨化少，骨膜下软骨细胞层增厚；第14天仍可见大量纤维骨痂和软骨骨痂，软骨细胞团周边有少量结构稀疏的编织骨形成，外骨膜下的软骨层尚未完全转变成编织骨。
2.2 免疫组织化学观察
单纯股骨骨折组，骨折后骨痂内成纤维细胞及成骨细胞NGF呈阳性表达，阳性细胞数相对较少，骨折第1~14天阳性细胞数无明显变化。骨折并脑损伤组，骨折第1~7天骨痂内成纤维细胞及成骨细胞NGF表达较弱，阳性细胞数很少，第14天表达增强。骨折并脊髓损伤组，骨折第4天骨痂内成纤维细胞及成骨细胞NGF表达增强，第7天阳性细胞数明显增多，第14天达高峰。骨折并脊髓损伤组第4、7、14天，骨折并脑损伤组第14天阳性细胞数与单纯股骨骨折组比较差异有显著性（F=3.24~6.87,q=3.56~7.15,P<0.05）。见表1。
3 讨 论
表1 各组骨痂中NGF阳性细胞数测定结果（略）
NGF是一种含118个氨基酸的多肽激素，是神经生长因子家族的成员。1990年FRENKEL等［3］首次报道了鸡胚的软骨和骨细胞内有NGF，并采用免疫组织化学方法检测了不同时期鸡胚组织的NGF表达情况，发现6~14 d NGF表达阳性，超过17 d表达阴性，认为骨折愈合过程与胚胎骨形成相似，骨痂内和其他未成熟组织可能产生NGF，以诱导神经纤维长入骨痂中。本实验结果表明，脊髓损伤组早期骨痂形成量较单纯骨折组高，7~14 d达高峰，说明脊髓损伤后可使骨痂形成明显增多。免疫组织化学染色显示，脊髓损伤组早期骨膜下大量纤维母细胞和成骨细胞内NGF强阳性表达。据此推测，由于脊髓损伤后早期骨痂内NGF强阳性表达，刺激纤维骨痂和软骨骨痂大量形成，参与骨折愈合过程。脑损伤组早期骨痂形成量少，骨膜下纤维母细胞和成骨细胞内NGF弱阳性表达，其影响因素可能与打击量过大，对脑组织造成过于严重的损伤有关，脑组织的损伤程度和NGF水平之间的关系有待于进一步的研究。中枢神经系统外伤后NGF影响骨折愈合可能机制如下。①NGF与受体结合：由于成骨细胞膜上有NGF的受体［4］，内源性与外源性NGF可与其结合，使成骨细胞发生磷酸化过程，增强骨细胞活性，成骨能力增强，促进骨折愈合。②NGF引导神经长入骨痂：GRILLS等［5］研究证明，骨痂中骨祖细胞、成骨细胞等可产生NGF，NGF可诱导交感和感觉神经纤维长入骨痂，这些神经纤维可释放神经肽递质，有抑制骨吸收作用。它还能通过刺激细胞有丝分裂和骨基质细胞分化刺激骨形成，由于NGF可能通过增加交感神经的支配间接增加血管的生成，从而促进骨化。③NGF促进P物质（SP）、降钙素基因相关肽（CGRP）的释放：MALCANGIO等［6］研究显示，NGF能刺激大鼠脊髓SP、CGRP的释放，其释放的方式可沿轴浆转运到骨折局部，通过旁分泌释放，也可通过血液以内分泌方式到达骨折局部，刺激成骨。④NGF在骨组织对1,25二羟基维生素D3［1,25(OH)2D3］的摄取过程中起调节作用：1,25(OH)2D3在骨代谢过程中非常重要，而在成骨细胞的培养基中加1,25(OH)2D3可使成骨细胞表达NGF［4］，反过来NGF可能调节骨组织对1,25(OH)2D3的摄取。
［参考文献］
［1］郭云良主编. 神经生物学技术［M］. 青岛: 中国海洋大学出版社, 2005:3437.